葛根芩連湯、白頭翁湯、加減蒿芩清膽湯防治雞濕熱泄瀉的藥效試驗

2025-06-21 00:00:00趙增成劉月月殷斌楊世發閆遵祥林樹乾

家禽科學 2025年5期

中圖分類號：S853.7 文獻標識碼：A文章編號：1673-1085（2025）05-0048-06

濕熱泄瀉是中醫泄瀉當中的一種類型，指感受濕熱之邪，傷及腸胃，傳化失常，水濕下注大腸而發生的腹瀉病證，具體癥狀為泄瀉腹痛，瀉下急迫或瀉而不爽，糞便色黃臭穢，肛門灼熱[1-3]。家禽濕熱泄瀉是最為常見的腹瀉性疾病，嚴重影響家禽健康，降低生產性能，影響飼養環境衛生，可導致飼料轉化率降低，成活率下降，成為制約家禽業生產效益的重要因素[4-5]。在濕熱泄瀉的防控上，目前養殖者普遍使用抗生素等西藥治療，但抗生素等化藥的長期使用，也帶來了獸藥殘留難以控制、細菌產生耐藥性等問題，進而對食品安全和人類健康造成危害[。我國傳統中獸藥有幾千年的歷史，不僅積累了豐富的臨床經驗，也形成了獨特的中獸藥理論體系與診療方法，具有顯著的臨床療效。同時，中獸藥以其藥源的天然性、功效的整體性、低毒副作用、低殘留、不易導致病原微生物產生耐藥性等特點，近年來贏得了國內獸藥界和畜牧界的廣泛認同和歡迎。在中獸醫濕熱泄瀉研究中，本試驗采用SPF雛雞，經口腔灌服大腸桿菌CVCC1558株，成功構建了雞濕熱泄瀉病證模型。該方法建立的病證模型完全符合中獸醫濕熱泄瀉證的病因、病位、病機和證候特點，臨床癥狀明顯，剖檢特征典型，病程時間長，模型穩定，重復性好[。為研發出防治濕熱泄瀉的安全高效中獸藥產品，利用成熟的雞濕熱泄瀉病證模型構建方法，選用葛根芩連湯、白頭翁湯、加減蒿芩清膽湯3種經典方劑為試驗藥物，進行了臨床藥效試驗，以篩選出有效的中藥組方，用于家禽。

1材料與方法

1.1試驗材料

1.1.1中藥方劑葛根芩連湯：葛根 15g ，黃芩9g ，黃連 9g ，甘草 6g 。白頭翁湯：白頭翁 15g 黃柏 12g ，黃連 6g ，秦皮 12g_c ，加減蒿芩清膽湯：青蒿 4.5g ，淡竹茹 g_g ，仙半夏 4.5g ，赤茯苓 g_g 滑石 6g ，黃芩 4.5g ，生枳殼 4.5g ，陳皮 4.5g ，金銀花 3g ，馬齒莧 6g ，甘草 1g 。各中藥飲片，均購自濟南百味堂中藥飲片有限公司。

1.1.2試驗動物30日齡 SPF雞，由山東昊泰實驗動物有限公司提供。

1.1.3大腸埃希菌菌株菌種保藏編號CVCC1558，購自中國獸醫微生物菌種保藏管理中心。

1.1.4儀器試劑顯微鏡，日本奧林巴斯公司;普通營養肉湯培養基，北京奧博星生物技術有限責任公司，批號20221103。血細胞計數板、采血管、

沙利吸血管，均購自濟南盛偉生物技術有限公司。

軟頭數字溫度計，精度，丹麥古氏集團。

1.2試驗方法

1.2.1試驗分組共分為5組，每組10只SPF雞，其中3個藥物試驗組、1個攻毒對照組和1個陰性對照組。

1.2.2中藥液的制備將以上處方量的3種中藥方劑，分別加水煎煮兩次，合并兩次煎液，濃縮定容至 200mL ，加入 1% 苯甲酸鈉防腐。

1.2.3大腸埃希菌菌液培養取保存的菌種0.2mL ，接種于 50mL 營養肉湯中，搖床培養^18h ，測定細菌含量為 1.125×10⁹ CFU/mL，置4℃保存備用。

1.2.4雞濕熱瀉泄模型的構建按照前期模型構建方法，每只雞胃管灌服上述大腸埃希菌新鮮肉湯培養液 4mL ，陰性對照組不攻毒。

1.2.5用藥方法與劑量攻毒6h后，各藥物試驗組開始用藥，經口腔灌服藥液，每天上、下午各灌服1次，連用 5d ，各組用藥情況及劑量見表1。

1.2.6臨床表現每天認真觀察雞群精神癥狀，若出現羽毛逆立、縮頭閉眼、呆立等癥狀，均判為精神沉郁。若精神無明顯異常表現，神情活潑、采食飲水正常，均判為精神正常。每天分別統計各組精神沉郁、精神正常的雛雞數量，并計算各組精神正常雞占總雞數的百分比。

