普洱茶多糖改善小鼠潰瘍性結腸炎的作用研究

引用格式：，等.普洱茶多糖改善小鼠潰瘍性結腸炎的作用研究[J].湖南農業科學，2025（5）：98-102

DOI：10.16498/j.cnki.hnnykx.2025.005.018

中圖分類號：TS272.5；R574.62 文獻標識碼：A 文章編號：1006-060X（2025）05-0098-05

Abstract：Ulcerativecolitis （UC）was iduced inmicebydextran sulfatesodium（DS），and Pu'er ea polysaccaride （PPS）was administered during the modeling period.Four groups of normal control，DsS model，low-dose （ （200mg/kg） PTPS，and high-dose （400mg/kg） PTPS were designed.Theeffcts of PTPSonDSS-induced UC were investigated fromthedisease activity index，colon morphology，istopathoogicalchanges，ndlevelsofinammatorycytokines.heresultsdmonstratedthatPTeviatedthe weightlossinbitedolonsorteingallviatedteolotisuedamagendiminisedteevationsinfamatoryctoie levels，thereby ameliorating DSS-induced UC in mice.The high-dose group demonstratedbeter effects.

Keywords：Pu'er teapolysaccharides;ulcerative colitis; inflammatory cytokines; colon

潰瘍性結腸炎（ulcerativecolitis，UC）是一種慢性非特異性疾病，主要累及直腸和結腸粘膜。目前，亞洲地區潰瘍性結腸炎的發病率呈現不斷上升的態勢[。潰瘍性結腸炎的發病機制較為復雜，受遺傳因素、腸道上皮屏障功能不全、腸道免疫功能失調以及飲食等多方面因素的影響，其中腸道免疫功能失調和腸道菌群改變引發的腸道內環境失衡是其發病的主要誘因[2-3]。盡管潰瘍性結腸炎的確切病因尚未完全明確，但目前已有證據表明，基因變異、免疫應激、腸道菌群紊亂以及結腸黏膜受損等因素與潰瘍性結腸炎的發病進程密切相關[4]。目前，沒有藥物能徹底治愈潰瘍性結腸炎，僅能通過醫療手段緩解癥狀、延長病情緩解期、提升患者生活質量及預防病情復發[5]。因此，探索新的改善策略并研制安全有效的藥物，是潰瘍性結腸炎患者的迫切需求。

多糖（Polysaccharides）是一種生物活性大分子，對腸道健康具有多方面積極影響，主要表現為：能修復結腸功能紊亂，改善結腸形態結構；能減少炎癥細胞浸潤，降低促炎細胞因子表達水平；能調節腸道菌群的構成與多樣性，促進腹瀉小鼠腸道黏膜功能恢復；等等。茶多糖（Teapolysaccharides）是茶葉中的關鍵生物活性物質，憑借其多靶點生物活性和多維度生理調節功能，已成為現代食品科學與醫藥領域的研究熱點[6-7]。研究表明，綠茶多糖可以通過抑制腫瘤細胞的增殖和侵襲，促進細胞凋亡，從而防止小鼠結腸炎相關的癌變[；茯磚茶多糖能夠調節腸道菌群失衡，促進微生物代謝，并修復腸道屏障，緩解潰瘍性結腸炎；鐵觀音烏龍茶多糖可通過調節T細胞介導的免疫反應并優化腸道微生物群，從而對小鼠結腸產生保護作用[0]

普洱茶是一種源自中國云南的大葉種黑茶，以其獨特性而著稱。目前，關于普洱茶多糖（Pu'erteapolysaccharides，PTPS）在改善潰瘍性結腸炎方面的研究尚未見報道。研究以右旋糖酐硫酸鈉（Dextransulfatesodium，DSS）誘導小鼠潰瘍性結腸炎進行建模，并在建模期間同步給予PTPS干預，從結腸形態、疾病活動指數、組織病理學、炎癥因子水平等方面探討了PTPS對DSS誘導的潰瘍性結腸炎的影響，以期為普洱茶多糖的開發應用提供參考。

1材料與方法

1.1 試驗材料

普洱茶多糖由湖南艾嘉生物科技有限公司提供。供試小鼠為SPF級6＼～8周齡雌性C57BL/6小鼠，購自湖南斯萊克景達實驗動物有限公司[生產許可證號：SCXK（湘）2019-0004]。試驗藥劑右旋糖酐硫酸鈉購自MPBiomedical。

1.2 試驗方法

供試小鼠飼喂于SPF級房間，房間溫度為（ 22±3 ） C ，濕度為（ 50±10 ） % ，光照條件為 12h 的光一暗循環，參與試驗前先適應性飼養 3d_?

