復(fù)方甲磺酸帕珠沙星滴眼液的制備及質(zhì)量控制

詹　峰　李金偉　何西奎　譚　屹

【摘要】 目的 制備復(fù)方甲磺酸帕珠沙星滴眼液，并建立質(zhì)量控制方法。方法 以甲磺酸帕珠沙星、氯化鈉、地塞米松磷酸鈉、羥苯乙酯制備復(fù)方甲磺酸帕珠沙星滴眼液;采用高效液相色譜法測定其中甲磺酸帕珠沙星的含量。結(jié)果 甲磺酸帕珠沙星檢測濃度在20.0～80.0 μg/ml范圍內(nèi)線性關(guān)系良好（r=0.999 9），平均回收率為97.7％（RSD=1.96％，n=6）。結(jié)論 本方法簡便﹑準(zhǔn)確﹑重現(xiàn)性好，可用于甲磺酸帕珠沙星滴眼液的質(zhì)量控制。

【關(guān)鍵詞】甲磺酸帕珠沙星;滴眼液;制備;質(zhì)量控制

お

Preparation and quality control of compound pazufloxacin mesilate eye drops

ZHAN Feng,LI Jin-wei, HE Xi-kui,et al. Zhengzhou Hospital of Traditional Chinese Medicine，Zhengzhou City， Henan450007,China

【Abstract】 Objective To prepare compound pazufloxacin mesilate eye drops and a to establish a method of its qualit control. Methods Compound pazufloxacin mesilate eye drops were parepared with pazufloxacin mesilate , sodium chloride , dexamethasone sodium phosphate , and ethylparaben . The content of moxifloxacin h drochloride was d etermined by HPLC. Results A linear calibration curve for assay of Pazufloxacin mesilate was obtained in the range of 20.0~80.0 μg/ml(r=0.999 9) and the average recoveries were 97.7% (RSD=1.96% n=6). Conclusion Formation technique is simple and quality can be controled，thus deserving to be popularized.

【Key words】Pazufloxacin mesilate; Eye drops;Preparation;Quality control

甲磺酸帕珠沙星(pazufloxacin mesilate)是日本富山化學(xué)工業(yè)株式會(huì)社研究開發(fā)的新一代氟喹諾酮類抗菌藥,于2002年4月在日本首次上市^[1]。該藥在化學(xué)結(jié)構(gòu)上作了重要的改變，將 C10上傳統(tǒng)的C-N鍵改變成C-C鍵，臨床表現(xiàn)出很高的安全性,體內(nèi)外試驗(yàn)表明,甲磺酸帕珠沙星對(duì)革蘭陰性菌的活性同其他氟喹諾酮類藥物相當(dāng),而對(duì)革蘭陽性菌的活行明顯增強(qiáng),尤其是對(duì)厭氧菌有較強(qiáng)的抗菌活性,且抗生素后效應(yīng)時(shí)間長^[2-3]。現(xiàn)開發(fā)有甲磺酸帕珠沙星注射液和粒劑，尚未見其他劑型。為拓寬其使用范圍,筆者研制復(fù)方甲磺酸帕珠沙星滴眼液，并建立質(zhì)量控制方法。

1 材料與方法

1.1 儀器 島津LC-10AD型高效液相色譜儀，SPD-10A型紫外檢測器，SCL-10A型控制器，C-RTA型色譜數(shù)據(jù)處理機(jī)。

1.2 試藥 甲磺酸帕珠沙星原料（浙江司太立制藥有限公司，批號(hào)：20061106），甲磺酸帕珠沙星對(duì)照品（含量99.9%，江蘇亞邦醫(yī)藥有限公司提供）。地塞米松磷酸鈉(天津藥業(yè)有限公司，批號(hào)：011006)。氯化鈉(江蘇南通勤奮制藥廠，批號(hào)：20030312)。 羥苯乙酯(廣州氣體廠有限公司，批號(hào)：20031001)。乙腈為色譜純，其余均為分析純。

