壯藥牙膏的研制及藥效研究

【摘要】目的:對山風、九層風、戰骨、三葉青藤、山芝麻、紅魚眼等6種壯藥及其復方牙膏進行抗炎鎮痛止血活性篩選，研制高效壯藥牙膏。方法:用小鼠耳腫脹法及大鼠足腫脹法觀察其抗炎作用，用小鼠扭體法和熱板法觀察其鎮痛作用，小鼠局部止血實驗觀察其止血作用。結果:6種牙膏在抗炎方面與空白組比，均有顯著性差異(P<0.05)，而在鎮痛方面，除三葉青藤組和戰骨組外，其他組與空白組相比均具有顯著性差異(P<0.05)，山風和山芝麻及其復方牙膏還具有明顯的止血作用(P<0.05)。結論:山風等6種壯藥牙膏均具有較強的抗炎作用;三葉青藤和戰骨牙膏鎮痛效果不理想，而其他壯藥牙膏均具有較強鎮痛作用。尤其是山風單方和復方牙膏山風牙膏鎮痛止血效果優于兩面針牙膏。

【關鍵詞】山風;山芝麻;壯藥;抗炎;鎮痛;牙膏

【中圖分類號】R284.1【文獻標識碼】A【文章編號】1007-8517(2010)12-195-2

我國中藥資源主要由中藥、民間藥和民族藥三個部分組成，藥物資源中85%為民族藥[1]。民族藥具有鮮明的地域性和民族傳統。

壯族主要集中于廣西壯族自治區，據調查，廣西中草藥、民族藥資源達到4623種，居全國第二，但開發利用不到20%。壯藥是少數民族人口最多的民族藥，至今仍未有國家標準，有待于進一步研究[2]。

山風(Blumea aromatica DC.)、九層風(Cladostachys frutescens D.Don)、戰骨(Premna fulva crai)、三葉青藤(Illigera rhodantha Hance)、山芝麻(Helicteres angustifolia L.)、紅魚眼(Phyllanthus reticulatus Poir.var.glaber Muell. Arg)和兩面針(Radix Zanthoxyli)均是廣西道地藥材和常用壯藥，有祛風、消腫、止痛、清熱、解毒等作用[2-3]。治療跌打損傷和類風濕性關節炎滿意的療效[3]。本實驗將它們各自及藥效顯著的山風復方引入牙膏體系中，研制高效壯藥牙膏。

1材料

1.1實驗動物

昆明種小鼠和SD大鼠分別由廣西醫科大學實驗動物中心和長沙開福區東創實驗動物科技服務部提供，許可證號:scxk桂2003-0003和scxk湘2006-0001。

1.2儀器

RB—200智能熱板儀(成都泰盟科技有限公司，序列號:TM026-0710-02-022-009)。

1.3藥品

壯藥均經廣西中醫學院劉壽養副教授鑒定，二甲苯(上海試劑一廠，試—2004-12-08)，0.6%的醋酸(自行配制)，弗氏完全佐劑(sigma公司CAS 9007-81-2)。

2方法

2.1壯藥牙膏的制備

稱取每種藥材各500g，分別加入10倍量、8倍量、6倍量75%EtOH熱回流提取3次，時間分別為2h、1.5h、1h，抽濾，減壓濃縮，冷凍干燥，得干燥粉末。將相當于1.25g、2.5g或4g(高、中、低濃度)藥材的干燥粉末加入空白基質牙膏，得到相應的壯藥牙膏，復方牙膏的配比為1:1。

1000g藥物(空白)牙膏膏體的制備:在暫存缸中投入計量好的純凈水、160g山梨醇、50g丙二醇、100g甘油等液料;在預分散釜中投入200g二氧化硅、3g糖精鈉、10g羥基纖維素鈉、23g十二烷基硫酸鈉、相當于1.25g、2.5g或4g藥材的提取物、1.5g苯甲酸鈉等粉料進行預分散、混合;開制膏釜真空泵吸入上述液料;然后開刮刀，進上述粉料，開攪拌器和膠體磨，50min后投入10g薄荷香精，10min后依次關閉膠體磨、攪拌器、刮刀、破真空，停真空，取樣檢測合格后制成。

