不同施肥處理對連翹果實生長及藥用成分含量的影響

摘要：試驗以陜西省柞水縣連翹種植基地的6 a生連翹植株為試材，設(shè)置對照、有機(jī)肥、葉面肥以及3種不同濃度復(fù)合肥（50 g/株、100 g/株、150 g/株） 共6個處理，于果實成熟期采集樣品進(jìn)行測試分析。結(jié)果表明：施肥后連翹果實部分生長指標(biāo)普遍高于未施肥對照組，但各施肥組間差異不明顯；施肥處理后除復(fù)合肥（150 g/株，F(xiàn)3）組外，其他組中連翹果實的黃酮類含量均略微下降；施肥處理后連翹果實中的苯乙醇苷類、木脂素類及綠原酸含量普遍高于對照組，且葉面肥（YM）組處理下的苯乙醇苷類和木脂素類含量均為最高、增長效果最顯著。綜上所述，連翹果實發(fā)育前期噴施葉面肥有助于提高藥用成分含量，進(jìn)而提高藥材質(zhì)量。

關(guān)鍵詞：連翹；施肥；有效成分含量；藥材質(zhì)量

中圖分類號：S365"文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A"文章編號：0488-5368（2025）02-0017-06

Effects of Different Fertilization Treatments on Growth and "Content of Medicinal Components in Fruits of Forsythia suspensa

PENG Yidan+1，GUO Jiayu+1，KUANG Fangfang+1， LI Bo+2，SUN Jing+1，CHEN Ying+1，ZHANG Yuqu+1，YANG Xinjie+1

（1. Shaanxi Engineering Research Center for Application and Development of Chinese Medicine in Qinling Mountains， Key Laboratory of

\"Qin Medicine\" Research and Development， Shaanxi University of Chinese Medicine， Xianyang， Shaanxi 712046， China; 2. Shaanxi "Collaborative

Innovation Center of Chinese Medicinal Resources Industrialization， Shaanxi University of Chinese Medicine， Xianyang， Shaanxi 712083，China）

Abstract： "This "study explores the effects of different fertilization treatments on the growth and content of medicinal components in fruits of "Forsythia suspensa， aiming to provide a reference for the scientific cultivation and fertilization management of Forsythia suspensa. Six-year-old Forsythia plants grown in Zhashui County， Shaanxi Province， were used as the experimental material. Six treatments were set up： a control （no fertilization）， organic fertilizer， foliar fertilizer， and three different concentrations of compound fertilizer （50 g/plant， 100 g/plant， 150 g/plant）. Samples were collected during the fruit maturation period for testing and analysis. After fertilization， the growth indicators of Forsythia fruits were generally improved compared to the control group， although the differences among fertilization treatments were not statistically significant. Fertilization treatments generally increased the contents of phenylethanoid glycosides， lignans， and chlorogenic acid in the fruits， with the highest increases in phenylethanoid glycosides and lignans observed in the foliar fertilizer（YM） group. However， flavonoid content decreased slightly in most fertilization groups， except for the high-concentration compound fertilizer treatment （150 g/plant， F3）. The results indicated that spraying foliar fertilizer during the early developmental stage of Forsythia fruit promotes the accumulation of medicinal components， thereby improving medicinal quality. These findings provide valuable insights for the scientific cultivation and fertilization management of Forsythia suspensa.

Key words：Forsythia suspensa; Fertilization; Contents of active ingredients; Medicinal materials quality

中藥連翹為木犀科植物連翹（Forsythia suspensa（Thunb.）Vahl）的干燥果實[1]，多見栽培于中國山西、河南、陜西等地。其藥理作用主要表現(xiàn)為抗菌、抗腫瘤、抗炎、保肝、抗氧化等活性[2]。連翹為臨床常用的大宗藥材，市場需求量較大，青翹每年用量約6 000～7 500 t，老翹每年用量約1 500～2 000 t[3]。然而連翹野生資源存在提前采摘現(xiàn)象而不能滿足入藥要求，故優(yōu)質(zhì)連翹藥材需人工種植。