1.3 處方 甲磺酸帕珠沙星3.0 g氯化鈉8.5 g地塞米松磷酸鈉0.15 g羥苯乙酯0.3 g注射用水加到1000 ml。

1.4 制備 取羥苯乙酯溶解于適量熱注射用水中，依次加入氯化鈉、地塞米松磷酸鈉攪拌使溶解。添加適量注射用水，再加入甲磺酸帕珠沙星，攪拌使溶解。過濾，自濾器添加注射用水到1000 ml,混勻，100℃流通蒸汽滅菌30 min，放冷至室溫，無菌分裝即可。

1.5 質(zhì)量控制

1.5.1 性狀 本品為微黃色澄明液體。

1.5.2 鑒別 本品顯有機(jī)氟化物的鑒別反應(yīng)^[4]。取本品含量測定項(xiàng)下溶液，在335 nm與249 nm波長處有最大吸收。

1.5.3 地塞米松磷酸鈉^[4]取本品1 ml，蒸干，加硫酸3 ml，振搖溶解，5 min內(nèi)顯淡紅棕色，加水10 ml混勻，顏色消失。

1.5.4 檢查 取本品，檢測其pH值應(yīng)為5.0～7.0。其他應(yīng)符合2005年版《中國藥典》（二部）附錄眼用制劑項(xiàng)下的有關(guān)規(guī)定。

2 結(jié)果

2.1 含量測定

2.1.1 色譜條件 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以乙腈-［10%甲磺酸溶液-1.0 mol/L 磷酸氫二鉀溶液-水（10∶7∶153）（用三乙胺調(diào)節(jié)pH值至3.0）］（30∶170）為流動(dòng)相，流速2.0 ml/min，溫度20℃～25℃，進(jìn)樣量為20 μl，測定波長范圍200～500 nm，檢測波長為249 nm。

2.1.2 溶液的制備 ①對(duì)照品溶液: 取干燥至恒重的甲磺酸帕珠沙星對(duì)照品，用流動(dòng)相制成每毫升中含約40 μg的溶液，作為對(duì)照品溶液；②供試品溶液及空白溶液：精密量取甲磺酸帕珠沙星凝膠適量用流動(dòng)相制成每毫升中含約40 μg的溶液，作為供試品溶液。同法制備不含甲磺酸帕珠沙星的空白溶液。

2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線 精密取干燥至恒重的甲磺酸帕珠沙星對(duì)照品適量，用流動(dòng)相稀釋至20.0、30.0、40.0、50.0、80.0 μg/ml，分別量取20 μl注入色譜儀記錄色譜圖，以濃度C為橫坐標(biāo)，峰面積X為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程X=50 691C-5 707，r=0.999 9，結(jié)果顯示本品在20.0～80.0 μg/ml濃度范圍內(nèi)，線性關(guān)系良好。

2.3 檢測波長 取對(duì)照品溶液，同時(shí)取按照處方量配制不含甲磺酸帕珠沙星（含地塞米松磷酸鈉、氯化鈉、羥苯乙酯）的空白溶液，在200～500 nm波長范圍內(nèi)掃描，甲磺酸帕珠沙星溶液在 249、335 nm 波長處有最大吸收, 因在249 nm 處吸收系數(shù)相對(duì)較大,而空白溶液在此波長處無吸收。在249 nm波長處，處方中的各組分對(duì)測定無干擾，故選定249 nm作為甲磺酸帕珠沙星溶液的檢測波長。

2.4 精密度試驗(yàn) 取2.1.2項(xiàng)下對(duì)照品溶液1 d內(nèi)0、4、8、12、16 h在2.2.1色譜條件下分別進(jìn)樣5次，結(jié)果日內(nèi)RSD=0.63%。

2.5 溶液穩(wěn)定型試驗(yàn) 取于室溫條件下放置的對(duì)照品溶液，連續(xù)5 d進(jìn)樣檢測，結(jié)果日間峰面積RSD=1.91%，未發(fā)現(xiàn)雜質(zhì)峰。結(jié)果表明，甲磺酸帕珠沙星溶液在考察時(shí)間范圍內(nèi)基本穩(wěn)定。

