泰山土大黃總蒽醌含量的測定

段　瑞　蘇雪慧　曲曉蘭　高紅莉　蘇延友

【摘要】 目的 測定泰山土大黃的總蒽醌含量。方法 應用紫外分光光度法分別測定兩種提取方法的泰山土大黃總蒽醌的含量。結果 兩種提取方法的總蒽醌含量分別為0.328%和0.607%。結論 方法2更為準確可靠。

【關鍵詞】泰山土大黃；總蒽醌；含量測定

Determine total anthraquinone content of Taishan rumex nepalensis spreng

DUAN Rui,SU Xue-hui,QU Xiao-lan,et al.Pharmacological College of Taishan Medical University,Shandong 271016,China

【Abstract】 Objective To determine the total anthraquinone content.Of Taishan Rumex Nepalensis Spreng.Methods UV were determined both extraction methods of soil Taishan Rumex Nepalensis Spreng total anthraquinone content.Results Two methods of extracting the total content of anthraquinone were 0.328 percent and 0.607 percent.Conclusion Method 2 is more accurate and reliable.

【Key words】Taishan rumex nepalensis；Total anthraquinones；Determination

五岳獨尊的泰山不僅是世界自然文化雙遺產，而且蘊藏著豐富的中藥資源。泰山產土大黃是泰山分布廣泛且有重要開發應用前景的中藥之一。由于泰山獨特的地理條件，因而所產中藥材多具有明顯的地域特征。因此對于泰山地產藥材的系統研究及與其他產區相同藥材的比對研究是進一步研究開發的基礎。

土大黃又名吐血草、箭頭草、救命王、金不換、紅筋大黃、化血蓮等，多用蓼科酸模屬植物鈍葉酸模(Rumex obtusifoliusl)和紅絲酸模(Rumexchalepensis mill)的根和根莖^[1]，泰山產土大黃是蓼科酸模屬植物鈍葉酸模的根和根莖。有研究表明^[2，3]土大黃具有止血、祛痰止咳平喘、抗菌抗病毒、抗腫瘤等廣泛的藥理作用，主要藥效成分為總蒽醌類。本文應用了兩種蒽醌類成分的提取方法提取了泰山土大黃的總蒽醌，并應用紫外分光光度法分別測定了其含量。

1 實驗材料

土大黃(采于泰山)，大黃素(對照品，中國藥品生物制品鑒定所，批號110756-200110)；醋酸鎂、甲醇、三氯甲烷、無水乙醇、無水硫酸鈉等試劑均為分析純；所用儀器有紫外可見分光光度計Spectrumlab54(上海棱光技術有限公司)，旋轉蒸發器RE-52A(上海亞榮生化儀器廠)，電子分析天平AR2140［澳豪斯(上海)有限公司］。

2 方法與結果

2.1 顯色劑的配制 稱取適量醋酸鎂，用甲醇配制成0.6%的醋酸鎂-甲醇溶液作為顯色劑。

2.2 檢測波長的選擇 精密稱取大黃素適量，用0.6%醋酸鎂-甲醇溶液配成對照品溶液，測定在200~700 nm之間的紫外可見光譜，由測定結果可得在510 nm處有最大吸收，此波長被選為檢測波長。

2.3 標準曲線的建立 精密稱取大黃素對照品10 mg用甲醇定容為50 ml的標準容液。精密吸取標準液80、160、320、400、600、800、1000 μl于10 ml具塞試管中，用0.6%醋酸鎂-甲醇溶液定容，充分搖勻后于510 nm處測定吸收度。以0.6%醋酸鎂-甲醇液作空白對照。測定結果見表1。