連翹種植過程中密度、水分、施肥等因素均可影響其果實的品質(zhì)，其中肥料作為連翹植物生長養(yǎng)分主要來源之一，對果實的質(zhì)量有著較大影響。目前已有研究報道施肥對中藥材的品質(zhì)與產(chǎn)量有著顯著影響，

如貫葉連翹[4]、三七[5]、七葉一枝花等[6]。張曉虎[7]研究認(rèn)為，施用連翹肥料時采取氮磷鉀的配合施用方法可促進(jìn)連翹生長和提高產(chǎn)量；宋麗華[8]研究得到，氮磷鉀配比為1.5∶1.5∶1時施肥對促進(jìn)寧夏大學(xué)土壤條件下的連翹生長效果最佳；郭曉霄等[9]研究得出施肥處理對改善連翹苗木生理特性效果最優(yōu)。關(guān)于連翹施肥的研究主要以產(chǎn)量和生理特性為主，而對于常用的有機(jī)肥料類型沒有進(jìn)行過針對性研究。因此，該研究選擇在實際生產(chǎn)中常用的幾種肥料，通過與不施肥對比，研究其對連翹果實品質(zhì)的影響，從而揭示連翹果實的施肥需求規(guī)律，并為實現(xiàn)連翹藥材的科學(xué)施肥和高品質(zhì)栽培技術(shù)提供參考。

1材料與方法

1.1試驗儀器

高效液相色譜儀（華譜科儀（北京）科技有限公司S3000）。

1.2試材及試驗地概況

有機(jī)肥（河北德沃多生物科技有限公司，有機(jī)質(zhì)含量≥25%）、葉面肥（河北德沃多生物科技有限公司，KH-2PO-4含量≥99%）、復(fù)合肥（湖北三寧化工股份有限公司，氮、磷、鉀總養(yǎng)分≥45%）；甲醇、磷酸均為色譜級，娃哈哈純凈水；連翹酯苷E（純度99.69%）、綠原酸（純度99.82%）、連翹酯苷I（純度98.26%）、松脂醇-β-D-葡萄糖苷（純度98.78%）、蘆丁（純度99.04%）、連翹苷（純度99.09%）、槲皮素（純度98.85%）、連翹脂素（純度98.17%）購自昆明垚登商貿(mào)有限公司，連翹酯苷A（純度98.08%）購自上海源葉生物科技有限公司。

試驗地位于陜西省商洛市柞水縣連翹種植基地（33°68′N，109°10′E）。基地年平均氣溫18.2 ℃，年平均降水量692 m，土壤為扁白泡土，pH值6.5～6.8，有機(jī)質(zhì)含量1.38%，全氮0.097%，堿解氮69 mg/kg，速效鉀137 mg/kg。連翹植株經(jīng)陜西中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院中藥鑒定教研室顏永剛教授鑒定為木犀科植物連翹（Forsythia suspensa （Thunb.） Vahl）。

1.3施肥設(shè)置

試驗共設(shè)計5個施肥處理組和1個空白對照組（CK），每個處理組平行設(shè)置3個重復(fù)，每組30株連翹樹，于2023年6月初連翹發(fā)育的幼果期施肥。有機(jī)肥組施肥標(biāo)準(zhǔn)為1 kg/株（記為YJ），葉面肥組施肥標(biāo)準(zhǔn)為0.5 L/株（濃度1 g/L，記為YM），復(fù)合肥組設(shè)置3個濃度進(jìn)行施肥，施肥濃度分別為復(fù)合肥1（50 g/株，記為F1）、復(fù)合肥2（100 g/株，記為F2）和復(fù)合肥3（150 g/株，記為F3）。施肥完成后于2023年8月中旬收集各處理組青翹果實樣品，所有樣品均隔水蒸15 min作殺青處理。