2.2單味壯藥牙膏的藥效研究

2.2.1壯藥牙膏對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響

取健康雌性小鼠90只，隨機分為隨機分為空白組、陰性對照組、陽性組，受試藥物組(6組)共9組。在小鼠右耳均勻涂二甲苯0.02m1/只，30min后，分別在右耳涂于相應的藥物1g，涂藥后1小時后處死小鼠，擦凈耳部所涂藥物，用打孔器取下左右耳孔，以左右耳片重量之差計算腫脹度。

2.2.2壯藥牙膏對大鼠佐劑性關節炎原發病變的治療作用

選用雌性大鼠90只，隨機分為隨機分為空白組、陰性對照組、陽性組，受試藥物組(6組)共9組。把大鼠固定好后，測量致炎前大鼠左后足跖厚度后，給大鼠左后足跖注射弗氏完全佐劑0.1ml，然后將1g藥物涂于大鼠左后足，于致炎后3h，將所涂藥物搽凈，用游標卡尺測定致炎后3h大鼠左后足厚度。以其致炎前后的足厚度差值為腫脹度。

2.2.3壯藥牙膏鎮痛作用(扭體法)

取小鼠90只，雌性，隨機分為隨機分為空白組、陰性對照組、陽性組，受試藥物組共9組。腹部剃毛(2cm×2cm)24h后，各組將不同藥物1g涂于每只小鼠腹部皮膚，給藥30min后，每鼠分別ip0.6%醋酸溶液0.2ml，觀察并記錄15min內的扭體次數。

2.2.4壯藥牙膏小鼠熱板法鎮痛實驗

取小鼠90只，雌性，隨機分為隨機分為空白組、陰性對照組、陽性組，受試藥物組(6組)共9組。將小鼠固定好后，在小鼠雙足涂相應藥物1g，1小時后，熱板法測定各藥物組小鼠在55±0.5℃的熱板儀上的痛閾值。計算痛閾值之差。

2.2.5壯藥牙膏小鼠局部止血實驗

取小鼠80只，雌性，隨機分為為空白組、陰性對照組、陽性組，藥物組(5組)共8組。其中，空白組不做任何處理，陰性對照組涂空白基質牙膏1g，陽性組涂兩面針牙膏1g。將小鼠麻醉后，開腹，暴露肝臟，用剪刀在肝臟表面剪去一塊長約1cm，寬約0.2cm的組織，將涂有1g受試藥物的紗布覆蓋上去，每隔15s，觀察一次，記錄止血時間，比較各組之間的止血時間差異。

2.3復方壯藥牙膏的藥效學研究實驗方法同2.2

2.4統計學處理

實驗數據均以eχ±s表示，統計學處理采用SPSS11.5統計軟件進行方差分析，并作組間兩兩比較。

3結果

3.1壯藥牙膏對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響

表1 單味壯藥牙膏對二甲苯所致小鼠耳腫脹的影響(eχ±s)

組別動物數(只)腫脹度(×10-3，g)

空白對照組102.61±1.09△

兩面針牙膏組

(陽性組)101.12±0.57*

空白基質牙膏組102.28±1.09△

山風牙膏101.21±0.47*

九層風牙膏組101.11±0.84*

戰骨牙膏組101.42±0.76*

三葉青藤牙膏組101.56±1.04*

山芝麻牙膏組101.54±0.80*

紅魚眼牙膏組101.07±0.61*

注:和空白組相比:*P<0.05，和兩面針牙膏組比較:△P<0.05。

表2 山風復方壯藥牙膏對二甲苯所致小鼠耳腫脹的影響(-χ±s)

組別動物數(只)腫脹度(×10-3，g)

空白對照組103.91±1.23△

兩面針牙膏組(陽性組)100.88±0.29*

空白基質牙膏組103.59±0.90△

山風牙膏組102.18±0.73*△

(山風∶九層風)復方牙膏組102.12±0.67*△

(山風∶山芝麻)復方牙膏組101.22±0.43*

注:和空白組相比:*P<0.05，和兩面針牙膏組比較:△P<0.05。

表3 不同濃度山風單方復方壯藥牙膏對二甲苯所致小鼠耳腫脹的影響(-χ±s)

組別動物數(只)腫脹度(×10-3，g)