1.2.7糞便觀察每天觀察各組雞群的糞便，對各組糞便狀況分級計分評定，共分4級：水樣糞便的，判為重度腹瀉，記作3分；糞便黃色稀薄，不成形的，判為中度腹瀉，記為2分；糞便黃色稀軟，基本成形的，判為輕度腹瀉，記作1分；糞便黑灰色，成形，略有白色尿酸鹽附著的，判為糞便正常，記作0分。

1.2.8體溫測定使用電子測溫計測量直腸溫度。攻毒前測量體溫一次，記錄基礎體溫。攻毒后，每天相同時間測量體溫并記錄，直至試驗結束。

1.2.9體重測定攻毒前，稱量體重一次，記錄初始體重；用藥結束時，稱重一次；試驗結束時，稱重一次，計算增重率。

增重率 Σ=Σ （終末體重-初始體重）/初始體重×100% 1.2.10血液學檢查試驗結束時，每只雞翅靜脈采血，置EDTA-K2抗凝采血管中。采用計數板顯微鏡計數法，進行紅細胞計數。

紅細胞計數：用 5mL 吸管吸取紅細胞稀釋液3.98mL 置于試管中。用沙利吸血管吸取全血樣品至 20μL 刻度處。擦去吸管外壁粘附的血液，將血液吹入試管底部，再吹吸數次，以洗凈沙利管內粘附的血細胞，然后將試管顛倒混合數次。用毛細吸管吸取已稀釋好的血液，放于計數室與蓋玻片接觸處，讓血液稀釋液自然流入計數室中靜置 1～2min 。先用低倍鏡，光線要稍暗些，找到計數室后，把中央的大方格置于視野之中，然后轉用高倍鏡。在中央大方格內選擇四角與最中間的五個中方格，數取五個中方格內的紅細胞總數，按公式 X/80×400×200×10×10⁶ 計算出1L血液中紅細胞個數，其中X為五個中方格內的紅細胞總數。

白細胞計數：將一小滴血液置于載玻片上，將推片與載玻片形成 30^° 夾角，制成分布均勻的薄血片，經瑞氏染色后，置顯微鏡下觀察。在油鏡下，從左向右選取6個不同的視野，保存圖片于計算機中，將保存的圖片于imageJ軟件中進行紅細胞和白細胞計數，計算白細胞與紅細胞的百分比。將紅細胞總數 × 白細胞與紅細胞的百分比，間接計算出試驗雞血液中白細胞的數量。

1.2.11剖檢試驗結束時，試驗雞全部頸部放血處死，剖檢，記錄病變。

2試驗結果

2.1雞群精神狀況

攻毒后次日，攻毒各雞群均表現為扎堆，部分雞出現明顯的縮頭、閉眼、羽毛逆立、呆立等精神沉郁癥狀，整個試驗期各組均未出現死亡。A組（葛根芩連湯）、B組（白頭翁湯）、C組（加減蒿芩清膽湯）3個藥物組，雞精神狀態明顯好于陽性對照組，差異顯著（ Plt;0.05 ）；陰性對照組精神均正常，結果見表2。

2.2腹瀉情況

攻毒后次日發現，攻毒各雞群均表現出腹瀉癥狀，拉黃色稀糞，每天各組糞便情況及腹瀉程度計分，統計結果見表3、4。試驗表明，各藥物組從用藥第4天開始起，腹瀉程度較陽性對照組癥狀變輕；從平均腹瀉計分情況分析，B組、C組與陽性對照組相比差異顯著（ Plt;0.05 ）。

2.3體溫測定結果

攻毒前各組的基礎體溫（0d）均無差異。攻毒1d后，與陰性對照相比，各攻毒組體溫均升高。整個試驗期間總的平均體溫，A組、B組、C組顯著低于陽性對照組（ Plt;0.05 ），與陰性對照組間無顯著差異（ Pgt;0.05 ）；而陽性對照組總的平均體溫，顯著高于陰性對照組（ Plt;0.05 ）。試驗結果表明，3個藥物方劑均具有較好的清熱效果。攻毒后不同天數各組平均體溫見表5。

2.4增重情況

各組在攻毒后第6天、第9天稱重及增重率，詳見表6。結果表明，B組、C組增重率高于陽性對照組，C組第9天時增重率甚至超過陰性對照組。

2.5血液學檢查紅細胞與白細胞情況

紅細胞和白細胞計數結果見表7。結果表明，各組紅細胞計數無明顯差異。3個藥物組白細胞數少于陽性對照組，高于陰性對照組。白細胞數量增加一般為細菌性炎癥的表現，表明各藥物組炎癥較陽性對照組為輕。

2.6 剖檢結果

陽性對照組個別雛雞具有輕微心包炎、肝周炎病變；藥物組均未出現心包炎、肝周炎、腹膜炎病變。陽性對照組和3個藥物組均全部表現腸炎病變，腸黏膜脫落，腸壁變薄，內容物稀薄、色黃；但陽性對照組腸黏膜脫落最嚴重，腸壁更薄，有2只雛雞腸黏膜出血；陰性對照組無明顯病變。

