精制桂枝茯苓膠囊對(duì)子宮肌瘤大鼠的影響及機(jī)制研究

摘 要：目的：研究精制桂枝茯苓膠囊(Jingzhi GuizhiFuling Capsule，JGFC)對(duì)子宮肌瘤大鼠的影響及作用機(jī)制。方法：采用雌二醇(aquadiol)及黃體酮(flavolutan)誘導(dǎo)雌性Wistar大鼠子宮肌瘤模型，進(jìn)行20周的藥物干預(yù)，觀察大鼠血的生化指標(biāo)、雌二醇(aquadiol)、黃體酮(flavolutan)及子宮病理變化。結(jié)果：JGFC與米非司酮(mifepristone)均能降低Wismr大鼠子宮系數(shù)、宮頸直徑及宮體直徑，減輕子宮病理?yè)p害。JGFC能降低aquadiol和flavolutan含量的趨勢(shì)。結(jié)論：JGFC能改善大鼠子宮肌瘤病變，其作用機(jī)制可能與降低血漿aquadiol和flavolutan等有關(guān)。

關(guān)鍵詞：子宮肌瘤；精制桂枝茯苓膠囊；雌二醇；黃體酮

中圖分類號(hào)；R285.5 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1007-2349(2007)12-0033-02

精制桂枝茯苓膠囊(Jingzhi Guizhi Fuling Capsule.JGFC)主要成分為桂枝、茯苓、牡丹皮、桃仁、芍藥等，具有活血化瘀、軟堅(jiān)散結(jié)之功能，臨床用于治療乳腺癥、子宮肌瘤、子宮內(nèi)膜異位癥等婦科疾患，治療效果較好.本研究通過(guò)在實(shí)驗(yàn)性高雌、孕激素大鼠模型上觀察JGFC對(duì)大鼠子宮體指標(biāo)，子宮肌瘤病理學(xué)，雌、孕激素水平的影響，探討JGFC對(duì)子宮肌瘤大鼠的保護(hù)作用機(jī)制。

1 材料和方法

1.1動(dòng)物分組及模型建立 40只清潔級(jí)雌性Wistar大鼠，體質(zhì)量150～180g，由南京醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，隨機(jī)分為正常對(duì)照組、子宮肌瘤模型組、米非司酮對(duì)照組和JGFC治療組，每組10只。子宮肌瘤模型組、米非司酮對(duì)照組和JGFC治療組每周1、3、5日肌肉注射苯甲酸雌二醇0.1mg／d，共20周。第14周起每周肌肉注射黃體酮1次0.5mg／d，共7周。正常對(duì)照組每周1、3、5日肌肉注射高壓滅菌花生油0.2ml，共20周。

1.2實(shí)驗(yàn)方法 JGFC治療組第11周起予JGFC(江蘇康緣藥業(yè)股份有限公司產(chǎn)品)，按5.790g／kg·d予以灌胃；米非司酮對(duì)照組第11周起予米非司酮，按2.25mg／kg·d予以灌胃，正常對(duì)照組和子宮肌瘤模型組僅給予等量生理鹽水灌胃，1次／d，連續(xù)10周。用藥第10周末，用戊巴比妥鈉按30mg／kg行大鼠腹腔麻醉，頸正中切口，頸動(dòng)脈取血.2000r／min離心10min，取上清，－20℃保存，各雌二醇和黃體酮檢測(cè)。取出子宮，稱重，子宮重量除以大鼠的體重即為子宮系數(shù)。測(cè)量宮頸和宮體處的最大直徑。用10％中性福爾馬林固定子宮組織，用石蠟包埋、切片后，行常規(guī)蘇木精一伊紅(hematoxylin andeosin，HE)及過(guò)碘酸Schiff(periodicaeid Schiff，PAS)染色。

1.3檢測(cè)指標(biāo)

1.3.1一般指標(biāo) 子宮重量除以大鼠的體重即為子宮系數(shù)。測(cè)量宮頸和宮體處的最大直徑。

1.3.2子宮組織病理學(xué)檢查 每張PAS染色切片在光鏡下(×200)光學(xué)顯微鏡觀察并測(cè)定子宮直徑，子宮壁厚度，肌層厚度，子宮壁平滑肌增生狀況，內(nèi)皮細(xì)胞類型及增生情況。子宮壁炎細(xì)胞浸潤(rùn)的程度。子宮壁平滑肌增生及肥大狀況由輕到重分別標(biāo)記為十、十、十十十、十十十十。又分別評(píng)分為1分、2分、3分、4分。宮壁擴(kuò)張、肌細(xì)胞萎縮者根據(jù)萎縮程度由輕到重減去1分。累積每組評(píng)分，并計(jì)算出x±sd，分值越高提示子宮平滑肌增生程度越嚴(yán)重。

