正交設計試驗優化櫻花多糖提取工藝的研究

沈　波　曹　瑩　江海濤

【摘要】本文主要利用正交設計試驗優化櫻花多糖的提取工藝，為櫻花多糖的提取研究提供相關的實驗數據。

【關鍵詞】櫻花多糖 正交設計 提取工藝

櫻花（學名Cerasua serrulata）為薔薇科（Rosaceae）櫻屬（Cerasus）植物，在世界各地都有栽培，具有很高的觀賞價值。目前，對櫻花的研究主要集中在櫻花的栽培上[1-3]，對于櫻花成分及功能的研究鮮有報道。本文主要通過正交試驗優化櫻花多糖的提取工藝，為櫻花多糖的提取研究提供相關的實驗數據。

1.實驗材料和方法

1.1材料

櫻花采自南京曉莊學院北圩校區

1.2儀器

電子精密天平、數顯恒溫水浴鍋（HH-4）、紫外可見分光光度計，離心機等。

1.3方法

1.3.1櫻花多糖的提取工藝

材料準備→前處理→浸提（蒸餾水提取）[4-6] →離心取上清液（重復提取3 次，合并上清液濃縮→3倍乙醇沉淀→離心分離→干燥→提取物的初步鑒定。

1.3.2正交設計因素水平表

采用正交設計[7-8]考察提取時間、提取溫度以及料液比三個因素對櫻花多糖提取程度的影響。精確稱取干燥的櫻花花瓣3g，分別以不同的提取時間，提取溫度，料液比為因素做3因素3水平正交試驗，每個處理重復3次。試驗設計（見表1）：

1.3.3 標準曲線制備

精密稱取105℃干燥到恒重的標準葡萄糖10mg，在100mL容量瓶中加純凈水溶解并稀釋至刻度，配成100ug.mL^-1的標準品溶液；分別精密吸取該溶液0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7mL，依次加蒸餾水稀釋至1mL。另取1mL水為空白，置冰水浴中5min；取出后，分別精密吸取4ml蒽酮試劑，沸水浴10min，取出，用自來水冷卻，室溫放置10min，用722型分光光度計于620nm處測定吸光度，以進樣濃度C（ug.mL^-1）對吸光度值A進行線性回歸。

2.結果

2.1葡萄糖標準曲線繪制

經回歸處理，得回歸方程為：

y=134.35x-20.424R2=0.975線性范圍：10-70ug.mL^-1

y為葡萄糖濃度（ug.mL^-1） x為葡萄糖

2.2不同因素對櫻花多糖提取的影響

利用正交設計軟件對試驗數據進行分析，結果見表2和表3。

3.討論

多糖的提取受到多種因素的影響。本實驗結果表明提取溫度、提取時間以及料液比三個因素對櫻花多糖的提取都有一定的影響。表2及表3分析可以看出，三個因素對還原糖提取的影響次為：提取溫度>提取時間>料液比。統計結果顯示，溫度對櫻花多糖的提取有顯著影響（P〈0.05），而提取時間和料液比的影響較小，無統計學差異。通過正交結果分析，櫻花多糖提取的最佳條件為A3B3C2 ，即3g干燥的櫻花花瓣置于燒杯中，加蒸餾水240ml，在90℃的水浴鍋中提取3h，過濾，濃縮，加3倍乙醇沉淀。有關提取工藝的研究將進一步深入。

參考文獻：

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作者簡介：沈波，（1987-），男，漢族，南京曉莊學院生命科學系大四學生。