試驗周期為 ^7d 。將小鼠隨機分為對照組（NC）DSS模型組（DSS）、低劑量PTPS組（LPTPS）、高劑量PTPS組（HPTPS），每個組6只小鼠。試驗周期內，除對照組外，其他3組小鼠用 3.0% （質量體積比）的DSS藥液（將DSS溶解于飲用水）代替飲用水，以構建潰瘍性結腸炎模型[11];對照組正常飲水。同時，低、高劑量PTPS組在試驗周期內分別每天灌胃200、 400mg/kg 的普洱茶多糖；對照組和DSS模型組灌胃等量的飲用水。

試驗期間，觀察小鼠的體重下降情況（ ?8% ）糞便黏稠度（成半固體或液態）和糞便出血情況（肉眼可見糞便帶血或肛門出血），從而判斷模型組建模是否成功。

試驗結束（即第8天），采集小鼠眼眶后靜脈竇的血液，靜置 30min ，離心收集血清。然后處死小鼠，測量結腸長度并拍照。切除干凈的結腸遠端組織，保存在固定試劑中進行病理檢查，其余組織用生理鹽水沖洗。所有樣品保存在 -80^°C 冰箱中。

1.3 測定指標及方法

1.3.1疾病活動指數評價根據既往研究，疾病活動指數（DiseaseActivityIndex，DAI）可通過體重下降百分比、糞便黏稠度及糞便出血情況3個指標來綜合評估[12]，各指標的評分標準如表1所示。DAI值為3個指標評分之和。

1.3.2組織病理學評價將遠端結腸樣本固定在 4% 多聚甲醛溶液中，石蠟包埋后進行蘇木精-伊紅（Hamp;E）染色，在顯微鏡下觀察結腸病理變化。

1.3.3炎癥因子的測量血清中細胞因子（ IL-1β 和TNF-α）水平采用酶聯免疫吸附測定Elisa試劑盒（武漢華美生物工程有限公司），按照說明書進行定量測定。

2 結果與分析

2.1PTPS對潰瘍性結腸炎小鼠體重變化率及疾病活動指數評分的影響

如圖1所示，試驗期間，NC組小鼠體重保持穩定上升趨勢，而DSS組、LPTLS組和HPTPS組小鼠體重均呈下降趨勢。相較于DSS組，LPTLS組和HPTPS組小鼠體重下降幅度有所減小，其中HPTPS組小鼠體重下降幅度較小。試驗第7天，NC組小鼠體重平均值較試驗前增加了 6.73% ，而DSS組、LPTLS組和HPTPS組小鼠體重平均值較試驗前分別下降 9.22% 、 5.66% 和 3.60% 。

如圖2所示，試驗期間，NC組小鼠未出現不良狀態，而DSS組、LPTLS組和HPTPS組小鼠均出現糞便黏稠度降低、糞便出血的癥狀。相較于DSS組，LPTLS組和HPTPS組小鼠拉稀便和糞便出血的情況均有所緩解，其中HPTPS組小鼠的緩解效果更好。試驗第7天，NC組小鼠的DAI評分為（ 分，而DSS組、LPTLS組和HPTPS組小鼠DAI評分分別為（ 8.86±1.36 ）（ 5.57±1.79 ）和（ 4.14±0.83 ）分，DSS組DAI評分相比于NC組顯著上升，而LPTLS組和HPTPS組小鼠DAI評分相較于DSS組上升顯著減緩。

綜上所述，不同劑量PTPS干預對小鼠結腸炎的發展有一定的緩解作用，且高劑量干預的作用更加顯著。

2.2PTPS對潰瘍性結腸炎小鼠結腸長度的影響

如圖3所示，NC組、DSS組、LPTPS組和HPTPS組小鼠的平均結腸長度分別為（ 8.58±0.10 ）（ 6.21±0.44 ）、（ 6.58±0.34 ）和（ 6.64±0.50 ）cm;相較于NC組，DSS組、LPTPS組和HPTPS組小鼠的結腸長度均有所縮短，其中DSS組縮短程度最顯著。經PTPS干預的LPTPS組和HPTPS組小鼠的結腸長度縮短程度有所改善，其中HPTPS組小鼠的結腸長度最接近NC組小鼠的結腸長度。該結果表明，PTPS能有效改善因結腸炎導致的結腸長度縮短，在一定程度上保護結腸組織。

2.3PTPS對結腸炎小鼠病理學形態的影響

如圖4所示，NC組黏膜下隱窩結構完整，無炎癥細胞浸潤，而DSS組杯狀細胞缺失，黏膜下隱窩破裂，炎癥細胞浸潤。相較于DSS組，PTPS干預后小鼠的結腸結構損傷、隱窩結構破裂均有所改善，炎癥細胞浸潤比例也有所下降，其中HPTPS組的效果優于LPTPS組。這表明，PTPS干預能顯著改善結腸組織損傷，減輕結腸炎的炎癥程度。

