熱毒寧注射液與６種輸液配伍時的綠原酸穩定性考察

摘要 目的：考察熱毒寧注射液中綠原酸在6種常用輸液中的穩定性，為臨床用藥提供依據。方法：采用高效液相色譜法測定熱毒寧注射液中綠原酸在6種常用輸液中12 h內的含量變化，觀察溶液顏色，測定pH變化。結果：熱毒寧注射液加入6種輸液后放置12 h，顏色無明顯變化，未見沉淀生成，pH改變不大，綠原酸含量變化不顯著。結論：熱毒寧注射液在6種常用輸液中12 h內穩定性良好。

關鍵詞 熱毒寧注射液 綠原酸 穩定性 HPLC

中圖分類號：R942 文獻標識碼：B 文章編號：1006—1533(2009)08-0373-03

熱毒寧注射液是中成藥注射劑復方劑型，由青蒿、金銀花、梔子組成，不含動物藥和礦物藥，具有清熱解毒、疏風解表的作用，臨床用于上呼吸道感染(外感風熱證)所致的高熱、微惡風寒、頭痛、咳嗽、痰黃等證。目前，熱毒寧注射液廣泛應用于臨床，以5％葡萄糖注射液、10％葡萄糖注射液和0.9％氯化鈉注射液等常用輸液稀釋后靜脈滴注給藥。但筆者未見有關該液與各種輸液配伍的穩定性研究的報道。筆者以配伍后混合溶液外觀、pH值及注射液中的主要成分綠原酸為指標，考察了熱毒寧注射液與5％葡萄糖注射液、10％葡萄糖注射液、0.9％氯化鈉注射液、復方氯化鈉注射液、木糖醇注射液和縮合葡萄糖氯化鈉注射液這6種常用輸液中放置12 h后的配伍穩定性。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

美國Agilent HP1100系列高效液相色譜儀(Aglient G1310A單元泵，Aglient G1316A柱溫箱，Aglient G1314A可變波長檢測器，威馬龍工作站)；隔膜真空泵(天津市騰達過濾器件廠)；10萬分之一電子天平(Ohaus)；PHS－25數顯pH計(上海精科雷磁儀器廠)；SD：3200超聲波清洗器(上海必能信超聲有限公司)。

1.2 藥品與試劑

綠原酸對照品(廣西醫科大學精制，批號：20071210)，純度98.7％；熱毒寧注射液(江蘇康緣藥業股份有限公司，規格：10 mL／支，批號：080601)；5％葡萄糖注射液(武漢濱湖雙鶴藥業有限公司，批號：080807—104)，10％葡萄糖注射液(武漢濱湖雙鶴藥業有限公司，批號：080806—101)，0.9％氯化鈉注射液(武漢濱湖雙鶴藥業有限公司，批號：080803103)，復方氯化鈉注射液(武漢濱湖雙鶴藥業有限公司，批號：080528102)；木糖醇注射液(安徽環球藥業股份有限公司，批號：A080107—9)；縮合葡萄糖氯化鈉注射液(重慶大新藥業股份有限公司，批號：08010004—1)；乙腈(色譜純，國藥集團化學試劑有限公司，批號：T20070718)；甲醇、冰醋酸均為色譜純；水為重蒸水。

2 方法與結果

2.1 色譜條件

色譜柱SinoChrom ODS—AP(4.6 mm×250mm，5岬)，流動相：乙腈－水－冰醋酸(13：87：0.2)；流速：0.8mL／min；檢測波長：327mm；柱溫30℃；進樣量20uL。

2.2 溶液配制

2.2.1 對照品溶液的配制

精密稱取綠原酸對照品25.0 mg，置于50 mL容量瓶中，用50％甲醇溶解并稀釋至刻度，制成0.5mg／mL的對照品溶液。

2.2.2 供試品溶液的配制

按熱毒寧注射液說明書的配制要求，將熱毒寧注射液10 mL分別加入到5％葡萄糖注射液(A)、10％葡萄糖注射液(B)、0.9％氯化鈉注射液(c)、復方氯化鈉注射液(D)、木糖醇注射液(E)和縮合葡萄糖氯化鈉注射液(F)250 mL中配成樣品溶液，搖勻。精密吸取各樣品溶液1mL，置10mL容量瓶中，用流動相稀釋定容，即得。

