三種不同齦下沖洗液對慢性牙周炎齦溝液中II型膠原酶水平的影響

[摘要]目的:比較在齦下刮治的同時使用不同的藥物沖洗對慢性牙周炎患者齦溝液中II型膠原酶水平的影響。方法:選取90例慢性牙周炎患者，隨機分為3組，在超聲齦下刮治同時分別使用0.2%氯已定溶液、0.2%替硝唑溶液和生理鹽水進行沖洗。收集治療前及治療2周后患牙的齦溝液并記錄相關的臨床指標。采用雙抗體夾心ELISA法對齦溝液中II型膠原酶水平進行檢測。結果:經過超聲齦下刮治，患牙牙周臨床指標均有明顯的改善，齦溝液中II型膠原酶的水平明顯降低，0.2%氯已定組和0.2%替硝唑組降低較生理鹽水組更顯著(P<0.01)，但前兩組之間無顯著性差異(P>0.05)。結論:超聲齦下刮治的同時使用抗菌藥物沖洗會對齦溝液中II型膠原酶水平產生顯著影響。

[關鍵詞]齦溝液;齦下沖洗;II型膠原酶;氯已定;替硝唑

[中圖分類號]R783 [文獻標識碼]A [文章編號]1008-6455(2010)04-0563-03

Effects of subgingival irrigation with three different drugs on COL-II level in the Gingival Cervicular F1uid with chronic periodontitis

WANG Li-ming，ZHANG Jie

(Shanghai Stomatological Disease Center， Shanghai 200001，China)

Abstract:ObjectiveTo compare if simultaneous subgingival irrigation with different drugs during ultrasonic scaling could affect the II type Collagenase(COL-II)level in the Gingival Crevicular F1uid(GCF)of teeth with chronic periodontitis. Methods90 patients with chronic periodontitis were selected and randomly divided into three groups.All patients were treated by ultrasonic scaling and irrigated respectively with 0.2% Chlorhexidine，0.2% Tinidazole and 0.9% Sodium Chloride at the same time.GCF was sampled and the periodontal indexes were recorded before treatment and two weeks after scaling.The COL-II level in GCF was detected using ELISA method.ResultsTwo weeks after ultrasonic scaling，both periodontal indexes and the COL-II level in GCF reduced，and that in 0.2% Chlorhexidine，0.2% Tinidazole were significant lower than that in 0.9% Sodium Chloride(P<0.01).But no significant difference between the first two Groups(P>0.05).ConclusionSubgingival irrigation with 0.2% Chlorhexidine and 0.2% Tinidazole combining with ultrasonic scaling were more effective in reducing the COL-II level in GCF.

Key words:Gingival Crevicular Fl uid(GCF);subgingival irrigation，Ⅱtype collagenase;Chlorhexidine;Tinidazole

膠原酶(collagenase，COL)是一種金屬基質蛋白酶，通過降解膠原導致牙周組織破壞，牙周炎癥各臨床指標與酶的活性高度相關[1]。替硝唑對齦下菌斑中的厭氧菌有明顯的抑制作用，而氯已定抗菌譜廣，對革蘭陽性和陰性菌均能發揮抗菌作用，將抗菌藥物作為齦下沖洗液與齦下刮治結合使用，送達牙周袋深部，以期達到良好的治療效果。現代的超聲波潔牙機帶有自身給水裝置，可在齦下刮治的同時進行藥物沖洗。本文比較超聲齦下刮治同時使用不同的藥物沖洗對齦溝液中II型膠原酶(II type collagenase，COL-II)水平的影響。

1材料和方法

1.1 病例選擇:從牙周病門診的患者中選取滿足以下條件的90例慢性中、重度牙周炎患者:①1個月內未服用抗生素，3個月內未進行過牙周治療;②無全身系統性疾病，女性未妊娠或哺乳;③所選同頜第一磨牙無齲壞，至少有一個位點的牙周袋探診深度≥5mm，臨床有保留價值。隨機分為超聲齦下刮治同步0.2%氯已定沖洗組、 超聲齦下刮治同步0.2%替硝唑沖洗組和超聲齦下刮治同步生理鹽水沖洗組。

