Ｓｕｒｖｉｖｉｎ在人腦星形細(xì)胞瘤的表達(dá)及意義

[摘要] 目的 探討Survivin在人腦星形細(xì)胞瘤的表達(dá)及與星形細(xì)胞瘤發(fā)生發(fā)展之間的關(guān)系。方法 采用免疫組織化學(xué)Elivision二步法檢測(cè)53例腦星形細(xì)胞瘤組織和10例正常腦組織標(biāo)本中Survivin的表達(dá)水平。結(jié)果 Survivin在正常腦組織無(wú)表達(dá)；在腦星形細(xì)胞瘤組織中Survivin的表達(dá)陽(yáng)性率為64.1%，且隨星形細(xì)胞瘤病理級(jí)別的增高而表達(dá)增強(qiáng)（P＜0.05）。結(jié)論 Survivin的高表達(dá)與腦星形細(xì)胞瘤的惡性進(jìn)展有關(guān)。

[關(guān)鍵詞] Survivin； 腦星形細(xì)胞瘤； 免疫組化

[中圖分類號(hào)] R730.264 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1673-9701（2009）13-104-02

Expression and Significance of Survivin in the Human Astrocytomas

WANG Xinping1 MEI Jinhong2

1.Department of Pathology，the Medical College of Jiujiang University，Jiangxi 332000；2.Department of Pathology，the First Affiliated Hospital of Nanchang University，Nanchang 330006

[Abstract] ObjectiveTo explore the expression level of Survivin in the human astrocytomas and its relationship between tumorigenesis and progression of the human astrocytomas. MethodsThe expression level of Survivin protein was investigated by immunohistochemistry Enivision method in 53 cases of the human astrocytomas and 10 cases of normal brain tissues. Results34 of 53（64.1%） astrocytic tumors expressed survivin. The distributions included 7 of 18（38.9%） diffuse astrocytomas，14 of 19（74.7%） anaplastic astrocytomas，and 13 of 16（81.3%）glioblastomas，and the positive rate was increased associated with tumor grade getting higher. Survivin was not found expression in the normal brain tissue. ConclusionThe strong relationship between m alignant grade and survivin expression indicates that expression of survivin may relate to tumor m alignant progression of astrocytic tumors．

[Key Words]Survivin protein； Brain astrocytoma； Immunohistochemistry

Survivin是新發(fā)現(xiàn)的一種凋亡抑制蛋白，具有強(qiáng)大的抗細(xì)胞凋亡以及促進(jìn)有絲分裂的作用，并與人類多種腫瘤的形成密切相關(guān)[1]。本文采用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)Survivin蛋白在人腦星形細(xì)胞瘤的表達(dá)，并分析其臨床意義，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 組織標(biāo)本

53例星形細(xì)胞瘤標(biāo)本來(lái)自南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院病理科2004～2007年存檔的蠟塊，其中男性33例，女性20例；年齡18～72歲；按WHO 2000年分類標(biāo)準(zhǔn)，包括彌漫性星形細(xì)胞瘤18例，間變形星形細(xì)胞瘤19例，膠質(zhì)母細(xì)胞瘤16例； 10例正常腦組織取自九江學(xué)院病理教研室尸體解剖標(biāo)本。

1.2 免疫組化

4mm石蠟切片常規(guī)脫蠟至水，行微波抗原修復(fù)，以下按Elivision試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行操作。兔抗人Survivin多克隆抗體（試劑均購(gòu)于中杉生物技術(shù)有限公司），DAB顯色，蘇木素復(fù)染。胃癌陽(yáng)性對(duì)照標(biāo)本由南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院病理科提供，用PBS代替一抗作陰性對(duì)照。

1.3 結(jié)果判定

Survivin蛋白免疫組化陽(yáng)性為胞漿和或核呈棕黃色染色。在400倍顯微鏡下觀察，每例切片隨機(jī)計(jì)數(shù)5個(gè)視野，計(jì)算陽(yáng)性細(xì)胞的百分比。Survivin蛋白表達(dá)半定量分析法根據(jù)文獻(xiàn)[2]免疫反應(yīng)評(píng)分（Immunoreactivity score ，IRS）進(jìn)行評(píng)定，IRS由陽(yáng)性細(xì)胞百分?jǐn)?shù)（Percent of positive cells，PP）計(jì)分與染色強(qiáng)度（Staining intensity，SI）計(jì)分相加所得。PP計(jì)分如下：0分：＜5%，1分：5%～25%，2分：26%～50%，3分：51%～75%，4分：＞75%。SI計(jì)分如下：1分：弱染色，2分：中等染色，3分，強(qiáng)染色；SI計(jì)分以多數(shù)細(xì)胞為標(biāo)準(zhǔn)；≤2分為陰性，＞2分為陽(yáng)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS12.0統(tǒng)計(jì)軟件分析，率的比較用x²檢驗(yàn)，IRS采用（χ±s）表示，組間均數(shù)比較采用t檢驗(yàn)，方差分析，q檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 Survivin在星形細(xì)胞瘤和正常腦組織中的表達(dá)和意義

