ＨＰＬＣ法測定祛風通痹膠囊中士的寧的含量

王志巍　紀　玲　宋　岳

【摘要】 目的 采用高效液相色譜法測定祛風通痹膠囊中士的寧的含量。方法 選用C₁₈色譜柱；流動相：正己烷-二氯甲烷-甲醇-三乙胺(47.5∶47.5∶5∶0.4)；檢測波長：280 nm。結果 本方法的回收率為97.76%，RSD=1.75%(n=6)。結論 HPLC法準確，重現性好，可用于祛風通痹膠囊的質量標準。

【關鍵詞】HPLC法；士的寧；祛風通痹膠囊

Determination of strychnine in qufentongbi capsules by HPLC

WANG Zhi-wei,JI Ling,SONG Yue.Heilongjiang Jiamusi Institute for Drug Contrl，Heilongjiang 154007，China

【Abstract】 Objective A HPLC method was developed for the contents determination of strychnine in qufentongbi capsules.Methods The C₁₈column was used with a mobile phase wasn-hexane-dichloromethane-methanol-Triethylamine(47.5∶47.5∶5∶0.4).The detection wavelength was 280 nm.Results The average recovery was 97.76%，RSD=1.75%(n=6).Conclusion The method was accurate and reliable.It can be used for the quality control of qufengtongbi capsules.

【Key words】HPLC; Strychnine ;Qufengtongbi Capsules

祛風通痹膠囊是由三七、延胡索(制)、馬錢子(制)等十二味中藥組成的傳統醫院制劑，具有除濕通絡，活血化瘀的功效。用于痹癥，肩周炎，肌肉關節疼痛，屈伸不利，以及風濕性關節炎、類風濕性關節炎見以上證候者。其中馬錢子(制)中的士的寧既是治療風濕痹癥的活性成分，又是毒性成分，筆者根據中國藥典［1］中馬錢子的用量，對方中馬錢子的用量進行折算，采用HPLC法對方中的士的寧進行了含量測定。方法簡便、準確、重復性好，適用于該制劑的質量控制。

1 儀器與試藥

Agilent1100自動進樣高效液相色譜儀(安捷倫科技有限公司)士的寧(中國藥品生物制品檢定所 批號0705-200004 含量測定用)。樣品(醫院提供 批號：080711、080712、080713)。所用試劑甲醇、乙腈為色譜純，其他試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 色譜條件［2］ 色譜柱：AgilentC₁₈柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),流動相：正己烷-二氯甲烷-甲醇-三乙胺(47.5∶47.5∶5∶0.4)；檢測波長：280 nm； 流速：1.0 ml/min,柱溫：30℃，進樣量：5 μl。上述色譜條件下，理論板數按士的寧峰計不低于2000。見圖1。

2.2 對照品溶液的制備 精密稱取士的寧對照品10.25 mg，置100 ml量瓶中，加醋酸乙酯溶解并稀釋至刻度，制成每1 ml含0.102 5 mg的溶液，作為對照品溶液。

2.3 供試品溶液的制備［2］ 取本品20粒內容物，精密稱定，混勻，研細，取6 g，精密稱定，置250 ml圓底燒瓶中，加濃氨試液4 ml及氯仿25 ml，加熱回流50 min，放冷，濾過，殘渣加氯仿洗滌4次，每次5 ml，并入濾液，置分液漏斗中，用硫酸溶液(3→100)振搖提取5次，每次15 ml，合并酸液，用濃氨試液調節pH值至9~10，用氯仿振搖提取5次，每次20 ml，合并氯仿液，蒸干，殘渣加醋酸乙酯適量使溶解，轉移至5 ml量瓶中，加醋酸乙酯至刻度，搖勻，作為供試品溶液。

2.4 線性關系考察 分別精密量取上述對照品溶液0.5、1、2、4、8 μl照“2.1”色譜條件分別進樣，記錄色譜圖，以進樣量為橫坐標(μg)，色譜峰面積A為縱坐標繪制標準曲線。計算士的寧的回歸方程為A=1 525.930 2X+25.312 8，r=0.998 3結果表明，士的寧在51.25~820.0 μg范圍內線性關系良好。

2.5 精密度試驗 精密吸取對照品溶液各5 μl，重復進樣5次，測定峰面積，結果士的寧峰面積的RSD為0.5%。

2.6 重復性試驗 取樣品(批號080711)，平行稱取5份，按“2.3”方法制備，進樣，測定，計算。結果平均含量為0.045 mg/粒，RSD為2.1%。

2.7 穩定性試驗 精密吸取供試品溶液(批號080711)各5 μl，在0、2、4、6、8 h進樣，測定峰面積，結果士的寧峰面積的RSD為1.5%，表明士的寧在8 h內穩定。

2.8 加樣回收率試驗 取已測定含量的樣品(批號080711，含量為0.045 mg/粒，平均裝量為0.432 g/粒)樣品6份，各精密稱定3 g，置250 ml圓底燒瓶中，分別加入上述對照品溶液2.4、3.0、3.6 ml，按2.3方法制備，進樣，測定，結果見表1。

2.9 樣品測定 分別精密吸取對照品溶液及供試品溶液各5 μl，注入色譜儀，按“2.1”色譜條件測定峰面積，以外標法計算士的寧含量，分別為0.045 mg/粒(批號080711)、0.055 mg/粒(批號080712)、0.050 mg/粒(批號080713)。

3 討論

3.1 檢測波長的選擇 筆者通過紫外光譜掃描，表明樣品和士的寧對照品的圖譜基本一致，且在280 nm處有最大吸收。

3.2 流動相的選擇 筆者參考文獻使用乙腈-1%的冰醋酸(10∶90)為流動相，但此流動相不能較好地將對照品峰與雜質峰分離。而本試驗確定的流動相卻能達到滿意的結果。

參考文獻

［1］ 國家藥典委員會.中國藥典(一部)．化學工業出版社，2005：34.

［2］ 國家藥品監督管理局編，國家中成藥標準匯編.中成藥地方標準上升國家標準部分經絡肢體腦系分冊，2002：338-339.