柴胡對(duì)小鼠免疫系統(tǒng)影響的研究進(jìn)展

張 彤 趙喜紅

摘要: 近年來(lái)的研究表明,柴胡可使小鼠淋巴細(xì)胞增殖,促進(jìn)IL-2與TNF的分泌,增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的吞噬能力,提高紅細(xì)胞免疫粘附功能,具有顯著的抗炎作用和抗過(guò)敏作用。綜述了柴胡對(duì)免疫系統(tǒng)的影響,為進(jìn)一步開展柴胡對(duì)免疫系統(tǒng)作用的研究提供理論依據(jù)。

關(guān)鍵詞:柴胡;小鼠免疫系統(tǒng);影響

中圖分類號(hào):Q41文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A文章編號(hào): 1007-5739(2009)20-0319-02

柴胡是一種具有疏肝化郁和升陽(yáng)作用的中草藥,全世界有柴胡屬植物 200 種,我國(guó)已報(bào)道的有42 種,17 變種及7變形,主要包括北柴胡和南柴胡。北柴胡又稱硬柴胡,是傘形科植物北柴胡(Bupleurum chinese DC);南柴胡又叫軟柴胡,是傘形科植物狹葉柴胡(Bupleurum Scorzonerifolium Willd),臨床應(yīng)用以北柴胡為主[1]。北柴胡主產(chǎn)于遼寧、甘肅、河北、河南、山東等地,南柴胡主產(chǎn)于湖北、四川、江蘇、安徽等地。柴胡屬植物中的絕大多數(shù)種類,在產(chǎn)地均作為柴胡藥用。柴胡的使用,在北方主要為根,在西南地區(qū)為全草,而華東和華南地區(qū)則根和地上部分分別使用。柴胡的化學(xué)成分相當(dāng)復(fù)雜,迄今為止已報(bào)道含有苷、黃酮、揮發(fā)油、甾醇、香豆素、有機(jī)酸、糖類、木脂素、生物堿及多炔類成分等[2]。柴胡加工炮制方法有醋柴胡、鱉血柴胡、酒柴胡、蜜炙柴胡,現(xiàn)代有柴胡注射液、柴胡灌腸劑、柴胡片、柴胡滴丸、柴胡口服液劑型[3]。大量研究表明,柴胡具有鎮(zhèn)靜、止痛、降溫、鎮(zhèn)咳、抗炎、抗菌、保肝利膽、降血壓、抗病毒、抗腫瘤等生理活性[4],其中柴胡對(duì)免疫系統(tǒng)的作用研究一直是人們關(guān)注的焦點(diǎn)。該文綜述了胡對(duì)小鼠免疫系統(tǒng)的影響,為柴胡的進(jìn)一步開發(fā)及新藥的研制提供理論依據(jù)。

1對(duì)特異性免疫的影響

體液免疫和細(xì)胞免疫是機(jī)體特異性免疫的重要組成部分。研究顯示柴胡對(duì)機(jī)體體液免疫和細(xì)胞免疫均有增強(qiáng)作用,具體包括增殖淋巴細(xì)胞,提高IL-2、TNF-α和TNF-β的分泌水平等。劉曉斌等[5]用北柴胡的不同提取組分(乙醇提取、Ba(OH)2提取和水提取),對(duì)小鼠脾淋巴細(xì)胞體外增殖和分泌IL-2與TNF-β的作用進(jìn)行了研究,測(cè)定結(jié)果表明一定濃度的北柴胡水提取組分和500mL/L乙醇提取組分,對(duì)ConA誘導(dǎo)的小鼠脾細(xì)胞的增殖反應(yīng)、IL-2與TNF-β的分泌水平均有較明顯地增強(qiáng)作用;而北柴胡的Ba(OH)2提取組分只對(duì)ConA誘導(dǎo)的小鼠脾細(xì)胞分泌IL-2的水平具有增強(qiáng)作用。陳韶等[6]研究發(fā)現(xiàn)柴胡水溶部分及藥渣水煎劑對(duì)小鼠T、B淋巴細(xì)胞均有刺激增生作用,40%醇提物能促進(jìn)B淋巴細(xì)胞的增殖,正丁醇提取物則對(duì)T淋巴細(xì)胞增殖有增強(qiáng)效應(yīng);研究還發(fā)現(xiàn)藥渣水煎劑能刺激活化的T細(xì)胞分泌IL-2,該結(jié)果可能是柴胡促進(jìn)細(xì)胞免疫、抗腫瘤效應(yīng)的機(jī)理之一。楊錯(cuò)等[7]分別用溶血素測(cè)定法和2,4-二硝基氯苯誘導(dǎo)DTH反應(yīng)法測(cè)定柴胡乳劑對(duì)正常小鼠環(huán)磷酰胺免疫功能低下小鼠體液免疫、細(xì)胞免疫的影響,結(jié)果與正常對(duì)照組比,柴胡乳劑能明顯提高環(huán)磷酰胺免疫功能低下小鼠血清溶血素含量,抑制DTH反應(yīng)小鼠的耳腫脹度,證明柴胡乳劑可以增強(qiáng)正常小鼠及Cy所致免疫功能低下小鼠的特異性免疫功能。鞏濤等[8]研究發(fā)現(xiàn)柴胡有利于人類T細(xì)胞免疫功能的恢復(fù)。