Survivin蛋白免疫組化陽(yáng)性為胞漿和（或）核呈棕黃色染色，主要為胞漿著色。Survivin在星形細(xì)胞瘤及正常腦組織之間表達(dá)陽(yáng)性率及IRS均有極顯著性差異（x² = 11.474，P＜0.01；t = 6.041， P＜0.01），見(jiàn)圖1，表1。

2.2 Survivin表達(dá)陽(yáng)性率與腦星形細(xì)胞瘤惡性程度的關(guān)系

星形細(xì)胞瘤不同病理類型間Survivin表達(dá)陽(yáng)性率差異顯著（P＜0.05），其中彌漫性星形細(xì)胞瘤與間變性星形細(xì)胞瘤（P＜0.01）及膠質(zhì)母細(xì)胞瘤間差異極顯著（P＜0.01）。

2.3 Survivin IRS與腦星形細(xì)胞瘤惡性程度的關(guān)系

星形細(xì)胞瘤不同病理類型間Survivin IRS差異顯著（P＜0.05），其中彌漫性星形細(xì)胞瘤與間變性星形細(xì)胞瘤（P＜0.05）及膠質(zhì)母細(xì)胞瘤間差異顯著（P＜0.05）。

3 討論

腦星形細(xì)胞瘤的發(fā)生是多因素參與形成的，其中腫瘤細(xì)胞的增殖與凋亡失衡是星形細(xì)胞瘤形成和發(fā)展的一個(gè)重要機(jī)制。Survivin是近年來(lái)新發(fā)現(xiàn)的一種凋亡抑制蛋白，在細(xì)胞周期中具有在G2/M期特異性表達(dá)的特點(diǎn)，Survivin的高表達(dá)能夠抑制多種因素如P53、Fas、caspase等誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡[3]。Survivin除了強(qiáng)大的抗細(xì)胞凋亡功能外，還具有調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖的功能，它與細(xì)胞的有絲分裂、卵裂溝形成及胞漿移動(dòng)等有關(guān)。

Survivin在胚胎、胎兒發(fā)育期表達(dá)，除子宮內(nèi)膜、胎盤和胸腺組織中發(fā)現(xiàn)存在不同程度的Survivin基因表達(dá)外[4]，在正常分化末期的成人組織中不表達(dá)，而在人類多數(shù)腫瘤組織中廣泛表達(dá)，如大多數(shù)神經(jīng)上皮性腫瘤[5]、食道鱗癌[6]等中都能檢測(cè)到Survivin蛋白的表達(dá)，并且與腫瘤的惡性程度相關(guān)。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，Survivin蛋白在正常腦組織中無(wú)表達(dá)，而在星形細(xì)胞瘤組織中高表達(dá)；且彌漫性星形細(xì)胞瘤、間變性星形細(xì)胞瘤、膠質(zhì)母細(xì)胞瘤三組比較陽(yáng)性表達(dá)率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）。Survivin表達(dá)陽(yáng)性率隨星形細(xì)胞瘤病理級(jí)別增高而明顯增高，提示Survivin高表達(dá)與腦星形細(xì)胞瘤的形成及惡性演進(jìn)均有密切關(guān)系。本組Survivin蛋白在瘤細(xì)胞的細(xì)胞漿和細(xì)胞核均有表達(dá)。過(guò)去的研究認(rèn)為Survivin僅是胞漿蛋白，但現(xiàn)已證實(shí)Survivin有5種剪接異構(gòu)體，分別存在細(xì)胞漿和細(xì)胞核中，這與Survivin既抑制細(xì)胞凋亡、又調(diào)節(jié)細(xì)胞分裂的多重功能相一致[7]。

最新的研究認(rèn)為，Survivin的細(xì)胞核表達(dá)是判斷腫瘤預(yù)后的重要指標(biāo)之一。Grabowski等[6]研究顯示食道鱗癌Survivin的細(xì)胞核陽(yáng)性患者比陰性患者的平均生存時(shí)間短，Survivin的細(xì)胞漿表達(dá)對(duì)患者的預(yù)后無(wú)影響，但是Survivin在星形細(xì)胞瘤中細(xì)胞漿或細(xì)胞核陽(yáng)性表達(dá)對(duì)患者預(yù)后的影響有待進(jìn)一步研究。

[參考文獻(xiàn)]

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（收稿日期：2009-01-08）