1.2 GCF樣本的收集和保存:將2張裁成2mm×8mm的Whatman 3#濾紙條置于微離心管中，用電子分析天平FA1004(上海衡平儀器儀表廠)稱重備用。輕輕去除觀察牙的齦上菌斑，隔濕、干燥牙面，將濾紙條小心地插入該牙近中頰側齦溝內不超過lmm處，留置30s后取出(若濾紙條上有血則棄用)，10s后在同一位點再次取樣。將同一患牙的2張濾紙條放入微離心管，再次稱重，計算齦溝液的重量。-70℃貯存備用。

1.3 臨床觀察指標的檢查和記錄:齦溝出血指數(Sulcus Bleeding Index，SBI):按 1981年Mazza的標準[2]分為0～5度，以出血情況最嚴重的值為記錄值。牙周探診深度(Probing Depth，PD) :按《臨床牙周病學》標準檢查[2]，記錄探診最深點的讀數。

附著水平(Attachment Level，AL):按《臨床牙周病學》標準檢查[2]，記錄最大值。

1.4 實驗方法:收集患牙GCF樣本，記錄相關臨床指標，作為基線。三組均使用Suprasson PMax超聲治療儀(賽特力公司，法國)，選擇相同功率，同等噴水量，在超聲齦下刮治的同步分別用0.2%氯已定、0.2%替硝唑和生理鹽水進行沖洗，直至尖探針檢查根面光滑為止。患者在觀察期內不使用任何藥物。2周后再次收集同一觀察牙的GCF樣本，檢查和記錄牙周臨床指標。以上工作均由同一位醫師完成。

1.5 GCF中COL-II的檢測:采用雙抗體夾心法對GCF中COL-II進行測定。ELISA試劑盒由上海銳聰實驗室設備有限公司提供。純化的人COL-II抗體包被微孔板，制成固相抗體，向微孔中依此加入樣本，與辣根過氧化物酶標記的COL-II抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經徹底洗滌后加底物顯色液顯色。顯色液在辣根過氧化物酶催化下呈藍色，在終止液的作用下最終呈黃色。顏色深淺和樣品中的COL-II呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值)，通過標準曲線計算樣本中人COL-II的濃度。

1.6 統計學分析:采用SPSS18.0統計軟件(方差分析，Spearman相關分析)進行數據處理。

2結果

三組治療前后GCF中COL-II水平存在顯著性差異(P<0.01)，治療后A、B兩組與C組之間COL-II水平差異有統計學意義(P<0.05)，A、B兩組之間COL-II水平差異無統計學意義(P>0.05，見表1);治療前后PD、AL有顯著性差異(P<0.05)，但各組間差異無統計學意義(P>0.05，見表2～3);SBI統計結果顯示兩組療效相同(見表4);COL-II水平與PD、AL均呈正相關關系(見表5)。

3討論

牙周病是一種由口腔內細菌特別是厭氧菌感染為主的多因素疾病。菌斑作為牙周病的起始因子，不但直接破壞牙周組織，還激發宿主炎癥反應和免疫反應，提高膠原酶活性從而造成牙周組織破壞。大量研究表明[3-7]:膠原酶通過降解牙周組織中的膠原從而造成牙周組織破壞，附著喪失，牙周袋形成，牙槽骨吸收。其中II型膠原酶在牙周破壞中起主要作用。牙周炎患者的炎癥程度及各項臨床指標均與COL-II水平高度相關。