南柴胡對(duì)特異性免疫也有增強(qiáng)作用。劉曉斌等[9]用小鼠脾細(xì)胞培養(yǎng),研究南柴胡的正丁醇與水提取物對(duì)經(jīng)Con A刺激后的T淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)、IL-2和TNF-α分泌水平的影響,結(jié)果發(fā)現(xiàn)南柴胡的水提取物對(duì)小鼠T淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)、IL-2和TNF-α分泌水平均有增強(qiáng)作用,而南柴胡的正丁醇提取物只對(duì)IL-2分泌水平有增強(qiáng)作用。馬春玲等[10]研究發(fā)現(xiàn)南柴胡提取組分對(duì)小鼠的脾淋巴細(xì)胞的轉(zhuǎn)化能力及IL-2誘生水平均有上調(diào)作用,且有量效相關(guān)性。柴胡提高特異性免疫的成分是柴胡多糖。柴胡多糖(bupleuran 2Ilc)通過(guò)誘導(dǎo)FIX的磷酸化,PLC和PKC的啟動(dòng),膜轉(zhuǎn)移,促進(jìn)各細(xì)胞周期調(diào)節(jié)蛋白及激酶的產(chǎn)生,從而誘導(dǎo)B細(xì)胞增殖和成熟[11],進(jìn)而增強(qiáng)IL-2的分泌量。

2對(duì)非特異性免疫的影響

單核巨噬細(xì)胞的吞噬能力是衡量機(jī)體非特異性免疫功能的標(biāo)志之一,測(cè)定血流中碳粒的消失速度可反映吞噬細(xì)胞吞噬異物的能力。柴胡能增加Kupfer細(xì)胞吞噬功能,增強(qiáng)巨噬細(xì)胞、NK細(xì)胞活性。碳粒廓清法測(cè)正常小鼠單核巨噬細(xì)胞吞噬功能結(jié)果表明,柴胡乳劑可提高正常小鼠碳粒廓清指數(shù)和校正廓清指數(shù)α,增強(qiáng)小鼠非特異性免疫功能[6]。與正常對(duì)照組相比,柴胡乳劑8g/kg劑量組可提高小鼠碳粒廓清指數(shù)κ(P<0.01),柴胡乳劑810g/kg、410g/kg、210g/kg組均可顯著提高小鼠校正廓清指數(shù)α(P<0.01),說(shuō)明柴胡乳劑可增強(qiáng)正常小鼠中性粒細(xì)胞吞噬能力。

柴胡增強(qiáng)非特異性免疫的有效成分是柴胡皂苷和柴胡多糖。皂苷能引起腹膜巨噬細(xì)胞顯著聚集,激活巨噬細(xì)胞吞噬。柴胡果膠多糖具有使巨噬細(xì)胞的FoR增加,促進(jìn)清除IC的活性。

3抗炎作用

柴胡具有顯著的抗炎作用,其抗炎的有效成分為柴胡皂苷。其中以柴胡皂苷d(SSd)的抗炎作用最強(qiáng),它對(duì)多種炎癥過(guò)程包括炎性滲出、毛細(xì)血管通透性升高、炎癥介質(zhì)釋放、白細(xì)胞游走、結(jié)締組織增生和多種變態(tài)反應(yīng)炎癥均有顯著抑制作用[12]。何麗媛等[13]分別采用小鼠二甲苯耳腫脹模型、大鼠蛋清性足腫脹模型及小鼠角叉菜膠足腫脹模型,研究柴胡靜脈乳劑對(duì)炎癥的影響,結(jié)果柴胡靜脈乳劑能顯著抑制小鼠二甲苯性耳腫脹、大鼠蛋清性足腫脹及小鼠角叉菜膠性足腫脹程度,說(shuō)明柴胡靜脈乳劑具有抑制炎癥反應(yīng)的作用。胡繼鷹等[14]以保康北柴胡水煎劑灌服小白鼠7d后,結(jié)果柴胡水煎劑對(duì)小白鼠耳廓腫脹、肉芽腫以及鎮(zhèn)痛有非常顯著的抑制作用(P<0.01)。說(shuō)明保康北柴胡藥效作用良好,其含有穩(wěn)定的藥物活性成份。Navarro等[15]從圓葉柴胡(Bupleurum rotundif-olium L.)中提取出柴胡皂苷單體1-7,其中柴胡皂苷單體l,2,3,4和6可以有效抑制對(duì)酞酸(TPA)引起的急性鼠耳水腫,其抑制率分別是65%,82%,76%,84%和67%,單體皂苷3和6還可以抑制TPA引起的皮膚慢性炎癥。柴胡皂苷對(duì)小鼠二甲苯所引起的耳殼炎癥也有一定程度的抑制作用[16]。