1.4項目測定

1.4.1生長指標(biāo)測定于每個處理組隨機(jī)選取50個果實，除去雜質(zhì)后用游標(biāo)卡尺（精度0.02 mm）和電子天平（精度0.01g）測量表型性狀，包括果實長度、直徑、單果鮮重和干重。

1.4.2主要藥用成分含量測定

（1）樣品制備：取粉碎過篩的樣品粉末0.5 g，置50 mL錐形瓶中，精密稱定（精度0.000 1g），隨后加入10 mL的90%甲醇溶液，稱定重量。超聲提取25 min（500 W，40 kHz），待靜置至室溫后，補足失重。留上清液，通過0.22 mm微孔濾膜過濾，以備后續(xù)測定。

（2）制備對照品溶液：精密稱取適量的連翹酯苷E、綠原酸、連翹酯苷I、松脂醇-β-D-葡萄糖苷、連翹酯苷A、蘆丁、連翹苷、槲皮素及連翹脂素對照品，分別置于5 mL棕色容量瓶中，甲醇定容至刻度。于上述容量瓶中各自吸取對照品溶液制成含連翹酯苷E、綠原酸、連翹酯苷I、松脂醇-β-D-葡萄糖苷、連翹酯苷A、蘆丁、連翹苷、槲皮素、連翹脂素各0.20 mg/mL、0.06 mg/mL、0.04 mg/mL、0.048 mg/mL、0.16 mg/mL、0.06 mg/mL、0.08 mg/mL、0.06 mg/mL、0.10 mg/mL的混合對照品儲備液，4 ℃保存，用前過0.22 μm微孔濾膜。

（3）色譜條件：流動相為甲醇（A）-1%磷酸水（B）；流速0.8 mL/min；檢測波長229 nm；柱溫25 ℃；進(jìn)樣量10 μL；梯度洗脫（0～8 min，7%～28%A；8～13 min，28%～35%A；13～23 min，35%～38%A；23～38 min，38%～48%A；38～53 min，48%～52%A；53～57 min，52%～45%A；57～62 min，45%～10%A）。在此條件下9種對照品色譜圖見圖1以及供試品的色譜圖見圖2。

（4）方法學(xué)考察：

于1.4.2項中取混合對照溶液，并按照相同的樣品測定色譜條件。分別進(jìn)樣2 μL、5 μL、10 μL、15 μL、20 μL，并記錄峰面積值。將峰面積作為縱坐標(biāo)（y）、質(zhì)量作為橫坐標(biāo)（x）進(jìn)行線性回歸。得到回歸方程，見表1。

精密度實驗：取1.4.2項下混合對照溶液，照樣品相同測定色譜條件，重復(fù)進(jìn)樣6次，得到連翹酯苷E、綠原酸、連翹酯苷I、松脂醇-β-D-葡萄糖苷、連翹酯苷A、蘆丁、連翹苷、槲皮素及連翹脂素峰面積的RSD值分別為1.89％、1.73％、0.89％、0.94％、0.73％、0.55％、0.86％、1.21％和1.55％，表明試驗所用儀器精密度良好。

穩(wěn)定性試驗：制備供試品溶液后，于第0 h、2 h、4 h、8 h、12 h、24 h分別進(jìn)樣，得到連翹酯苷E、綠原酸、連翹酯苷I、松脂醇-β-D-葡萄糖苷、連翹酯苷A、蘆丁、連翹苷、槲皮素及連翹脂素峰面積的RSD值分別為1.51％、1.31％、1.23％、1.01％、1.34％、1.30％、0.86％、1.54％和1.24％，表明供試品溶液24 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

重復(fù)性實驗：精密稱定同一樣品6份，制備成供試品溶液，分別進(jìn)樣，得到連翹酯苷E、綠原酸、連翹酯苷I、松脂醇-β-D-葡萄糖苷、連翹酯苷A、蘆丁、連翹苷、槲皮素及連翹脂素峰面積的RSD值分別為0.97％、1.71％、1.05％、1.86％、1.55％、1.43％、0.94％、1.96％和1.43％，均在規(guī)定范圍內(nèi)。

