15種農(nóng)藥對(duì)桃小食心蟲卵和初孵幼蟲的毒力測(cè)定

摘要 桃小食心蟲Car posina sasakii是我國(guó)北方落葉果樹(shù)第一大害蟲，以幼蟲蛀果為害，田間主要防治卵和初孵幼蟲，篩選對(duì)其具有高活性且對(duì)環(huán)境安全的藥劑具有重要意義。本研究通過(guò)浸卵和浸果法分別測(cè)定了15種殺蟲劑對(duì)桃小食心蟲1～2日齡、5～6日齡卵及初孵幼蟲的毒力。結(jié)果表明，蟲螨腈、殺鈴脲、多殺霉素、毒死蜱、滅幼脲和乙基多殺菌素對(duì)1～2日齡卵活性較高，LCso在3.41～9.13mg／L之間。多殺霉素和乙基多殺菌素對(duì)桃小食心蟲5～6日齡卵具有較高活性，LC₅₀分別為2.17mg／L和8.23mg／L，顯著低于其他藥劑；高效氯氰菊酯和多殺霉素對(duì)初孵幼蟲毒力最高，LC₅₀為1.89 mg／L和1.92mg／L，其次是高效氯氟氰菊酯、毒死蜱、乙基多殺菌素、甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽、氯蟲苯甲酰胺、呋蟲胺、蟲螨腈和四唑蟲酰胺，LC₅₀在4.00～9.58mg／L之間。多殺霉素和乙基多殺菌素對(duì)桃小食心蟲卵和初孵幼蟲兼具較高活性，該2種藥劑在未來(lái)防治桃小食心蟲上具有很大的發(fā)展?jié)摿Α?/p>

關(guān)鍵詞桃小食心蟲；浸卵法；浸果法；毒力測(cè)定；LC₅₀

中圖分類號(hào)：S 436.621.29；S 481.1 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B DOI：10.16688/j.zwbh.2024151

桃小食心蟲Carposina sasakii屬鱗翅目Lepidop-tera蛀果蛾科Carposinidae，又名桃蛀果蛾，簡(jiǎn)稱“桃小”，是我國(guó)北方落葉果樹(shù)生產(chǎn)中為害最重、發(fā)生面積最廣的食心蟲類害蟲之一。桃小食心蟲寄主范圍廣，為害蘋果Malus pumila、梨Pyrus spp.、桃Prunus perszca、杏Prunus armeniaca、山楂Crataegus pinnat-ifida等20多種果樹(shù)。成蟲交配后產(chǎn)卵于果實(shí)、莖葉表面，初孵幼蟲孵化后立即蛀入果內(nèi)，并在果實(shí)內(nèi)部發(fā)育直到老熟，使得藥劑在幼蟲發(fā)育階段難以發(fā)揮作用，所以桃小食心蟲防治措施主要集中在初孵幼蟲蛀果前和老熟幼蟲脫果后。雖然防治脫果后的老熟幼蟲可以有效降低下一代的種群數(shù)量，但其幼蟲在果內(nèi)蛀食后已經(jīng)造成了無(wú)法挽回的經(jīng)濟(jì)損失。因此初孵幼蟲蛀果前是防治此類害蟲的最佳時(shí)期。

目前對(duì)桃小食心蟲防治主要以物理防治和化學(xué)防治為主。物理防治方面，果實(shí)套袋是果園防治桃小食心蟲最常用的方法。但隨著我國(guó)人口老齡化嚴(yán)重，勞動(dòng)力成本提高，無(wú)袋栽培模式將是果樹(shù)生產(chǎn)的必然趨勢(shì)。因此，化學(xué)防治是控制桃小食心蟲最行之有效的方法。我國(guó)登記用于防治桃小食心蟲的藥劑以擬除蟲菊酯類、有機(jī)磷類及兩類藥劑的復(fù)配劑為主。基于對(duì)果品安全的需求，多數(shù)有機(jī)磷類殺蟲劑因毒性高、殘留量大等原因，現(xiàn)逐漸被禁用而退出市場(chǎng)。擬除蟲菊酯類殺蟲劑成為目前防治桃小食心蟲常用藥劑，而該類藥劑廣譜性強(qiáng)對(duì)非靶標(biāo)生物安全系數(shù)低，所以篩選高效、安全的藥劑是桃小食心蟲防治中面臨的關(guān)鍵問(wèn)題之一。根據(jù)本實(shí)驗(yàn)室前期研究結(jié)果，發(fā)現(xiàn)在23種殺蟲劑中多殺菌素類殺蟲劑在高濃度和低濃度處理下對(duì)桃小食心蟲卵的抑制效果明顯，且能降低初孵幼蟲的蛀果率。多殺菌素類殺蟲劑來(lái)源于刺糖多孢菌Saccharopolyspora spznosa發(fā)酵產(chǎn)生的次生代謝產(chǎn)物，室內(nèi)毒力測(cè)定發(fā)現(xiàn)其對(duì)包括鱗翅目害蟲在內(nèi)的多種農(nóng)業(yè)害蟲有較高活性，且對(duì)天敵安全，是一類高效低毒安全的生物源農(nóng)藥。上市的兩種多殺菌素類殺蟲劑多殺霉素和乙基多殺菌素對(duì)蘋果蠹蛾Cydia pormonella、梨小食心蟲Grapholita molesta、草地貪夜蛾Spodopt-era frugiperda等害蟲有較高活性，而對(duì)桃小食心蟲活性目前尚未報(bào)道。根據(jù)我國(guó)登記用于桃小食心蟲的防治藥劑、果園常用殺蟲劑及本團(tuán)隊(duì)前期研究結(jié)果，結(jié)合桃小食心蟲的為害特性，本研究測(cè)定了15種殺蟲劑對(duì)桃小食心蟲低日齡卵、高日齡卵和初孵幼蟲的毒力，以明確其對(duì)桃小食心蟲的活性，為桃小食心蟲田間化學(xué)防治提供理論支持。

