鱘魚腹腔切開術(shù)及術(shù)后恢復(fù)技術(shù)初探

鱘魚（Acipenseriformes）是硬骨魚綱、鱘形目魚類的統(tǒng)稱，共27個(gè)種。鱘魚因其獨(dú)特的生物學(xué)特性而備受矚目，更因其深厚的生物進(jìn)化歷史和在生態(tài)系統(tǒng)中的關(guān)鍵地位而具有重要意義，被譽(yù)為“活化石”。其距今已有超過1.4億年的生長史，歷經(jīng)地球生物演化的多個(gè)階段，見證了眾多生物種群的興衰更迭。鱘魚本身具有很高的營養(yǎng)價(jià)值，鱘魚卵加工成的魚子醬更是與鵝肝、松露并列為“世界三大珍饈”，這也使其成為經(jīng)濟(jì)價(jià)值極高的全球性養(yǎng)殖和消費(fèi)魚類。20世紀(jì)80年代以來，野生鱘魚因?yàn)E捕濫撈和生存環(huán)境被破壞等因素的影響，種群數(shù)量急劇下跌，鱘魚生產(chǎn)無法再依靠野生捕撈[1]。中華鱘（Acipensersinensis）作為鱘形目、鱘科、鱘屬的代表性魚類，也是典型的江海洄游性魚類，被認(rèn)為是長江水生動(dòng)物的旗艦物種和水生態(tài)系統(tǒng)健康狀況的指示物種[2]。自葛洲壩截流以來，進(jìn)人長江的中華鱘繁殖群體數(shù)量嚴(yán)重衰退[3]，現(xiàn)已被列為國家一級(jí)重點(diǎn)保護(hù)野生動(dòng)物，《世界自然保護(hù)聯(lián)盟瀕危物種紅色名錄》連續(xù)多年評(píng)估其為極危物種[4]。事實(shí)上，現(xiàn)存的27種鱘魚均被列入該紅色名錄，其中 63% 已被列為極度瀕危級(jí)別。人工群體保育及搶救救護(hù)是鱘魚繁育、養(yǎng)殖、保護(hù)工作的重要一環(huán)，在工作過程中經(jīng)常會(huì)發(fā)現(xiàn)體質(zhì)較差的個(gè)體，針對(duì)這類患病或體質(zhì)較弱的鱘魚開展個(gè)體救治十分必要

由于鱘魚特殊的底棲習(xí)性和以吸食為主的攝食行為，在野外和人工養(yǎng)殖環(huán)境中，常常發(fā)現(xiàn)其胃內(nèi)有異物。誤食的異物包括鵝卵石、塑料袋、扎帶、螺絲等，對(duì)鱘魚生長發(fā)育、個(gè)體的健康造成不利影響，嚴(yán)重者會(huì)引起器官病變最終導(dǎo)致死亡[5]。大型魚類外科手術(shù)是解決胃內(nèi)異物問題的重要途徑之一，開展大型魚類外科手術(shù)技術(shù)研究，對(duì)物種保護(hù)工作有著非常重要的意義。目前大型魚類的外科手術(shù)尚處于初步探索階段，國內(nèi)外相關(guān)研究較少。魚類作為水生生物，與陸生的哺乳動(dòng)物和爬行動(dòng)物相比，其生存環(huán)境、生活方式及生理結(jié)構(gòu)均有極大的差異，目前在魚類外科手術(shù)方面還沒有成體系的研究成果。陳細(xì)華等[6]對(duì)低齡中華鱘進(jìn)行了外科手術(shù)鑒定性別技術(shù)研究。針對(duì)魚類外科手術(shù)的相關(guān)研究報(bào)道還有對(duì)（ Tenualosa reevesii）[7]、鰱（Hypophthalmichthysmolitrix）8的親本性腺檢測(cè)手術(shù)；斑馬魚（Daniorerio）的器官再生研究[9]；龍魚（Scleropages formo-sus）的美容手術(shù)[io]；金魚（Carassiusauratus）的腫瘤手術(shù)[]等。但其中涉及魚類內(nèi)臟的外科手術(shù)僅見烏（Channaargus）[2]胃瘺管植入手術(shù)的報(bào)道。以上大多是人工繁殖、產(chǎn)后治療、性別鑒定等方面的基礎(chǔ)性研究，有關(guān)大型魚類外科手術(shù)的報(bào)道較少。鱘魚作為大型經(jīng)濟(jì)和保護(hù)魚類，關(guān)于其外科開腹手術(shù)的報(bào)道大多為性腺觀察及摘除的案例[13-15]