柴胡皂苷抗炎作用的原理眾說(shuō)不一。杜景紅等[17]認(rèn)為SS抗炎的藥理作用在于它的皂苷元部分,皂苷元基本母核中環(huán)氧齊墩果烯骨架及4位碳原子上的側(cè)鏈-CH2OH在SS抗炎功效上起著重要作用,柴胡中的主要活性成分柴胡皂苷d在腸道被代謝為柴胡皂苷元D而被吸收。鳥庭靖文[18]認(rèn)為柴胡皂苷元D的藥效非常重要,對(duì)于介導(dǎo)鈣離子載體生成的PGE2,柴胡皂苷元D呈濃度依賴性抑制作用。并且該作用不是影響環(huán)氧化酶活性和花生四烯酸游離,而是通過(guò)細(xì)胞色素P450環(huán)氧化酶(CYP2J3)作用,促進(jìn)花生四烯酸生成環(huán)氧化物類,并且以RT-PCR法分析確認(rèn)了C6細(xì)胞CYP2J3 mRNA的表達(dá);進(jìn)一步探討柴胡皂苷元D對(duì)CYP2J3的花生四烯酸代謝系的影響,結(jié)果柴胡皂苷元D抑制花生四烯酸生成的作用可被環(huán)氧化酶抑制藥SKF525A消除,并且環(huán)氧化酶代謝物具有與柴胡皂苷元D同等程度的PGE2抑制作用,由此表明,柴胡皂苷元D促進(jìn)環(huán)氧化酶代謝物生成,其代謝物可抑制PGE2生成。

4抗過(guò)敏作用

肥大細(xì)胞是速發(fā)型過(guò)敏反應(yīng)的主要效應(yīng)細(xì)胞,許多帶正電荷的化合物可誘導(dǎo)其脫顆粒[19]。compound48/80通過(guò)作用于胞膜上相應(yīng)的受體,改變肥大細(xì)胞膜的通透性或其他機(jī)制誘導(dǎo)組胺等過(guò)敏介質(zhì)的釋放[20,21],因此常用于研究肥大細(xì)胞介導(dǎo)的非特異性過(guò)敏反應(yīng)的機(jī)制或篩選抗過(guò)敏藥物。柴胡有明顯的抗過(guò)敏作用。夏玉鳳等[22]以compound48/80在體外誘導(dǎo)大鼠腹腔肥大細(xì)胞釋放組胺,研究狹葉柴胡的抗過(guò)敏活性,并通過(guò)活性追蹤分離,探討其有效部位及有效成分。結(jié)果狹葉柴胡醇提取物、乙酸乙酯部分、正丁醇及水部分均顯著減少組胺釋放,以乙酸乙酯部分的作用最強(qiáng)。狹葉柴胡揮發(fā)油對(duì)組胺釋放呈現(xiàn)一定的促進(jìn)作用。從狹葉柴胡的乙酸乙酯部分分離得到異鼠李素和槲皮素2種黃酮類化合物,均顯著抑制肥大細(xì)胞中組胺的釋放,表明黃酮為狹葉柴胡抗過(guò)敏作用的有效成分[22]。此外,正柴胡飲顆粒能對(duì)抗組胺引起離體豚鼠回腸收縮,還能對(duì)抗組胺引起的豚鼠皮膚紅暈[23]。

柴胡是一味傳統(tǒng)中藥,具有多種生理活性,中醫(yī)多配以不同中藥廣泛應(yīng)用于調(diào)理機(jī)體免疫功能及治療各種炎癥。近年來(lái)隨著分離、提取工藝的改進(jìn),柴胡被國(guó)內(nèi)外諸多藥業(yè)公司制成單味制劑,同樣獲得了滿意的治療效果。為滿足人們對(duì)柴胡不斷增長(zhǎng)的藥用及科研需求,對(duì)其進(jìn)行更精細(xì)的加工及提高其產(chǎn)量和品質(zhì)成為了中醫(yī)藥發(fā)展中急需解決的問(wèn)題。

5參考文獻(xiàn)

[1] 江蘇植物研究所.新華本草綱要[M].上海:上海科技技術(shù)出版社,1988.