加樣回收率試驗：取已知含量的連翹樣品，稱定6份，每份精密加入連翹酯苷E 0.07 mg、綠原酸0.01 mg、連翹酯苷I 2.57 mg、松脂醇-β-D-葡萄糖苷0.08 mg、連翹酯苷A 3.04 mg、 蘆丁0.07 mg、連翹苷0.42 mg、槲皮素0.90 mg及連翹脂素0.16 mg，進(jìn)樣測定。9個成分的平均回收率見表2，RSD值在規(guī)定范圍內(nèi)。

（5）數(shù)據(jù)分析：單因素方差分析采用 SPSS 26.0 軟件進(jìn)行。

2結(jié)果分析

2.1不同施肥處理對果實外觀性狀的影響

連翹不同施肥處理對果實外觀性狀影響的試驗結(jié)果見表3。結(jié)果表明，施肥后連翹果實部分生長指標(biāo)普遍高于未施肥對照組，但各施肥組間的差異性不明顯。

2.2不同施肥處理對有效成分含量的影響

2.2.1不同施肥處理對 9 種化學(xué)成分含量的影響不同施肥處理對 9 種化學(xué)成分含量的影響結(jié)果見表4。據(jù)2020版藥典規(guī)定，各施肥組中的連翹苷（不得少于0.15%）和連翹酯苷A（不得少于3.50%）的含量均達(dá)到藥典標(biāo)準(zhǔn)。與空白組相比，YM處理下的連翹酯苷A、連翹酯苷E和綠原酸含量最高；同時YM處理下的槲皮素、連翹脂素在各處理組中含量最高但略低于空白組；YJ處理下的連翹酯苷A含量最低；F1處理下連翹苷含量最高，其次是YJ、YM，F(xiàn)2處理下連翹苷含量最低。

2.2.2不同施肥處理對黃酮類化合物含量的影響由圖3可知，施肥處理后連翹果實中的黃酮類化合物含量除F3外均略低于于對照，表現(xiàn)為F3gt;CKgt;YMgt;YJgt;F1gt;F2。F3處理下連翹果實的黃酮類化合物含量最高，為0.32％。

2.2.3不同施肥處理對木脂素類化合物含量的影響由圖4可知，施肥處理后連翹果實中的木脂素類化合物含量普遍高于對照，表現(xiàn)為YMgt;F1gt;F3gt;YJgt;F2gt;CK，YM和F1處理下連翹果實的木脂素類化合物含量最高，分別為3.84％和3.77％。

2.2.4不同施肥處理對苯乙醇苷類化合物含量的影響由圖5可知，施肥處理后連翹果實中的苯乙醇苷類化合物含量均顯著高于對照，表現(xiàn)為YMgt;F2gt;F1gt;F3gt;YJgt;CK。YM處理下連翹果實的苯乙醇苷類化合物含量最高為13.56％，其次為F2處理，含量為13.12％。

2.2.5不同施肥處理對綠原酸含量的影響由圖6可知，施肥處理后連翹果實中的綠原酸含量均略高于對照，表現(xiàn)為F3gt;YMgt;F1gt;YJgt;F2gt;CK。F3處理下連翹果實的綠原酸含量最高，為0.06％。

3討論

連翹作為一味大宗藥材，2020版藥典規(guī)定評價其藥材品質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)為連翹苷和連翹酯苷A[1]。連翹苷和連翹酯苷A分屬于木脂素類和苯乙醇苷類化合物，該研究得到施肥對連翹果實中木脂素類和苯乙醇苷類含量均有一定的正向影響，其中葉面肥對二者含量的促進(jìn)作用最為顯著。表明葉面肥有助于連翹果實提高藥用成分含量，與張迪等[10]研究葉面肥影響北柴胡品質(zhì)及產(chǎn)量的結(jié)果一致。不同濃度的復(fù)合肥在影響各類化合物含量方面效果略差于葉面肥且存在差異，但對于黃酮類化合物和綠原酸含量，趨勢均表現(xiàn)為F3gt;F1gt;F2，這可能與二者本身含量不高導(dǎo)致復(fù)合肥施用濃度對其影響不大。根據(jù)已有研究，復(fù)合肥可有效促進(jìn)巴西人參幼苗的生長和發(fā)育[11]。因此，在中藥材生長過程中，可以考慮施用復(fù)合肥來改善中藥材的產(chǎn)量和品質(zhì)。

