高效液相色譜法測定脂肝康合劑中大黃酚含量

姜南輝

【摘要】 目的 建立脂肝康合劑質(zhì)量控制方法。方法 采用液相色譜法測定大黃酚含量。 結(jié)果 經(jīng)方法學(xué)考察，各項(xiàng)指標(biāo)均符合規(guī)定，方法回收率為97．2%，RSD為1．80%。結(jié)論 為該制劑質(zhì)量分析提供了可行的分析方法。

【關(guān)鍵詞】脂肝康合劑；大黃酚；高效液相

脂肝康合劑由決明子、丹參、芍藥等十余味中藥經(jīng)提取加工制成，具有活血化瘀，軟堅(jiān)散結(jié)之功效。臨床用于脂肪肝治療，取得了滿意的療效。為確保其制劑質(zhì)量，我們采用HPLC法測定決明子大黃酚含量，方法與條件如下。

1 儀器與試劑

島津LC-6A液相色譜儀，中北工作站。大黃酚對照品購于中國藥品生物制品檢定所，所用試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2．1 色譜條件 色譜柱shim-packCLC-ODS(6．0 mm×150 mm)流動相為甲醇-0．025 mol/L磷酸(9C∶C1)檢測波長 428 nm。

2．2 線性范圍考察 精密稱取大黃酚對照品5．01 mg 置50 ml容量瓶中，加甲醇溶解定容至刻度。精密吸取對照品溶液2、4、6、8、10 μl，測定色譜峰面積，以進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)，以色譜峰面積為縱坐標(biāo)，經(jīng)線性回歸，回歸方程為 Y=1 653 272．1x-7231．4r=0．999 9 進(jìn)樣量在0．1~0．5μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2．3 供試品溶液制備

精密吸取本品10 ml，加水10 ml，混勻，加2．5 mol/L硫酸溶液15 ml，沸水浴緩緩回流1 h，放冷，加氯仿30 ml，水浴回流提取0．5 h,放冷，分取氯仿液，水層加氯仿萃取3次(30，30，20 ml)，合并，水浴蒸干，殘?jiān)蛹状既芙猓ㄈ葜?5 ml量瓶中，經(jīng)微孔濾膜(0．45 μm)濾過，即得。

2．4 陰性干擾試驗(yàn)考察 按處方去除其它藥味按供試品制成陰性液，分別吸取供試液，陰性液與對照液各10 μl，分別進(jìn)樣。測定結(jié)果提示，供試品具有與對照品相同保留的色譜峰，陰性液無干擾。附圖見1、2、3。

2．5 穩(wěn)定性試驗(yàn)考察 精密吸取供試液10 μl，進(jìn)樣分析，分別在0、2、4、6、8 h分別進(jìn)樣，測定結(jié)果見表1，測定結(jié)果提示，8 h內(nèi)色譜峰面積無明顯變化，RSD%為1．08%，在此時間內(nèi)測定，其化學(xué)成分化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定。

2．6 精密度試驗(yàn)考察 分別吸取供試品溶液10 μl,連續(xù)進(jìn)樣5次，測定色譜峰面積。測定結(jié)果見表2，精密度試驗(yàn)良好。

2．7 重復(fù)性試驗(yàn) 取同一批號樣品5份，每份各10 ml，按供試品溶液制備方法制成供試液，按前述色譜條件測定，結(jié)果見表3。

2．8 回收率試驗(yàn)

精密吸取樣品5 ml，加入大黃酚對照液(0．24 ml/ml)5 ml，按樣品含量測定項(xiàng)下制備樣品液并進(jìn)行測定，測定結(jié)果見表4。

3 討論

3．1 大黃酚分別在224 nm、428 nm下有最大吸收峰，采用紫外224 nm下測定供試液干擾組分較多，在428 nm下測定，在選定的色譜條件下，供試品溶液與相鄰組分分離度良好。

3．2 經(jīng)對酸水解時間考察，水解時間為1 h,樣品中大黃酚已基本提取完全，故選擇水解1 h。

參考文獻(xiàn)

［1］ 季芳，闕瑞艷，周小軍.高效液相色譜法測定苦黃顆粒中大黃素和大黃酚的含量.陜西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)， 2005,28(6)：49.

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