1材料與方法

1.1供試蟲源

桃小食心蟲種群于2013年6月采自遼寧省興城市（120°44′E，40°37′N），在室內(nèi)用未接觸任何殺蟲劑的未成熟蘋果飼養(yǎng)，飼養(yǎng)條件為溫度（25±1）℃、相對(duì)濕度（70±5）%、光周期L∥D=15 h∥9h，并于每年6月-7月定期從田間采集試蟲與室內(nèi)種群雜交進(jìn)行復(fù)壯，至本研究開(kāi)展之際已連續(xù)飼養(yǎng)80余代。

1.2供試原藥

根據(jù)前期研究選用對(duì)桃小食心蟲卵或初孵幼蟲具有較高活性的15種殺蟲劑（表1）。

1.3毒力測(cè)定方法

1.3.1藥劑配制

原藥用N，N-二甲基甲酰胺（DMF）為溶劑溶解，配制成10000 mg／L母液，再用含有0.1%Triton X-100蒸餾水稀釋，按等比或等差法配制成5～7個(gè)系列濃度。

1.3.2桃小食心蟲卵毒力測(cè)定

采用浸漬法，取附有不低于30粒1～2日齡卵和5～6日齡卵的桃小食心蟲卵卡，并將卵卡浸入到1.3.1配制好的藥液中10s后取出，自然晾干，每處理4次重復(fù)。以含有相應(yīng)有機(jī)溶劑的0.1%Triton X-100水溶液處理作為對(duì)照。試驗(yàn)于（25±1）℃，（70±10）%RH、光周期L∥D=15 h∥9h下進(jìn)行。根據(jù)桃小食心蟲卵的發(fā)育歷期，1～2日齡卵于處理后7d觀察孵化情況，5～6日齡卵于處理后2d觀察孵化情況。

1.3.3桃小食心蟲初孵幼蟲毒力測(cè)定

通過(guò)改進(jìn)浸漬法試驗(yàn)步驟，使用浸果法測(cè)定藥劑對(duì)初孵幼蟲毒力。將清水洗干凈的未成熟新鮮蘋果（直徑5～6cm）經(jīng)晾干后浸入藥劑10s，而后自然風(fēng)干，將即將孵化的桃小食心蟲卵卡接到已晾干的蘋果表面，每重復(fù)卵不少于30粒。之后于（25±1）℃，（70±10）% RH、光周期L∥D=15h∥9h條件下培養(yǎng)，每處理4個(gè)重復(fù)，以含相應(yīng)有機(jī)溶劑的0.1% Triton X-100水溶液處理作為對(duì)照。根據(jù)桃小食心蟲初孵幼蟲蛀果習(xí)性，于處理后48 h在體視顯微鏡下調(diào)查并計(jì)數(shù)，初孵幼蟲未蛀入果內(nèi)且用毛筆刺激后無(wú)反應(yīng)則視為死亡。

1.4數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

計(jì)算死亡率和校正死亡率，使用DPS生物統(tǒng)計(jì)軟件計(jì)算毒力回歸曲線和LC₅₀，使用SPSS軟件進(jìn)行卡方檢驗(yàn)。

對(duì)照死亡率≤5%時(shí)，無(wú)需校正；對(duì)照死亡率在5%～20%之間時(shí)按如下公式校正；對(duì)照死亡率gt;20%時(shí)，試驗(yàn)需重做。

2結(jié)果與分析

2.1 15種殺蟲劑對(duì)桃小食心蟲卵的毒力

15種殺蟲劑對(duì)桃小食心蟲1～2日齡卵的毒力顯示，11種殺蟲劑的LC₅₀低于25.00 mg／L（表3），其中蟲螨腈、殺鈴脲、多殺霉素、毒死蜱、滅幼脲和乙基多殺菌素對(duì)桃小食心蟲1～2日齡卵活性較高，LC₅₀分別為3.41、4.50、4.92、6.24、6.37mg／L和9.13 mg／L。其次是高效氯氰菊酯、噻蟲胺、氟酰脲、高效氯氟氰菊酯和阿維菌素，LC₅₀在11. 80～21.14 mg／L之間。呋蟲胺、氯蟲苯甲酰胺、甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽和四唑蟲酰胺對(duì)桃小食心蟲1～2日齡卵活性低，在最高濃度200 mg／L處理下，卵的相對(duì)死亡率分別為42.26%、41.94%、30.57%和27.30%。