隨著施肥技術(shù)研究的深入，研究人員發(fā)現(xiàn)根部肥料施用難以滿足植物在生長過程中對營養(yǎng)素的需求，特別是某些微量元素的需求，而葉面施肥的引入有效的解決了這一問題[12]。葉面肥的施用方式為人工噴施，相當(dāng)于一種作用于連翹果實表面的外源物質(zhì)，已有研究表明在連翹葉片上噴施一定濃度的外源物質(zhì)（MeJA）可明顯促進(jìn)連翹葉次生代謝產(chǎn)物的積累[13]。該研究中葉面肥的主要成分磷酸二氫鉀是一種高效復(fù)合肥，具有含量高、水溶性強(qiáng)、吸收率高、見效快等優(yōu)點，在果樹上應(yīng)用廣泛[14]。噴施磷酸二氫鉀調(diào)控植株生長和產(chǎn)量已有研究，如甘薯[15]、水稻[16]和南方紅豆杉[17]等。因此，在連翹幼果期施加磷酸二氫鉀以提高連翹藥材質(zhì)量是可行的。此外，后續(xù)在連翹施肥的研究中可針對磷酸二氫鉀的最佳施用濃度和施用時間來展開。

科學(xué)而適當(dāng)?shù)氖┓适侵参锱嘤兄陵P(guān)重要的管理實踐之一，它能夠有效地促進(jìn)植物的生長發(fā)育，確保豐收并提升水肥利用效率。目前有關(guān)提高連翹藥材質(zhì)量的研究多以N、P、K配比施肥為主[7，18]，而較少探究不同有機(jī)肥料對于連翹果實中藥用成分的影響。故該研究選擇3種有機(jī)肥料及3種濃度的復(fù)合肥探討不同施肥對連翹藥材質(zhì)量的影響，填補了道地產(chǎn)區(qū)不同類型有機(jī)肥料對連翹種植研究的短缺，同時為陜西省秦嶺一帶連翹的種植施肥提供依據(jù)。連翹人工種植研究可進(jìn)一步考慮從果實發(fā)育初期施加磷酸二氫鉀試驗入手，該研究可為連翹藥材的生態(tài)設(shè)計、人工培育以及種源改良等提供參考。

4結(jié)論

施肥處理后，連翹果實的平均長度、直徑、鮮重及干重均較對照有一定提高，但各施肥組之間差異不明顯。同時，與對照（不施肥）相比，施肥能顯著增加連翹果實藥用成分含量，且不同施肥組之間差異較大。其中，施用葉面肥對于增加連翹果實有效成分含量的效果最為明顯，復(fù)合肥和有機(jī)肥效果次之。因此，于連翹果實發(fā)育前期施肥能明顯促進(jìn)其有效成分含量的提高，使其高質(zhì)高產(chǎn)，且采用葉面肥效果更佳。

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收稿日期：2024-05-29修回日期：2024-07-09

基金項目：國家重點研發(fā)計劃（2019YFC1712605、2021YFD1601004）；陜西省中醫(yī)藥管理局專項（2021-QYZL-02）；中醫(yī)藥創(chuàng)新能力提升和資源保護(hù)利用揭榜掛帥項目（17301022301）;西安市科技計劃項目：中藥生產(chǎn)過程關(guān)鍵技術(shù)研究（23CXLHTJSGG0004-2023）。第一作者簡介：彭毅丹（2000-），女，碩士研究生，研究方向為中藥資源開發(fā)與利用。通信作者：楊新杰。