1.3.3生化指標(biāo) 雌二醇和黃體酮采用放射免疫法進(jìn)行檢測(cè)[雌二醇(E₂)放射免疫藥盒購(gòu)自北京北免東雅生物技術(shù)研究所；孕酮(P)放射免疫藥盒購(gòu)自天津德普生物技術(shù)和醫(yī)學(xué)產(chǎn)品有限公司]。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS10.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。計(jì)量資料均數(shù)用x±s表示，組間比較采用方差分析和t檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1一般情況的比較實(shí)驗(yàn)期間，子宮肌瘤模型組和JGFC治療組各有1只大鼠因感染等原因而死亡，未納入最后統(tǒng)計(jì)。子宮肌瘤模型組大鼠較正常對(duì)照組子宮系數(shù)，宮頸直徑，宮體直徑增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。表明子宮肌瘤大鼠模型復(fù)制成功。子宮肌瘤模型組和JGFC治療組能降低大鼠子宮系數(shù)、宮頸直徑、宮體直徑，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，表明JGFC對(duì)子宮肌瘤大鼠的子宮系數(shù)、宮頸直徑、宮體直徑有影響。

與正常組比較，#P<0.05，##P<0.01，與空白對(duì)照組比較，#P<0.05

2.2子宮病理學(xué)變化的比較 病理組織學(xué)觀察結(jié)果表明，模型組表現(xiàn)為子宮壁肌層增厚，平滑肌細(xì)胞呈環(huán)行或局灶性，排列紊亂，并向系膜區(qū)延伸.增生的平滑肌細(xì)胞體積變大，胞核大，核仁大而明顯。此外宮內(nèi)膜上皮也較正常上皮增生，呈高柱狀，并出現(xiàn)鱗狀細(xì)胞化生，宮內(nèi)膜腺體數(shù)目減少，有部分子宮肌瘤病變嚴(yán)重。宮壁組織壞死，局部有大量炎細(xì)胞浸潤(rùn)(化膿性改變)，JGFC有減輕子宮平滑肌增生程度，未見(jiàn)化膿性改變，提示JGFC除對(duì)子宮肌瘤有治療作用外，還有一定程度的抗炎作用。

2.3大鼠激素水平的比較 由表中結(jié)果得知；模型組與正常組比較，大鼠血清中雌二醇的含量明顯上升，而JGFC有降低雌二醇和黃體酮含量的趨勢(shì)。由于模型組大鼠血清中黃體酮的含量較正常組低，難以分析藥物對(duì)黃體酮水平的影響，這可能與大鼠的生理周期及外源注射黃體酮影響了內(nèi)源性黃體酮分泌的原因。

3 討論

何任認(rèn)為婦人子宮肌瘤“癥之所以成，必因寒濕”。JGFC方中以桂枝辛甘而溫，通利血脈，茯苓甘淡滲濕，且補(bǔ)正氣味共為君藥，瘀久則化熱，則有丹皮、芍藥涼血散血，化瘀消癥；桃仁性能破血，去瘀生新，共為臣佐；合而成方，寒溫并施，邪正兼顧，即為化瘀，消癥之平劑。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為：乳腺增生、子宮內(nèi)膜異位癥、子宮肌瘤等病癥與機(jī)體雌激素水平過(guò)高而黃體酮拮抗不足密切相關(guān)，設(shè)法降低雌激素、孕激素濃度是治療措施的首選，西醫(yī)常采用米非司酮這一雌激素受體部分激動(dòng)劑與雌二醇競(jìng)爭(zhēng)雌激素受體，從而達(dá)到減弱雌激素作用的目的。本次實(shí)驗(yàn)表明，JGFC治療組與米非司酮組能降低大鼠子宮系數(shù)、宮頸直徑、宮體直徑，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，減少子宮平滑肌增生程度，降低雌二醇和黃體酮含量的趨勢(shì)，提示JGFC是治療雌二醇和黃體酮水平異常升高致子宮肌瘤、子宮內(nèi)膜異位癥、乳腺增生等癥的有效藥物。