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不同提取溶劑對藍靛果葉揮發性成分的影響

2025-11-18 00:00:00李國明劉曉瀅劉小瓊李錦紅李守嶺胡永亮
湖南農業科學 2025年9期

中圖分類號:0658 文獻標識碼:A 文章編號:1006-060X(2025)09-0059-05

Abstract:Theeffectsoftwodiferent solvents (n-hexaneandcyclohexane)forultrasonicextractiononthe volatilecomponentsof Loniceracaerulealeaveswereevaluatedregardingthetypesrelativecontent,andnumberofvolatilecomponents.Thersultsshowed thatwhenn-exaneandclohexawereuedastesets,and43olatileopotseredentifd,ithtetotalelatie content of 96.93% and 98.99% ,respectively.The relative content of esters obtained from extraction with the two solvents was higher thanthatofothercompounds.Therelativecontentofromatics,carboxylicacids,lefins,andphenolsobtainedviacyloheanewas higherthanthatobtainedvian-exaneTeelatiecontentofans,alools,sters,thers,andetonsotainedvialoae waslowerthanthatobtainedvian-exane.Thecylohexaneextracthadhighernumberofaromatics,alkanes,phenols,cohols, carboxylicacislefsdtestaneaneetct.Oralleailytractdtes,asdhie cyclohexanesoseteretractionecoaromatics,rboxylicacids,ndfis,emostratingtheextractinee to that of n-hexane.

Key words:Lonicera caerulea; ultrasonic solvent extraction method; volatile component; content analysis

藍靛果(LoniceracaeruleaL.)為忍冬科忍冬屬藍果忍冬的一個變種[,又名藍靛果忍冬、黑瞎子果和山茄子果等[2。藍靛果抗寒能力強,在我國主要分布于吉林長白山、黑龍江大興安嶺東部、黑龍江勃利縣以及內蒙古、河北、甘肅、四川的部分地區,在俄羅斯、日本等國家也有自然分布[3]。作為一種藥食同源的野生漿果,藍靛果因其獨特的營養價值和藥用特性而備受青睞[4]。其果實富含揮發油[5]、多酚[、花青素[7、花色苷[8]、環烯醚萜及酚酸[9]等活性成分,具有抗氧化[10-12]、抗炎[13]、抗菌[14]]抗疲勞[15]、調節血脂[16]、預防肝臟受損[17]、抗癌[18]等功效,展現出廣闊的開發與應用前景。

揮發性成分的提取方式多種多樣,常用方法包括索氏提取法、水蒸氣蒸餾法[19]、超臨界流體萃取法[20]和固相微萃取法[21]等,常用提取溶劑為正己烷、石油醚和乙醚等有機試劑。提取方法與溶劑的選擇顯著影響揮發油的產率、成分和品質[22]。忍冬屬植物揮發性成分的研究多集中于金銀忍冬[23]和黃花忍冬[24]等,對藍靛果揮發性成分的系統性研究則相對匱乏,且現有研究大多聚焦于其果實,關于葉片揮發性成分的報道相對較少。本研究采用超聲波溶劑提取法提取藍靛果葉中的揮發性成分,系統比較了正已烷和環己烷2種提取溶劑對揮發性成分類別、含量和數量的影響,以期為藍靛果葉揮發性物質的特性解析和資源利用提供參考。

1材料與方法

1.1 材料與試劑

藍靛果葉來源于云南省德宏熱帶農業科學研究所果蔬花卉資源圃。主要試劑為正已烷(色譜純,賽默飛世爾科技有限公司)和環己烷(分析純,天津市風船化學試劑科技有限公司)。

1.2 儀器與設備

DG160中藥材粉碎機(瑞安市春海藥材器械廠);GZX-9140MBE電熱鼓風干燥箱(上海博訊實業有限公司醫療設備廠);ML4002E電子天平[梅特勒-托利多儀器(上海)有限公司];SB25-12DTS雙頻超聲波清洗機(寧波新芝生物科技股份有限公司);CCA-1111冷卻水循環裝置(上海泉杰儀器有限公司);N-1200B旋轉蒸發儀(上海泉杰儀器有限公司);TraceISQ氣相色譜-質譜聯用儀(配有Xcalibur3.0數據處理系統,賽默飛世爾科技有限公司);AS3000自動進樣器(賽默飛世爾科技有限公司)。

1.3 試驗方法

1.3.1藍靛果葉樣品制備將采集的藍靛果葉于50% 條件下恒溫干燥,粉碎后過60目篩,所得樣品干燥保存備用。

1.3.2藍靛果葉揮發性成分提取稱取2份 0.5g 藍靛果葉樣品置于 100mL 比色管中,分別加入 25mL 正己烷和環己烷;將比色管置于超聲波清洗機中,于 30% 、 40kHz 頻率、 95% 功率條件下提取 1.5h :提取液經過濾后,用真空旋轉蒸發儀濃縮,獲得淡黃綠色的黏稠濃縮提取物,即藍靛果葉的揮發性成分。分別以少量相應提取劑(正已烷或環已烷)溶解濃縮物,轉移至 5mL 容量瓶并定容,搖勻后密封靜置,備用。

1.3.3待測溶液配制精密量取 0.5mL 上述揮發性成分溶液置于 5mL 容量瓶中,分別以相應提取溶劑將溶液定容至刻度線,搖勻后靜置 15min ;分別精密移取 1mL 溶液至進樣瓶,將進樣瓶置于自動進樣器中,以備進樣測試。