去除齦下菌斑和牙石是治療牙周病的基礎，但其有效性會因牙周袋深度和根分叉區域病變而受到影響。替硝唑是一種療效高、療程短、耐受性好的廣譜抗厭氧菌的藥物，具有抗厭氧菌活性高、人體內半衰期長、組織滲透性好等特點，能夠有效控制口腔厭氧菌感染，而氯已定是高效、廣譜殺菌劑，對革蘭陽性和陰性菌均有殺菌作用，且不受膿血的影響，兩者均是治療成人牙周病常用的輔助手段。局部給藥的方式可以提高局部藥物濃度，提高療效，降低副作用[8-9]。有研究認為，用于牙周袋內沖洗的抗菌藥物的作用具有累積效應[10]，含抗菌成分的沖洗劑緩解牙周炎臨床癥狀的作用明顯優于生理鹽水[11]。

隨著超聲技術的發展，超聲治療儀已經被廣泛應用在牙周病的治療方面。Suprasson PMax超聲治療儀自帶專用儲液罐，可以在齦下刮治的同時進行藥物沖洗。本實驗表明在獲得良好的菌斑控制后，牙周組織炎癥得以緩解，牙周炎患牙的臨床指標都有不同程度的改善，齦溝液中COL-II的水平也明顯下降。超聲齦下刮治同步使用藥物沖洗齦溝液中COL-II的水平下降尤為顯著，說明該方法對牙周炎的治療效果較傳統方法更優。提示目前牙周病治療中常用的沖洗液及含漱藥物，如氯己定、替硝唑等均能有效減輕牙周組織炎癥，而且沖洗液進入牙周袋的深度和作用時間與其抗菌效果密切相關，但遠期效果缺乏相關研究數據。另外在實際操作過程中，因沖洗藥物口味較苦澀，個別患者難以耐受，提示我們可在沖洗藥物的配方及最低抑菌濃度上有所改進。

[參考文獻]

[1]楊國紅，束 蓉，劉 正.齦溝液三種酶的檢測在早期牙周病診斷中的作用[J].上海口腔醫學，2002，11(4):294-296.

[2]曹采方.臨床牙周病學[M].北京:北京大學醫學出版社，2006:117-120.

[3]Chen HY，Cox SW，Eley BM，et a1.Matrix metalloproteinase-8 levels and elastase activities in gingival crevicular fluid from chronic adult periodontitis patients[J].J Clin Periodontol，2000，27:366-369.

[4]王 靜，唐榮銀，王志良，等.五倍子水提取物對膠原酶活性的影響[J].臨床口腔醫學雜志，2006，22(8):451-455.

[5]Romanelli R，Mancini Si，Laschinger C，et al.Activation of neutrophil collagenase in periodontitis[J].Infect Immun，1999，67(5):2319-2322.

[6]顧晶晶，李明宇，葛琳華，等.小劑量多西環素對齦溝液中膠原酶的影響[J].上海交通大學學報(醫學版)，2007，27(6):659-662.

[7]趙 蕾，吳亞菲.DOXY和CMTs調節牙周炎宿主反應的研究進展[J].國外醫學口腔醫學分冊，2005，32(2):128-130.

[8]武常亮，韓曉杰，黃玉梅.替硝唑溶液含漱治療成人牙周炎的療效觀察[J].中國實用醫藥，2008，3(28):117-120.

[9]王曉娟，鄧羽中，張道遠，等.替硝唑口貼片在健康者唾液中藥物濃度測定及其藥代動力學[J].實用口腔醫學雜志，2005，21(3):349-351.

[10]Walsh TF，Glenwright HD，Hull PS.Clinical effects of pulsed oral irrigation with 0.2% Chlorhexidine digluconate in patients with adult periodontitis[J].J Clin Periodontol，1992，19:244-246.

[11]向曉明，朱李微，李成章，等.在重度牙周炎非手術治療過程中4種制劑袋內沖洗的療效評價[J].武漢大學學報(醫學版)，2006，26(4):509-511.

[收稿日期]2010-02-05[修回日期]2010-03-20

編輯/何志斌