2.6 回收率試驗(yàn) 精密稱取甲磺酸帕珠沙星對(duì)照品適量(30.5、29.3、39.7、41.1、50.6、51.3 mg) ,置50 ml容量瓶中，按處方比例加入空白全輔料,加流動(dòng)相溶解、定容, 搖勻后吸取5 ml置于100 ml容量瓶中,加流動(dòng)相溶解、定容。精密量取續(xù)濾液20 μl進(jìn)樣，測定含量，得平均回收率為98.53%，RSD=1.77%（n=6）,詳見表1。

2.7 重現(xiàn)性試驗(yàn) 按樣品含量測定方法，測定同一批樣品（批號(hào)060418），結(jié)果含量平均值為96.9%，RSD=2.01%(n=6)。

2.8 樣品含量測定 精密稱取甲磺酸帕珠沙星滴眼液1 ml置于100 ml容量瓶中，加流動(dòng)相溶解、定容,搖勻，精密量取續(xù)濾液20 μl注入色譜儀測定含量，經(jīng)測定批號(hào)為051205、060129、0600312的樣品，含量分別為標(biāo)示量的97.1%、99.5%、96.7%。

2.9 穩(wěn)定型試驗(yàn) 取本品包裝完好，于室溫避光條件下放置12mo的樣品（批號(hào)為051205），觀察其外觀顏色無變化；參照含量測定項(xiàng)下，測定含量為標(biāo)示量的96.8%。結(jié)果表明本品性質(zhì)穩(wěn)定。

2.10 刺激性試驗(yàn) 取體質(zhì)量在2.0～3.0 kg健康家兔5只，2次/d分別于每只家兔一側(cè)眼內(nèi)滴入本品，另一側(cè)同時(shí)滴入生理鹽水做對(duì)照。記錄給藥后1、6、24、48、72 h和連續(xù)7 d的兔眼局部反應(yīng)情況，無發(fā)紅、充血現(xiàn)象。結(jié)果表明本制劑無刺激性，眼用安全。

3 討論

甲磺酸帕珠沙星屬第四代喹諾酮類抗菌藥,其作用機(jī)制為DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑，使細(xì)菌的DNA無法形成超螺旋結(jié)構(gòu),導(dǎo)致細(xì)菌無法分裂和增值而死亡^[5]。體內(nèi)、體外試驗(yàn)表明該藥具有廣譜抗菌性,對(duì)革蘭陽性菌、革蘭陰性菌均有效。對(duì)多種感染癥狀均有很高的療效,尤其對(duì)呼吸道感染、外科手術(shù)感染如膽道感染、尿路感染和眼內(nèi)感染療效更佳,而在中樞神經(jīng)系統(tǒng)方面的副作用較弱,本品的不良反應(yīng)發(fā)生率與注射用頭孢菌素類藥物大致相同,因此在使用這些藥物無效情況下,有望使用本品進(jìn)行治療^[6]。本制劑使用的是帕珠沙星的甲磺酸鹽，性質(zhì)穩(wěn)定，溶液呈弱酸性，不用加入其他物質(zhì)調(diào)節(jié)，pH值就在合格范圍之內(nèi)。

復(fù)方甲磺酸帕珠沙星滴眼液采用甲磺酸帕珠沙星與糖皮質(zhì)激素地塞米松磷酸鈉配伍，可增強(qiáng)抗菌抗炎效果。主要用于敏感菌引起的眼瞼炎、麥粒腫、淚囊炎、結(jié)膜炎、角膜炎、角膜潰瘍及術(shù)后感染等。本制劑采用高效液相色譜法測定含量，檢測結(jié)果準(zhǔn)確，方法可靠。本制劑制備方法簡單，生產(chǎn)周期短，一般制劑室都可生產(chǎn)。

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