[2] 劉永喜.叢培臣柴胡的化學(xué)成分及藥理作用研究概況[J].黑龍江醫(yī)藥,2006,3(19):216-218.

[3] 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典(一部)(2000版)[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2000.

[4] 史青,聶淑琴,黃璐琦.柴胡屬植物化學(xué)成分及藥理研究新進(jìn)展[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志,2002,5(24):55-58.

[5] 劉曉斌,高燕,劉永仙,等.北柴胡提取組分對(duì)小鼠淋巴細(xì)胞活性的影響[J].細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志,2002,18(6):600-601.

[6] 陳韶,陳鋒,張文仁,等.四種北柴胡提取物在小鼠體內(nèi)外的免疫效應(yīng)[J].溫州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),1997,2(2):4-7.

[7] 楊錯(cuò),邢立國(guó),劉玉蘭.柴胡乳劑對(duì)小鼠免疫功能的影響[J].沈陽(yáng)醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2006,23(3):169-171.

[8] 鞏濤,曹月敏,莊百溪,等.大柴胡加味對(duì)梗阻性黃疸T細(xì)胞亞群免疫調(diào)節(jié)觀察[J].河北醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),1999,1(8):21-23.

[9] 劉曉斌,劉永仙,符兆英,等.南柴胡提取物對(duì)小鼠脾細(xì)胞體外增殖和淋巴因子分泌水平的影響[J].中國(guó)中醫(yī)藥信息雜志,2001,8(7):38-39.

[10] 馬春玲,張西強(qiáng),王法權(quán),等.南柴胡對(duì)小鼠免疫功能影響的實(shí)驗(yàn)研究[J].臨沂醫(yī)學(xué)專科學(xué)校學(xué)報(bào),1999,1(5):11-13.

[11] 郭穎杰,王本祥,山田陽(yáng)城,等.柴胡多糖誘導(dǎo)B細(xì)胞成熟的機(jī)理研究中國(guó)藥理學(xué)會(huì)通訊,2001,18(4):15.

[12] 陰健,郭力弓.現(xiàn)代中藥研究與臨床應(yīng)用(第1版)[M].北京:學(xué)苑出版社,1993.

[13] 何麗媛,趙麗清,曲曉梅.柴胡靜脈乳劑抗炎作用的實(shí)驗(yàn)研究[J].實(shí)用藥物與臨床,2006,9(4):217-218.

[14] 胡繼鷹,潘克英,許湘,等.保康北柴胡抗炎、鎮(zhèn)痛作用的實(shí)驗(yàn)研究[J].中醫(yī)研究,2005,3(7):14-16.

[15] NAVARRO P,GINER R M,RETIE M C,et al.In vivo antiin-flammatory activity of saponins from Bupleurum rotundifolium[J].Life Sci,2001,68(10):1199-1206.

[16] 劉偉.柴胡不同炮制方法對(duì)其抗炎作用的影響[J].河南中醫(yī)藥學(xué)刊,1998,13(4):10-12.

[17] 杜景紅,左廷兵,李鳳蘭,等.柴胡屬植物研究進(jìn)展[J].東北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2003,34(3):352-359.

[18] 鳥庭靖文(日).柴胡皂苷元D的新抗炎機(jī)制[J].國(guó)際中醫(yī)中藥雜志,2006,28(3):170-171.

[19] LAGUNOFF D M,ARTIN T W,READ G. Agents that release histamine from mast cells[J].Annu Rev Pharmacol Toxicol,1983,23(1):331.

[20] SHIN T Y,PARK J H,KIM H M. Effect of Cryptotympana atrata extract on compound induced anaphylactic reactions[J].Ethnopharmacol, 1999,66(10):319.

[21] TASAKA K M,OKAMOTO M. Inteacellular calcium release induced by histamine releasers and its inhibition by some antiallergic drugs[J].Ann Allergy,1986,56(4):64.

[22] 夏玉鳳,戴岳,王強(qiáng).狹葉柴胡的抗過(guò)敏活性及其有效成分[J].中國(guó)野生植物資源,2003,12(6):50-52.

[23] 何美珊,孫小玉,蔡瑩.正柴胡飲顆粒的解熱及抗過(guò)敏作用[J].中草藥,2000,04(24):46-48.