本試驗(yàn)以雜交鱘（西伯利亞鱘Acipenserbaerii5× 史氏鱘A.schrenckii subseteq ）為研究對(duì)象，針對(duì)其在養(yǎng)殖條件下出現(xiàn)的胃內(nèi)異物或異常增生等癥狀，通過腹腔切開手術(shù)的方法，探索鱘魚外科手術(shù)及術(shù)后恢復(fù)技術(shù)，尋找解決鱘魚體腔內(nèi)疾病高效安全的救治方式。

1 材料和方法

1. 1 試驗(yàn)材料

1. 1. 1 試驗(yàn)動(dòng)物

試驗(yàn)動(dòng)物為雜交鱘（西伯利亞鱘Acipenserbaerii 5× 史氏鱘A.schrenckii 9 ），體長（ （45±3） （20cm ，共2尾，暫養(yǎng)于長 2.7m 寬 2.7m 高 1.2m 的方切圓形循環(huán)水養(yǎng)殖池內(nèi)。暫養(yǎng)池水溫控制在（22±2）^°C ，水體溶解氧保持在 7mg/L 以上，氨氮質(zhì)量濃度不超過 0.15mg/L ，亞硝酸鹽質(zhì)量濃度不超過 0.02mg/L 。

1.1.2 試驗(yàn)器材

試驗(yàn)器材主要有：MS-222（3-氨基苯甲酸乙酯）；生理鹽水、碘酒、消毒酒精、 10mL 注射器、止血紗布、消毒棉球；手術(shù)刀、手術(shù)剪、無/有齒鑷、創(chuàng)巾鉗、止血鉗、持針鉗、圓形針、棱針、縫合線（上海醫(yī)療器械集團(tuán)有限公司）；可吸收縫合線（上海浦東金環(huán)醫(yī)療用品股份有限公司）；502醫(yī)用組織膠（北京康派特醫(yī)療器械有限公司）；顯微鏡（尼康ECLIPSE Ci Series）。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2. 1 人員無菌準(zhǔn)備

修剪指甲，取下手表和飾物，從手指至肘上10cm 處用肥皂交替刷洗，再用清水沖洗，重復(fù)3次，共約 10min 。用無菌巾從手到肘擦干，避免使用吹干機(jī)。涂擦消毒劑后，保持拱手姿勢(shì)，手臂不接觸未滅菌物品。清洗消毒完成后，由消毒完成的助手協(xié)助穿戴口罩帽子及無菌手術(shù)衣。

1.2.2 試驗(yàn)動(dòng)物準(zhǔn)備

試驗(yàn)動(dòng)物提前 24h 停止投喂，麻醉前檢查其心跳、鰓動(dòng)次數(shù)等指標(biāo)。使用質(zhì)量濃度為100mg/L 的MS-222進(jìn)行浸浴麻醉。麻醉后將試驗(yàn)魚呈側(cè)臥體位放置。其間根據(jù)其復(fù)蘇情況補(bǔ)充使用麻醉藥物。

1.2.3 手術(shù)操作

從手術(shù)區(qū)中心向四周畫圈消毒，先用碘酒棉擦拭2次，2次擦拭間隔 1min ，再用酒精棉脫碘。消毒完成后，沿胸鰭基部中線切開受試動(dòng)物皮膚（第1次切口長 8cm ，第2次繼續(xù)切至 10cm ），分離皮下組織，并牽開皮膚暴露臟器。主手術(shù)中，用止血鉗夾住食道，剪開 2～3cm 創(chuàng)口（見圖1），壓迫止血后擦拭干凈。閉合手術(shù)通路用可吸收縫合線縫合食道和皮下組織，皮膚縫合方式依手術(shù)順序而定（第1尾試驗(yàn)魚采用1針1結(jié)方式：第2尾試驗(yàn)魚采用連續(xù)縫合結(jié)合醫(yī)用組織膠的方式）。

1.2.4 術(shù)后護(hù)理

術(shù)后護(hù)理包括：麻醉蘇醒后輔助試驗(yàn)魚游動(dòng)，避免其碰撞及翻肚；在創(chuàng)口愈合前禁食；保持水溫在 22^°C ，每周用質(zhì)量濃度 0.5mg/L 的聚維酮碘進(jìn)行水體消毒；術(shù)后 24h 內(nèi)嚴(yán)密觀察，之后每日觀察，注意防止發(fā)生并發(fā)癥；連續(xù)3d注射硫酸慶大霉素抗感染；每7d記錄創(chuàng)口恢復(fù)情況，并進(jìn)行1次創(chuàng)口恢復(fù)情況的觀察及拍攝記錄。同時(shí)參照紅腫和切口愈合的評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)（見表1＼～表2）[16]完成手術(shù)記錄表進(jìn)行評(píng)估，

