維吾爾藥羅勒對環氧化酶的影響

江國華　依巴代提　阿布力孜　盛　磊

（1.新疆醫科大學 藥理教研室；2.新疆醫科大學 科研中心，新疆 烏魯木齊 830054）お

摘 要：目的：探討維吾爾藥羅勒醇提物在體外對環氧化酶的影響，從而研究羅勒抗血栓的作用機制。方法：測定人臍靜脈內皮細胞6-keto-PGF1α、小鼠腹腔巨噬細胞PGE2 的含量。結果：羅勒對環氧化酶-1（COX-1）和環氧化酶-2（COX-2）都有不同程度的抑制作用。在劑量相同時，羅勒醇提物對COX-2的抑制率大于COX-1。結論：本實驗從底物的角度證實了羅勒醇提物對COX-1 和COX-2 的作用,抗血栓部分機理可能是由于抑制環氧化酶而介導的。

關鍵詞：羅勒；環氧化酶-1；環氧化酶-2；抗血栓

中圖分類號：R973文獻標識碼：A文章編號：1673-2197（2009）01-0037-01オ

羅勒是維吾爾醫應用歷史悠久的常用藥材之一,是唇形科羅勒屬植物Ocimum basilicum L^[1，2]。主要成分：全草，羅勒的化學成分主要為揮發油、黃酮、香豆素、甾體化合物等,其中揮發油的含量最大^[3]。本研究是通過羅勒在體外對環氧化酶（COX-1和COX-2）活性的影響來探討羅勒抗血栓的作用機制，給臨床選藥組方提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 儀器與材料

CO₂培養箱,全自動酶標儀,生物顯微鏡,超凈操作臺。

羅勒，阿司匹林，吲哚美辛；脂多糖(LPS)、花生四烯酸(AA);DMEM干粉；RPMI1640；小牛血清（四季青）；MTT、胰蛋白酶；6-keto-PGF1α和PGE2ELISA試劑盒。

1.2 方法

1.2.1 在體外對COX-1的影響

按文獻方法制備內皮細胞COX-2模型^[4]。將培養至第4代的內皮細胞接種于24孔培養板中生長融合，再加入羅勒提取液,使其終濃度分別為0.1mg/mL、1mg/mL、10mg/mL,或非選擇性環氧化酶抑制劑陽性對照阿司匹林(終濃度10-6mol/L)、COX-2抑制劑陽性對照吲哚美辛(終濃度10-7mol/L)或陰性對照溶媒。37℃、5%CO₂培養箱培養24h,取出每孔加入底物花生四烯酸,使其終濃度為10μmol/L,37℃繼續培養20min。收集上清液,-20℃凍存待測^[5]，用ELISA法測定樣品中6-keto-PGF1α。

1.2.2 在體外對COX-2的影響

按文獻方法制備巨噬細胞COX-2模型^[6]，將細胞接種于24孔板中生長融合，再加入一定濃度的羅勒提取液,終濃度分別為0.1mg/mL、1mg/mL、10mg/mL，或陽性對照品阿司匹林(終濃度10-6mol/L)、吲哚美辛(終濃度10-7mol/L)或溶媒。37℃、5%CO₂培養箱培養24h,取出,每孔加入底物花生四烯酸(終濃度10μmol/L),37℃繼續培養20min。收集上清液,-20℃凍存待測。用ELISA法測定樣品中的PGE2。

1.2.3 統計學處理

數據用SPSS統計軟件處理,所有結果用±s表示,采用獨立樣本t檢驗和方差分析。

2 結果

羅勒在體外對環氧化酶的影響，羅勒對環氧化酶-1（COX-1）和環氧化酶-2（COX-2）都有不同程度的抑制作用，另外,隨著劑量的增加抑制率也增大,存在一定的量效關系。結果見表1。

注：與DMSO比較:*P < 0.05，**P<0.01。

3 討論

環氧化酶(COX) 是花生四烯酸合成前列腺素過程中一個重要的限速酶,其催化的產物前列腺素H2是各種前列腺素的共同中間體,在各組織和器官中前列腺素H2 被不同的前列腺素合成酶作用生成各種前列腺素,以自分泌或旁分泌方式和靶細胞的前列腺素受體結合發揮各種各樣的生理功能^{[7］ 。隨著COX-2 的發現,現在普遍認為COX-1負責維持身體的正常機能,而COX-2 則是一種誘導酶,參與炎癥反應,抑制COX-2 可以發揮抗血栓作用[8] 。本實驗表明,羅勒在3 個劑量都對COX-2 有抑制作用,并隨劑量的增加而作用增強,抑制環氧化酶可能是其抗血栓的作用機制之一。}

參考文獻：

［1］ 茹克婭木.維吾爾醫常用藥材學(上)(維吾爾文)［M］.烏魯木齊:新疆人民衛生出版社,1993：426-429.

［2］ 新疆維吾爾自治區衛生廳.維吾爾藥材標準［S］.烏魯木齊：新疆科技衛生出版社，1993：183-187.

［3］ 汪濤，崔書亞，胡曉黎.羅勒揮發油成分的研究［J］.中國中藥雜志，2003,28(8):740-742.

［4］ 侯琦,胡玉芳,郭穎,等.非普拉宗對環氧酶活性的影響［J］.藥學學報,2000,35(7):481.

［5］ 龍啟才,邱建波.雷公藤、防己醇提取物對淋巴細胞和環氧化酶的影響［J］.中藥材,2004,27(11):851.

［6］ 胡玉芳,程桂芳.環氧酶選擇性抑制劑篩選模型的建立［J］.藥學學報,2000,35(5):343.

［7］ Funk C D. Prostaglandins and leukotrienes： advances in eicosanoidbiology［J］. Science， 2001， 294 (5548)： 1871.

［8］ Marx J . Anti-inflammatories inhibit cancer growth but how［J］. Science，2001， 291 (5504)： 581.

（責任編輯：姜付平）