1.3.4氣相色譜-質譜聯用儀(GC-MS)分析條件色譜條件:TR-5MS毛細管色譜柱( 30m×0.25 mm×0.25μm ),載氣為高純氮氣(He),恒流模式,流速為 1mL/min ,分流比為 100:1 ,進樣量1μL ,進樣口溫度為 230% ;程序升溫:初始溫度為

90°C ,保持 1min ,以 10c/min 速率升溫至 250qC 保持 55min 。質譜條件:電離模式EI,離子源溫度250°C ,離子傳輸管溫度 250% ,電子能量 70eV 質量數掃描范圍為50~650。

1.3.5成分分析對2種提取溶劑所得的待測溶液進行GC-MS分析,繪制總離子流色譜圖,使用Xcalibur3.0系統和NIST質譜數據庫對色譜峰進行定性與定量分析,采用峰面積歸一化法計算各組分的相對質量分數。

2 結果與分析

2.1 藍靛果葉揮發性成分分析

圖1為使用正己烷提取的藍靛果葉揮發性成分(編號LGY01)的總離子流色譜圖,共鑒定出21種化合物,圖2為環已烷提取的揮發性成分(編號LGY02)的總離子流色譜圖,共鑒定出43種化合物。各揮發性成分的鑒定結果及相對含量見表1。

圖1正己烷提取的藍靛果葉揮發性成分的總離子流色譜圖

圖2環己烷提取的藍靛果葉揮發性成分的總離子流色譜圖

由表1可知,使用正己烷提取的21種揮發性成分的總相對含量為 96.93% ,有10種成分的相對含量高于 1% ,累計相對含量為 93.91% ,其中油酸甲酯、二十四烷、二十八烷、膽甾烷醇和二十烷的相對含量較高;使用環己烷提取的43種揮發性成分的總相對含量為 98.99% ,有21種成分的相對含量超過 1% 累計相對含量為 90.75% ,其中十七酸甲酯、3-甲基戊烷、二十四烷、棕櫚酸甲酯、二十八烷和甘菊藍的相對含量較高。

表1藍靛果葉揮發性成分分析結果

2.22種提取溶劑對藍靛果葉揮發性成分種 類和含量的影響

由圖3可知,除了酮類和醚類,環己烷提取物(LGY02)中其他類別的揮發性化合物數量均多于正己烷提取物(LGY01),其中LGY02的芳烴類、酯類、烷烴類和烯烴類化合物分別比LGY01多6、5、4和4種。

由圖4可知,在LGY01中,酯類、烷烴類和醇類為主要成分,相對含量分別為 51.28% 、 28.88% 和16.05% ;在LGY02中,酯類、烷烴類和芳烴類含量較高,分別為 46.26% 、 22.12% 和 13.10% LGY02中芳烴類、羧酸類、烯烴類和酚類化合物的含量分別比LGY01高13.10、5.55、2.78和1.03個百分點,醇類、烷烴類、酯類、醚類和酮類化合物的含量分別比LGY01低8.48、6.76、5.02、0.13和0.01個百分點。此外,正己烷提取物中未檢測出芳烴類、烯烴類和酚類化合物,而環己烷提取物中未檢測出醚類化合物。

圖32種提取溶劑對藍靛果葉揮發性成分類別數量的影響

圖42種提取劑對藍靛果葉揮發性成分類別相對含量的影響

3 結論與討論

提取方法與提取溶劑的選擇顯著影響揮發性成分的鑒定結果。李金英等[25采用頂空固相微萃取法從金銀忍冬和藍靛果忍冬果實中分別鑒定出16和18種成分,酮類和烷烴類物質的含量均較低。張軍等[26]采用超臨界流體萃取法,結合分子蒸餾技術,從金銀花揮發油中檢測出36種成分,主要成分為醇類和酯類。李敏等[2采用超臨界流體萃取法提取巨鹿金銀花精油,發現其主要成分為烷烴類和酯類。劉亞等[27采用水蒸氣蒸餾法從3種金銀花精油中鑒定出118種化合物,其類別存在種間差異。本研究采用超聲波溶劑提取法,以正己烷與環己烷為提取溶劑提取藍靛果葉揮發性成分,分析了2種溶劑所提取成分的類別、相對含量和數量。結果表明,超聲波溶劑提取法提取的藍靛果葉揮發性成分涵蓋了烷烴類、芳烴類、酮類、酚類、醇類、羧酸類、烯烴類、酯類和醚類9個類別,與同屬植物金銀忍冬經不同提取法所得的成分存在差異。

本研究表明,正己烷提取物中共鑒定出21種化合物,環己烷提取物中共鑒定出43種化合物;環己烷提取物中烷烴類、芳烴類、酚類、醇類、羧酸類、烯烴類和酯類化合物數量均多于正己烷提取物,芳烴類、羧酸類、烯烴類和酚類化合物的含量高于正已烷提取物,醇類、烷烴類、酯類、醚類和酮類化合物的含量低于正己烷提取物。2種溶劑提取的化合物在相對含量和數量上存在明顯差異,該差異可能與提取劑自身的化學結構特性有關。正己烷為直鏈烷烴,環己烷具環狀結構,這種結構差異使得二者物化性質不同,影響其對不同物質的溶解度。環己烷因其環狀空間構型,可能對同樣具有環狀或平面結構的芳烴、烯烴等組分表現出更強的溶解能力;而正己烷則更易萃取直鏈烷烴、酯類及某些直鏈醇類物質。因此,盡管正已烷和環己烷均為弱極性溶劑,主要提取弱極性組分,但本研究中,正己烷更傾向于提取酯類、烷烴類和醇類化合物,而環己烷對芳烴類、羧酸類及烯烴類化合物表現出更好的萃取效率,因此提取成分在組成與含量上產生了明顯區別。

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(責任編輯:王婷)

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