空白對照組102.86±0.81△

兩面針牙膏組(陽性組)101.85±0.63*

空白基質牙膏組102.76±0.70△

山風牙膏組102.19±0.50*

山風(高濃度)牙膏組101.71±0.54*

山風(低濃度)牙膏組102.47±0.53△

(山風∶山芝麻)(高濃度)復方牙膏組101.58±0.47*

(山風∶山芝麻)(低濃度)復方牙膏組102.25±0.77*

注:和空白組相比:*P<0.05，和兩面針牙膏組比較:△P<0.05。

由表1可知，對于小鼠耳廓腫脹度，空白組與陽性組、6種壯藥牙膏之間的差異有顯著性意義(P<0.05)。由表2、表3可知，除低濃度山風牙膏組外，空白組與陽性組、山風單方和復方壯藥牙膏之間的差異有顯著性意義(P<0.05)，其中，高濃度山風單方及復方壯藥牙膏抗炎效果均優于陽性組。

3.2壯藥牙膏對大鼠佐劑性關節炎原發病變的治療作用

由表4、表5可知，對于3h后大鼠足跖腫脹度，空白組與陰性組、陽性組、其它壯藥牙膏之間的差異有顯著性意義(P<0.05)，其中，低濃度山風單方壯藥牙膏無抗炎作用，山風單方及復方壯藥牙膏抗炎效果均優于陽性組。

表4 單味壯藥牙膏對弗氏完全佐劑所致大鼠足腫脹的影響(eχ±s)

組別動物數(只)腫脹度(cm)

空白對照組100.4271±0.0744△

兩面針牙膏組(陽性組)100.1752±0.1032*

空白基質牙膏組100.3624±0.0374*△

山風牙膏100.2214±0.0339*

九層風牙膏組100.2512±0.0759*△

戰骨牙膏組100.2848±0.0687*△

三葉青藤牙膏組100.3624±0.0354△

山芝麻牙膏組100.2368±0.0459*

紅魚眼牙膏組100.2624±0.0908*△

注:和空白組相比:*P<0.05，和陽性組比較:△P<0.05。

表5 不同濃度山風單方復方壯藥牙膏對弗氏完全佐劑所致大鼠足腫脹的影響(-χ±s)

組別動物數(只)腫脹度(×10-4，m)

空白對照組1029.32±4.32△

兩面針牙膏組

(陽性組)1020.36±8.98*

空白基質牙膏組1028.76±4.48△

山風牙膏組1022.14±6.26*

山風(高濃度)

牙膏組1019.08±5.16*

山風(低濃度)

牙膏組1027.32±4.93△

(山風∶山芝麻)(高濃度)復方牙膏組1017.16±6.11*

(山風∶山芝麻)(低濃度)復方牙膏組1022.66±5.52*

注:和空白組相比:*P<0.05，和陽性組組比較:△P<0.05。

表6 單味壯藥牙膏對扭體法所致小鼠扭體次數的影響(eχ±s)

組別動物數(只)扭體次數(次/15min)

空白對照組1027.0±5.4△

兩面針牙膏組(陽性組)108.4±3.0*

空白基質牙膏組1023.1±9.28△

山風牙膏107.4±2.2*

九層風牙膏組1019.6±7.6*△

戰骨牙膏組1024.3±4.7△

三葉青藤牙膏組1024.0±5.9△

山芝麻牙膏組108.5±2.8*

紅魚眼牙膏組1017.0±4.9*△

*:和空白組相比:P<0.05，△:和陽性組比較:P<0.05。

表7 不同濃度山風單方復方壯藥牙膏對扭體法所致小鼠扭體次數的影響(-χ±s)

組別動物數(只)扭體次數(次/15min)

空白對照組1019.9±7.9△

兩面針牙膏組(陽性組)106.8±2.9*

空白基質牙膏組1019.3±6.8△

山風牙膏組107.9±2.9*

山風(高濃度)牙膏組106.1±2.0*

山風(低濃度)牙膏組1018.0±5.9△

(山風∶山芝麻)(高濃度)復方牙膏組104.5±2.1*

(山風∶山芝麻)(低濃度)復方牙膏組109.9±2.6*

注:和空白組相比:*P<0.05，和陽性組組比較:△P<0.05。

3.3壯藥牙膏鎮痛作用(扭體法)