2.4 蒽醌類成分提取方法及含量測定

2.4.1 方法1^[4]取土大黃藥材適量，粉碎后過60目篩。精密稱取粉末7.5 g(水分不高于9.0%)置索氏提取器中，加入乙醇適量，置沸水浴中加熱回流提取至黃色變淺至近無，提取液置水浴濃縮至約5 ml,放冷。加入稀鹽酸25 ml，氯仿150 ml，置水浴(80℃左右)加熱水解30 min，放冷，分出氯仿層。水液用氯仿萃取2次(100 ml 75 ml)合并3次氯仿液，揮干氯仿。殘渣用甲醇洗滌并轉入50 ml容量瓶中，稀釋至刻度搖勻后即為樣品溶液。離心后，取上清液1 ml于10 ml容量瓶中，甲醇定容，后取1 ml于10 ml容量瓶中，用0.6%醋酸鎂-甲醇定容后即可進行測定。測定結果見表1。

2.4.2 方法2^[5，6]精密稱取土大黃粉末0.051 6 g于燒瓶中，同時加30 ml氯仿和15 ml 2.5 mol/L硫酸，沸水浴回流水解2 h。后過濾取氯仿層，稱取適量無水Na₂SO₄加入氯仿中脫水后，回收氯仿。殘渣加甲醇溶解并定容為10 ml。精密吸取1 ml于10 ml容量瓶中，加0.6%醋酸鎂-甲醇溶液并定容。搖勻后于510 nm處測定吸光度并將結果代入回歸方程，可計算總蒽醌含量。所得結果見表2。

通過表2，可知方法2提取含量較高，方法1測定含量較低，可能在提取中將其有效成分破壞，也可因放置時間較長導致結果降低。究竟方法2合適與否，為了進一步確證，可用方法2進行加樣回收率實驗驗證測定結果的優劣。

2.5 加樣回收率實驗 取已提取盡蒽醌類成分藥材粉末80 mg，精密加入大黃素粉末5 mg，加入氯仿30 ml，沸水浴回流提取2 h，過濾，除去藥渣。回收氯仿后，加甲醇溶解并定容為25 ml。精密吸取1 ml于10 ml容量瓶中，用0.6%醋酸鎂-甲醇溶液定容，搖勻后于510 nm處測定吸收度，測定值代入回歸方程，計算含量，結果見表3。

2.6 顯色穩定性試驗 取高、低2個濃度的標準品液，按標準曲線制備方法，加0.6%醋酸鎂-甲醇液顯色，在室內燈光下，每隔一定時間于510 nm處測定吸光度，測定結果見表4。

3 討論

不同產地對土大黃總蒽醌含量有一定影響，泰山產土大黃總蒽醌含量略低于貴州所產^[7]，另外生長年限、采收時間也會影響其含量，產地及生長環境的影響機制尚有待于進一步研究。本實驗研究中考察了兩種不同提取方法對總蒽醌含量的影響，可以看出，由于所用試劑及處理方法不同，測定結果差異較大。經過加樣回收率實驗、顯色穩定性試驗等的考察，說明方法2更為準確可靠，可以作為總蒽醌含量測定的常規方法。

參 考 文 獻

［1］ 宋立人，洪恂，丁緒亮，等.現代中藥學大辭典.人民衛生出版社，2001.

［2］ 傅正良.牛廣斌.王麗芳.論大黃、山大黃及土大黃的臨床應用.光明中醫，2008，23(9)：1354-1355.

［3］ 王桂榮.大黃、山大黃、土大黃的基源、成分、藥理與臨床應用概述.邯鄲醫學高等專科學校學報，2003，16(1)：89-91.

［4］ 王錦紅 洪宇農.土大黃含量測定方法研究.中國藥業，2004，13(2)：335-336.

［5］ 魏玉輝，武新安，陳嵐.大黃蒽醌類成分含量測定方法實驗研究.蘭州大學學報，2005，31(1)：13-15.

［6］ 劉翠哲，王汝興，劉喜綱.測定大黃總蒽醌含量的分光光度法改進.天津中醫藥，2004，21(4)：335-336.

［7］ 王世清，麻秀萍，萬明香，等.貴州土大黃的品種鑒定與含量測定.中藥材，2004，27(10)：725-727.