2 結(jié)果

2.1 手術(shù)流程和結(jié)果

第1次手術(shù)試驗(yàn)主要完成打開手術(shù)通路的試驗(yàn)任務(wù)，確認(rèn)手術(shù)大致時(shí)長、符合手術(shù)的麻醉藥物適宜濃度、術(shù)后恢復(fù)時(shí)長、縫合手法等基本要素。通過第1次試驗(yàn)確認(rèn)手術(shù)時(shí)長可以控制在 ^1h 之內(nèi)，麻醉藥物的質(zhì)量濃度在 100～150mg/L ，術(shù)后恢復(fù)時(shí)長約為 35d 。同時(shí)發(fā)現(xiàn)1針1結(jié)的縫合方式會(huì)出現(xiàn)開線情況，并且由于張力過大，針眼處的皮膚會(huì)被縫合線勒斷。

第2次手術(shù)試驗(yàn)在第1次試驗(yàn)的基礎(chǔ)上進(jìn)行了優(yōu)化，并完成了食道切開的主手術(shù)。通過縮小麻醉藥物濃度的提升范圍，將麻醉濃度范圍縮小至 100～120mg/L ，并在手術(shù)過程中補(bǔ)充使用1＼～2次麻醉藥物。另外，采用連續(xù)縫合結(jié)合醫(yī)用組織膠的方式，502醫(yī)用組織膠的使用明顯減少了試驗(yàn)魚腹部的張力，加快了創(chuàng)口愈合速度，于術(shù)后20d 愈合（見圖2）。將2次手術(shù)試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行整理，初步完成了手術(shù)流程的制定（見表3）。

2.2 術(shù)后護(hù)理和恢復(fù)

魚類生存在水體環(huán)境中，護(hù)理工作有其特殊性和針對(duì)性。在即將進(jìn)行手術(shù)的試驗(yàn)魚進(jìn)入水體暫養(yǎng)前，應(yīng)進(jìn)行水體的清潔消毒，以降低手術(shù)感染風(fēng)險(xiǎn)。人池后人工輔助試驗(yàn)動(dòng)物保持平衡，確保其能夠趴伏或游動(dòng)脫離輔助。術(shù)后護(hù)理期間，應(yīng)控制觀察和檢查頻次，在及時(shí)記錄創(chuàng)口變化的同時(shí)，盡量減少魚體應(yīng)激，降低創(chuàng)口開裂的風(fēng)險(xiǎn)。在術(shù)后護(hù)理過程中能夠看出創(chuàng)口紅腫指數(shù)與愈合指數(shù)呈現(xiàn)正相關(guān)關(guān)系（見表4）。根據(jù)受術(shù)魚恢復(fù)過程的記錄， 5cm 長的創(chuàng)口在無開線的情況下，20d左右可完全閉合，且未發(fā)生并發(fā)癥及繼發(fā)感染現(xiàn)象。但在后續(xù)檢查創(chuàng)口愈合程度時(shí)，可見腹腔內(nèi)部與腸道粘連的現(xiàn)象，腹部組織切片可見愈合創(chuàng)口的真皮層與正常真皮層相比更薄，并嵌入腸道與腸道表皮粘連（見圖3＼～圖4）。

基于本試驗(yàn)結(jié)果，未來應(yīng)重點(diǎn)解決外科手術(shù)技術(shù)及并發(fā)癥問題。魚類外科手術(shù)技術(shù)需要解決麻醉判定及縫合的技術(shù)難點(diǎn)。在麻醉判定方面，目前均以麻醉過程中的2尾雜交鱘呼吸消失判定為達(dá)到深度麻醉，無法通過呼吸頻次判斷麻醉效果。深度麻醉與死亡的行為界限不明顯，因此麻醉將會(huì)成為手術(shù)中面臨的最大隱患。建議參照哺乳動(dòng)物外科手術(shù)監(jiān)測(cè)心跳的方式，使用心電儀、聽診器等設(shè)備，引入魚類心跳麻醉效果的監(jiān)測(cè)[17]確定最適麻醉劑量，確保手術(shù)安全。在縫合技術(shù)方面，本研究首次試驗(yàn)采用1針1結(jié)的縫合方式，導(dǎo)致縫合線勒斷了魚體肌肉；第2次試驗(yàn)改用連續(xù)縫合方式，并結(jié)合使用醫(yī)用組織膠，手術(shù)效果有所改善。但面對(duì)更大個(gè)體時(shí)仍需解決“厚皮”“硬皮”的縫合問題?？p合技術(shù)和縫合線[18]的選擇是解決胃異物病例的關(guān)鍵。