由表6、表7可知，對于小鼠15min內的扭體次數，除戰骨、三葉青滕牙膏組、山風(低濃度)牙膏組外，其余各組與空白組相比P<0.05，其中，山風單方及復方高濃度牙

(下轉第235頁)

(上接第196頁)

膏組鎮痛效果均優于陽性組。

表8 單味壯藥牙膏對熱板法所致小鼠鼠足痛閾值的影響(eχ±s)

組別動物數(只)痛閾時間差(s)

空白對照組104.3±1.0△

兩面針牙膏組(陽性組)1011.6±1.3*

空白基質牙膏組105.4±1.8△

山風牙膏109.8±2.0*△

九層風牙膏組107.1±2.0*△

戰骨牙膏組109.0±1.9*△

三葉青藤牙膏組106.3±1.2*△

山芝麻牙膏組1010.7±2.5*

紅魚眼牙膏組107.7±1.71*△

*:和空白組相比:P<0.05，△:和陽性組比較:P<0.05。

表9 不同濃度山風單方復方壯藥牙膏對熱板法所致小鼠鼠足痛閾值的影響(eχ±s)

組別動物數(只)痛閾時間差(s)

空白對照組101.85±0.74△

兩面針牙膏組(陽性組)1016.74±7.24*

空白基質牙膏組109.27±3.82△

山風牙膏組1017.18±7.90*

山風(高濃度)牙膏組1021.33±9.49*

山風(低濃度)牙膏組109.23±2.08△

(山風∶山芝麻)(高濃度)復方牙膏組1021.91±8.58*

(山風∶山芝麻)(低濃度)復方牙膏組1014.18±5.47*

注:和空白組相比:*P<0.05，和陽性組組比較:△P<0.05。

3.4壯藥牙膏小鼠熱板法實驗

由表8、表9可知，對于小鼠痛閾的影響，除山風(低濃度)牙膏組和空白基質牙膏組外，其余各組與空白組相比P<0.05，其中，山芝麻牙膏組與陽性組之間的差異沒有顯著性意義(P>0.05)，而山風單方及復方牙膏組鎮痛效果均優于陽性組。

3.5不同濃度山風單方復方壯藥牙膏小鼠局部出血實驗的實驗結果

表10 不同濃度山風單方復方壯藥牙膏對小鼠局部出血止血時間的影響(-χ±s)

組別動物數(只)止血時間(s)

空白對照組10111.75±33.95△

兩面針牙膏組(陽性組)1053.22±17.84*

空白基質牙膏組10110.43±34.17△

山風牙膏組1070.36±10.07*

山風(高濃度)牙膏組1037.28±8.78*

山風(低濃度)牙膏組10100.16±17.27△

(山風∶山芝麻)(高濃度)復方牙膏組1036.28±7.91*

(山風∶山芝麻)(低濃度)復方牙膏組1063.84±20.55*

注:和空白組相比:*P<0.05，和陽性組組比較:△P<0.05。

由表10可知，除山風(低濃度)壯藥牙膏組和空白基質牙膏組外，其余組與空白組相比P<0.05，其中，山風單方及復方高濃度牙膏組止血效果均優于陽性組。

4結論

本研究結果顯示，山風等6種壯藥牙膏均具有較強的抗炎作用，三葉青藤和戰骨壯藥牙膏鎮痛效果不理想，而其他壯藥牙膏均具有一定的鎮痛作用。尤其是山風單方及復方高濃度牙膏抗炎鎮痛止血效果均優于兩面針牙膏。

本研究將山風等六種壯藥及復方引入牙膏體系中，測試其抗炎鎮痛止血效果，研制高效壯藥牙膏，希望能為擴大其應用范圍起到拋磚引玉的作用。

參考文獻

[1] 張惠源，趙潤懷，袁昌齊，等.我國中藥資源種類[J].中國中藥雜志，1995，20(7):387-388.

[2] 新華.探尋我國壯醫藥發展[J].醫藥論壇，2006，3(1):85-87.

[3] 廣西壯族自治區食品藥品監督管理局編.廣西壯族自治區壯藥質量標準(第一卷)[M].廣西科學技術出版社，2008.