2.2.3 陰性對照液的配制

按處方比例和配方，制得不含金銀花的陰性對照樣品。按2.2.2項下方法制成陰性對照液。

2.2.4 專屬性實驗

分別取綠原酸對照品溶液、各樣品制成的供試品溶液和陰性對照液進樣20uL測定色譜圖。結果表明：陰性對照液中其它成分對樣品的測定無干擾。

2.3 線性關系考察

分別精密吸取對照品溶液適量，分別加流動相稀釋至綠原酸10.0，20.0，40.0，60.0，80.0，100.ug／mL系列濃度，分別進樣20汕進行測定，記錄峰面積(A)，并以濃度(c，ug/mL)對吸收峰面積(A)作標準曲線，得線性方程為：A=6 521C-9.660 2(r=0.999 5)。結果表明，綠原酸在濃度范圍10～100ug/mL內線性良好。

2.4 精密度試驗

精密吸取綠原酸對照品溶液20uL，重復進樣6次，測定綠原酸峰面積，計算綠原酸峰面積平均值為4 108 924，RSD為0.3％(n=6)。結果表明，儀器精密度良好。

2.5 重復性實驗

將熱毒寧注射液在5％葡萄糖注射液中的樣品按照2.2.2項下供試品的配制方法，分別配制6份，測定綠原酸含量基本相同，RSD為0.2％，結果表明，本法重復性好。

2.6 加樣回收率試驗

精密取相同熱毒寧注射液1 mL共6份，分別精密加入綠原酸對照品適量，按照2.2.2項下樣品溶液的制備方法制得低、中、高這3種不同濃度的供試液，并按上述色譜條件測定峰面積并計算回收率。結果見表1，平均回收率為101.2％。RSD為1.3％(n=6)。

2.7 配伍穩定性考察

2.7.1 綠原酸的測定

按熱毒寧注射液說明書的配制要求，將熱毒寧注射液10 mL分別加入到5％葡萄糖注射液(A)、10％葡萄糖注射液(B)、0.9％氯化鈉注射液(c)、復方氯化鈉注射液(D)、木糖醇注射液(E)和縮合葡萄糖氯化鈉注射液(F)各250mL中配成樣品溶液，搖勻。于0、1、2、4、8、12 h精密吸取各樣品液1 mL，用流動相稀釋定容至10 mL，進樣20uL，測定峰面積，計算綠原酸含量，結果見表2。

2.7.2 配伍溶液的制備與穩定性考察

按熱毒寧注射液說明書的配制要求，將熱毒寧注射液適量，分置于6個量瓶中，分別以5％葡萄糖注射液、10％葡萄糖注射液、0.9％氯化鈉注射液、復方氯化鈉注射液、木糖醇注射液和縮合葡萄糖氯化鈉注射液稀釋制成4％(mL／mL)的溶液，混勻，室溫放置，于0、1、2、4、8、12 h作外觀、pH值檢查。

熱毒寧注射液與6種輸液配伍后，經室溫放置，各配伍液未見明顯變化，未出現沉淀、氣泡等，pH值測定結果見表3。

3 討論

熱毒寧注射液與各輸液配伍、室溫放置，各配伍液綠原酸含量變化不顯著，說明在上述實驗條件下熱毒寧注射液與6種常用輸液配伍12 h內穩定性較好。

3.1 檢測波長的選擇

本品中含有綠原酸和桅子苷兩個成分，《中華人民共和國藥典》2005年版一部收載了單個組分的測定條件。紫外掃描結果表明，綠原酸在327mm波長處有較強的紫外吸收，故選定327 mm作為綠原酸的檢測波長。

3.2 流動相的選擇

金銀花是熱毒寧注射液的主要成分之一，綠原酸是金銀花的主要有效成分，它的含量主要是以綠原酸的含量來計算的。筆者通過對綠原酸的含量測定，考察其配伍后含量有無降低來衡量熱毒寧注射液加入到6種常用輸液中的穩定性。

由于熱毒寧注射液中綠原酸與梔子苷的性質有些相似，當流動相極性較大時，色譜峰疊加無法將兩種物質分離開，造成測得的綠原酸含量比實際含量偏高，所以降低流動相的極性。但極性太低時，保留時間明顯移后。實驗中比較篩選了多種不同比例流動相體系，最后選定乙腈一水一冰醋酸(13：87：0.2)為流動相，流速為0.8 mL／min時。綠原酸的分離效果最好，保留時間適中。

參考文獻

1 董曉莉，熱毒寧注射液致過敏反應0例[J]，中國誤診學雜志，2009，19(7)：1528

2 國家藥典委員會，中華人民共和國藥典[M]，北京：化學工業出版社，2005：152—153