手術(shù)并發(fā)癥包括術(shù)中術(shù)后大出血、心臟驟停、臟器粘連等，是鱘魚外科手術(shù)的另一大風(fēng)險(xiǎn)，建議可借鑒人類及獸類的外科手術(shù)經(jīng)驗(yàn)。如臟器粘連也是人類腹腔鏡手術(shù)后的并發(fā)癥之一[19]，關(guān)于臟器粘連問題，人類外科手術(shù)存在解決方案[20]，可嘗試應(yīng)用人類外科手術(shù)的相關(guān)技術(shù)，并結(jié)合鱘魚的生理結(jié)構(gòu)進(jìn)行技術(shù)轉(zhuǎn)換和優(yōu)化。

3討論

本研究通過2次鱘魚腹部切開手術(shù)試驗(yàn)，驗(yàn)證了鱘魚開腹手術(shù)的可行性，并初步建立了手術(shù)基本流程，成功模擬了取胃異物的全過程，達(dá)到了鱘魚取胃異物應(yīng)用的基本要求。鱘魚性成熟周期長，養(yǎng)殖成本高、風(fēng)險(xiǎn)大，個(gè)體養(yǎng)殖戶和企業(yè)需采取措施降低養(yǎng)殖風(fēng)險(xiǎn)。

本試驗(yàn)為通過外科手術(shù)技術(shù)治療鱘魚胃內(nèi)異物疾病進(jìn)行了有益的探索，初步構(gòu)建了鱘魚腹腔切開術(shù)合并食道切開術(shù)的手術(shù)流程和術(shù)后護(hù)理技術(shù)，是對(duì)中華鱘物種保護(hù)技術(shù)發(fā)展的重要支撐，對(duì)魚類保護(hù)研究具有積極作用。未來需進(jìn)一步優(yōu)化手術(shù)操作技術(shù)、用藥選擇、術(shù)后護(hù)理及康復(fù)評(píng)價(jià)等方面，包括手術(shù)切口方式和大小對(duì)術(shù)后康復(fù)的影響、縫合方式對(duì)手術(shù)時(shí)間及術(shù)后恢復(fù)的影響、不同麻醉方式的安全性評(píng)價(jià)、術(shù)后護(hù)理措施的效果評(píng)估等，以完善鱘魚手術(shù)技術(shù)。

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Preliminary study on peritoneotomy and postoperative recovery techniques of Acipenseriformes

WANG Yifan1，2， XU Jianan1，2，SHI fengyao ^1，2 ，SONG Yindu ^1，2 ， FAN Houyong ^1，2 ， CHU Yanchen ^1，2 ， ZHENG Yueping ^1，2 （1. Shanghai Aquatic Wildlife Conservation and Research Center， Shanghai 2O0092，China;2. Joint Laboratory for Monitoring and Protection of Aquatic BiologicalResources in the Yangtze River Estuary， Shanghai2O0092，China）

Abstract：Gastric foreign bodies and coelomic organ lesions are pressing disease challenges in sturgeon Acipenseriformes aquaculture.This study investigated coelomic incision and esophageal incision surgical techniques in hybrid sturgeon（ Acipenser baerii δgt; KA. schrenckii G ），aiming to establish safe and effective surgical protocols and postoperative recovery strategies.Through visual monitoring and histopathological analysis，the study assessed tissue regeneration and coelomic organ adhesion under different suturing methods.Two surgical experiments were conducted，in which coelomic incisions were closed using continuous suturing reinforced with medical tissue adhesive.Wound healing progresson was documented at7，14，21，28，and 35 days post-surgery through visual inspection and photography. The results of this study indicate that the coelomic incision in hybrid sturgeons completely healed by 35 days post-surgery，allwing normal survival. The use of continuous suturing combined with medical adhesive was more conducive to postoperative wound recovery in Acipenseriformes，efectively reducing therisk of postoperative infection.In conclusion，this study completed a preliminary exploration of the technical process for removing gastric foreign bodies in Acipenseriformes，verifying theclinical feasibilityofsurgical interventions in this species.However，the causes and solutions for postoperative coelomic adhesion complications require further research.

Key words： Acipenseriformes； surgical operation； postoperative care； stomach foreign body