3討論

從試驗結果來看，各藥物組在精神狀況、體溫變化、腹瀉程度、白細胞計數、增重率、病理變化方面，與陽性對照組相比，各項指標均有較好表現，表明葛根芩連湯、白頭翁湯、加減蒿芩清膽湯均對雞濕熱泄瀉具有較好的防治效果。考慮到畜牧業經濟效益中，增重率是非常重要的一項指標，因此可優選加減蒿芩清膽湯。

葛根芩連湯、白頭翁湯皆是中醫中最為常用的治療濕熱泄瀉的經典方[8-9]，都可用于熱性腹瀉，癥見糞便黃、黏稠而臭穢。但葛根芩連湯功效為解表清里，主要用于外邪由表入里、熱入胃腸、邪迫津液下泄而形成的一種熱瀉。白頭翁湯功效為清熱解毒、涼血止痢，更側重于主治濕熱壅塞于腸道與熱毒熏灼腸胃氣血所致的熱毒血痢[10]。兩個方劑雖都可用于治療濕熱泄瀉，但應用時要有所偏重。

蒿芩清膽湯具有和解少陽、清膽利濕、和胃化痰之功效，是主治少陽濕熱證的名方[1]。但是本方用于治療因外感濕熱邪氣而出現嘔吐、泄瀉、大便黃臭、舌苔黃膩的濕熱泄瀉，也具有很好的效果[12]。機體感受了濕熱邪氣，濕遏熱郁，則三焦氣機不暢，手少陽三焦經是氣機升降之樞，足少陽膽經是氣機出入之樞，可相互影響。三焦氣機不暢，就會導致少陽膽氣郁化火，出現膽熱；膽火熾盛，必然橫逆犯胃，木郁土壅，使脾胃的升清降濁功能失常，致津液不能正常敷布，凝聚而成痰濕，水濕下注大腸而發生泄瀉，胃氣上逆則嘔。胃腸郁熱，則糞便黃臭。方中青蒿微苦微寒而芳香，輕宣透熱，芳香化濕，疏通少陽氣機，透散表邪；黃芩苦寒，清泄少陽而清半里的郁熱。兩藥合用，一透表，一清里，既能清透少陽濕熱，又能祛邪外出，和解表里。半夏、陳皮辛溫，燥濕和胃理氣。茯苓、甘草健脾益氣。枳殼配陳皮理氣行滯開郁。竹茹苦寒，清膽胃之熱，化痰止嘔。滑石、赤茯苓，清熱利濕，導邪從小便而出。本方是辛開苦降與淡滲利濕共用，通過辛開苦降來燥濕降氣化痰，通過淡滲利濕使濕邪下行，一方面從中焦使痰濕從燥化而消除，一方面使痰濕下行從小便而出。總體來看，這個方劑具有清透少陽、分消走泄、清膽和胃、祛除濕熱之功效，對濕熱泄瀉具有很好的治療效果[13-14]。金銀花甘寒，功效為清熱解毒、疏散風熱、涼血止痢。馬齒莧酸寒，清熱解毒，涼血止痢。兩者常配伍使用，用于治熱毒血痢。蒿芩清膽湯中，加入金銀花、馬齒莧，以發揮清熱解毒、涼血止痢的作用，對濕熱泄瀉尤其是出現下痢膿血時，效果更佳。因原方中青黛功效也是清熱瀉火、涼血解毒，因此增加金銀花、馬齒莧后，減去了青黛。本試驗為了增強治療濕熱泄瀉的作用，以青蒿芩清膽湯為基礎方，對方劑進行了加減。

參考文獻：

[1]劉小玉，李玉娟，姜厚望，等.葉天士與薛生白治療濕熱泄瀉的用藥特色分析[J].中國中藥雜志，2018，43（8）：1720-1725.

[2]左黎黎.基于古籍醫家的痢疾源流探析[D].北京：中國中醫科學院，2022.

[3]劉嘉欣，周天羽.《臨證指南醫案》痢疾辨治特色探析[J].中醫臨床研究，2022，14（32）：21-24.

[4]錢恒.蛋鴨流行性腹瀉的原因及中藥治療分析[J].家禽科學，2023，45（10）：67-68.

[5]劉月月，殷斌，解云輝，等.禽用中獸藥的研究與應用現狀[J].家禽科學，2020（11）：53-58.

[6]肖軍，李進衛.中草藥微生物飼料添加劑在家禽中的作用及其應用策略[J].家禽科學，2019（7）：51-56.

[7]趙增成，殷斌，劉月月，等.雞濕熱泄瀉病證模型的建立[J].中獸醫醫藥雜志，2024，43（3）：10-14.

[8]李勝，馮志海.《傷寒論》“熱利三證”淺談[J].新中醫，2018，50（12）：273-274.

[9]王倩.基于《傷寒論》熱利三方醫案文獻的中藥處方用量研究[D].北京：北京中醫藥大學，2015.

[10]陳代奕，郭迪.葛根芩連湯證、白頭翁湯證、黃連阿膠湯證、駐車丸證異同[J].河南中醫，2023，43（06）：811-815.

[11]沈元良.蒿芩清膽湯方證釋義與臨證心悟[J].中華中醫藥雜志，2015，30（10）：3562-3566.