2.4PTPS對潰瘍性結腸炎小鼠結腸組織炎癥因子的影響

采用ELISA試劑盒定量檢測各處理小鼠血清中的IL- 1β 、TNF- ??a 等炎癥因子水平，結果如圖5所示，NC組、DSS組、LPTPS組和HPTPS組小鼠血清中的 IL-1β 炎癥因子水平分別為（ 65.24±11.31 ）、（ 142.55±44.85 ）、（ 72.61±2.97 ）和（ 34.31±4.85 ） ，TNF- σ?a 炎癥因子水平分別為（ 43.34±9.02 ）、（ 115.28±37.86 ）（ 76.22±12.35 ）和（ 85.72±9.03 ）pg/mL ，DSS組小鼠血清中 IL-1β 、TNF- σ?a 等炎癥因子水平明顯上升。而PTPS干預可以抑制炎癥因子水平的上升，其中HPTPS組小鼠血清中IL- 1β 炎癥因子水平顯著低于DSS組。總的來說，PTPS可以抑制炎癥因子水平上升，從而緩解DSS誘導的小鼠結腸炎癥狀，高劑量組的效果更好。

3 討論與結論

近年來，潰瘍性結腸炎在全球的發病率顯著上升，已成為全球性的公共衛生負擔[13]。臨床上用于改善潰瘍性結腸炎的常用藥物不良反應較為顯著，可能引發嚴重的過敏反應和高熱癥狀，降低骨密度，甚至增加骨折風險[14]。因此，開發高效低毒、改善潰瘍性結腸炎的天然活性成分備受關注。多項研究證明，普洱茶具有調節腸道菌群、緩解結腸炎的作用[15-17]

DSS誘導的小鼠潰瘍性結腸炎具有體重下降、腹瀉便血、結腸長度萎縮、炎癥因子水平升高等顯著特征[18]。本試驗中，低、高濃度的PTPS處理均有效緩解了小鼠體重下降、腹瀉便血、結腸長度萎縮、炎癥因子水平升高等癥狀，且高濃度的PTPS處理緩解效果更明顯。有研究表明，普洱熟茶水提物可通過抑制HIF-1α/NF-KB信號通路來改善結腸炎病情，茯磚茶可通過抑制JAK2/STAT3炎性信號通路來改善DSS誘導的小鼠潰瘍性結腸炎癥狀，青磚茶可通過增加小鼠腸道中短鏈脂肪酸含量來緩解小鼠潰瘍性結腸炎癥狀[19-21]

結腸組織充血、壞死、水腫是潰瘍性結腸炎的典型特征[22]。Hamp;E染色結果表明，DSS誘導的結腸黏膜損傷嚴重，表現為隱窩和杯狀細胞缺失，以及明顯的炎癥細胞浸潤，而PTPS能有效改善這些損傷。這些發現與PTPS可抑制炎癥因子水平（如IL-1β和TNF- σ?a ）升高有關。IL-1β作為炎癥反應的關鍵調節因子，對宿主的病原體防御至關重要，也可導致慢性疾病的急性組織損傷[23]。促炎因子（IL-1β和TNF-α）在結腸炎的發生發展中起關鍵作用[24]，可直接影響潰瘍性結腸炎的發病機制[25]。有研究表明，潰瘍性結腸炎患者血漿中TNF- σ?a 和IL-6的濃度顯著升高，其濃度與結直腸黏膜炎癥的嚴重程度呈正相關，而應用TNF- ??a 和IL-6抑制劑可有效抑制腸黏膜炎癥的進一步發展，這進一步證實了潰瘍性結腸炎的發生發展與TNF- σ?a 及IL-6的濃度密切相關[26-27]。本試驗中PTPS抑制炎癥因子水平的升高從而改善DSS誘導的小鼠潰瘍性結腸炎癥狀的結果與之一致。還有研究表明，普洱茶可通過調節腸道微生物菌群來減輕DSS誘導的小鼠氧化應激引起的炎癥[。本研究中PTPS通過減少炎癥因子釋放來改善DSS誘導的小鼠潰瘍性結腸炎癥狀，但具體機制仍需進一步研究。

綜上所述，PTPS具有緩解DSS誘導的小鼠潰瘍性結腸炎癥狀的功效，具體表現為控制體重下降、抑制結腸縮短、改善結腸組織損傷和抑制炎癥因子水平上升。這些發現不僅為闡明PTPS改善潰瘍性結腸炎的作用機制提供了依據，還為潰瘍性結腸炎新藥物的研發開辟了新方向。

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（責任編輯：成平）