ＨＰＬＣ法測定二色補血草中沒食子酸的含量

2009-04-29 00:44:03宋小妹孟會寧苗彥霞王小平

亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥 2009年1期

宋小妹　孟會寧　苗彥霞　王小平

（陜西中醫(yī)學院，陜西咸陽 712046）お

摘要：目的：建立二色補血草中沒食子酸的含量測定方法。方法：用HPLC法測定，流動相為甲醇-0.1％磷酸（5∶95）；檢測波長273nm。結果：沒食子酸在125.1ng～750.6ng之間呈良好線性關系。平均回收率（n=6）為99.86%，RSD=0.66%。結論：該方法穩(wěn)定可靠，重現(xiàn)性好，可用于二色補血草中沒食子酸的含量測定。

關鍵詞：HPLC法；二色補血草；沒食子酸

中圖分類號：R284.2文獻標識碼：A文章編號：1673-2197（2009）01-0033-02

二色補血草又名燎眉蒿、掃帚草、匙葉草、血見愁、禿子花、蒼蠅花、白花菜棵，為白花丹科（Plumbaginaceae）補血草屬植物二色補血草［Limonium bicolor （Bunge） Kuntze］帶根全草。性平，味甘苦。具有補血、止血、散瘀、調經(jīng)、益脾、健胃等功效；主治崩漏、尿血、月經(jīng)不調等。二色補血草的化學成分十分復雜，含有氨基酸、無機元素、維生素、黃酮類、鞣質、多糖、生物堿、有機酸等多種成分^[1，2]，其中沒食子酸具有顯著的消炎作用，能抑制金黃色葡萄球菌、大腸桿菌和綠膿桿菌的生長^[3，4]。本實驗采用HPLC法測定了二色補血草中沒食子酸的含量，結果表明，該方法簡便快速，穩(wěn)定可靠。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

LC-2010A型高效液相色譜儀（島津有限公司），Hypersil ODS（25um，4.6 mm×250 mm）色譜柱，電子天平（薩多利斯GB204，瑞典）。

1.2 試藥

二色補血草，購自陜西眉縣，經(jīng)陜西中醫(yī)學院生藥教研室王繼濤教授鑒定為白花丹科二色補血草［Limonium bicolor （Bunge） Kuntze］的全草。沒食子酸對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號：100831-200302）。甲醇為色譜純；其它試劑均為分析純；水為重蒸餾水。

2 方法與結果^[5，6]

2.1 色譜條件

色譜柱：Hypersil ODS（250nm×4.6nm，5μm）；流動相：甲醇-0.1％磷酸（5：95）；檢測波長：273nm；流速：1mL/min；柱溫：室溫。

2.2 對照品溶液的制備

精密稱取沒食子對照品6.255mg，置于50mL量瓶中，加50%甲醇溶解至刻度，搖勻，即得（每1mL含沒食子酸0.1251mg）。

2.3 供試品溶液的制備

取二色補血草2.5g，精密稱定，加50％甲醇適量，加熱回流提取2h，過濾，濾液蒸干，殘渣用50%甲醇溶解置25mL量瓶中，50%甲醇定容至刻度，搖勻，用微孔濾膜（0.45μm）濾過，即得。

2.4 標準曲線的繪制

精密吸取對照品溶液1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL與6.0mL，分別置于10mL量瓶中，加50%甲醇至刻度，搖勻。微孔濾膜（0.45μm）濾過，取續(xù)濾液，照高效液相色譜法（《中國藥典》2005版一部，附錄Ⅵ D）測定，以進樣量為橫坐標，峰面積為縱坐標，繪制標準曲線，得回歸方程：Y=2959.5X-11264，r=0.9999。結果表明，沒食子酸在125.1ng～750.6ng之間呈良好線性關系。