15種藥劑處理對(duì)桃小食心蟲5～6日齡卵毒力結(jié)果與1～2日齡卵的結(jié)果相似，如表4所示。與1～2日齡卵相比，多殺霉素和乙基多殺菌素對(duì)桃小食心蟲5～6日齡卵依然保持較高活性，LC₅₀分別為2.17mg／L和8.23 mg／L。毒死蜱、蟲螨腈、噻蟲胺、殺鈴脲、阿維菌素、滅幼脲、高效氯氰菊酯、高效氯氟氰菊酯和氟酰脲等對(duì)5～6日齡卵毒力均低于對(duì)1～2日齡卵的毒力，LC₅₀在10.82～54.75mg／L之間。而200 mg／L的呋蟲胺、氯蟲苯甲酰胺、甲氨基阿維菌素和四唑蟲酰胺處理后，桃小食心蟲5～6日齡卵的相對(duì)死亡率分別為44.97%、21.26%、27.88%和28.31%。

2.2 15種藥劑對(duì)桃小食心蟲初孵幼蟲的毒力

15種藥劑對(duì)桃小食心蟲初孵幼蟲的毒力測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表5，其中高效氯氰菊酯和多殺霉素毒力最高，LC₅₀分別為1.89 mg／L和1.92 mg／L，兩者之間無(wú)顯著差異。其次是高效氯氟氰菊酯、毒死蜱、乙基多殺菌素、甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽、氯蟲苯甲酰胺、呋蟲胺、蟲螨腈、四唑蟲酰胺、阿維菌素和噻蟲胺，對(duì)桃小食心蟲初孵幼蟲的LC₅₀范圍為4.00～24.39mg／L。氟酰脲、殺鈴脲和滅幼脲對(duì)桃小食心蟲初孵幼蟲活性最低，在最高濃度100mg／L處理下初孵幼蟲死亡率分別為3.57%、4.54%和5.72%，與對(duì)照5.29%無(wú)差異，在表5中未列出。

3結(jié)論與討論

桃小食心蟲的防治以初孵幼蟲為主，目前田間防治常用藥劑主要是擬除蟲菊酯類和有機(jī)磷類。而桃小食心蟲初孵幼蟲自孵化至蛀入果實(shí)只需要數(shù)分鐘至2h，而后在果實(shí)內(nèi)部發(fā)育至老熟，使得幼蟲發(fā)育階段難以接觸藥劑，導(dǎo)致防治困難。桃小食心蟲卵期5～7d，接觸藥劑時(shí)間長(zhǎng)，是防治桃小食心蟲為害的關(guān)鍵時(shí)期。

本研究發(fā)現(xiàn)多殺霉素與乙基多殺菌素對(duì)桃小食心蟲低日齡和高日齡卵均具有較高毒力，而其他藥劑的毒力隨著卵齡增大均呈下降趨勢(shì)。林玉英等采用浸卵法測(cè)定了15種殺蟲劑對(duì)草地貪夜蛾卵的生物活性，結(jié)果表明多殺霉素相對(duì)活性較高；Ahmad等和Khani等研究發(fā)現(xiàn)多殺霉素對(duì)番茄潛葉蛾Tuta absoluta卵和幼蟲毒力比氯氰菊酯、茚蟲威和吡蟲啉更高，與本研究多殺霉素對(duì)桃小食心蟲卵和初孵幼蟲的結(jié)果相似。此外，本研究發(fā)現(xiàn)相比于低日齡卵，多殺菌素類兩種殺蟲劑對(duì)高日齡卵的活性更高，尤其多殺霉素，活性顯著增強(qiáng)，推測(cè)原因有二。第一，與多殺霉素作用靶標(biāo)nAChRs在胚胎發(fā)育過(guò)程中的表達(dá)相關(guān)，有研究發(fā)現(xiàn)煙堿型乙酰膽堿受體主要在昆蟲的神經(jīng)系統(tǒng)表達(dá)，而昆蟲前期的發(fā)育主要以細(xì)胞增殖為主，頭部和神經(jīng)系統(tǒng)分化發(fā)生較晚；第二，與多殺菌素類殺蟲劑本身結(jié)構(gòu)相關(guān)，多殺霉素屬于大環(huán)內(nèi)酯類殺蟲劑，非極性較強(qiáng)具有強(qiáng)脂溶性，有報(bào)道稱藥劑殺卵活性與其脂溶性和蠟溶性相關(guān)，親脂性越強(qiáng)殺卵活性越強(qiáng)。本研究測(cè)定蟲螨腈對(duì)桃小食心蟲1～2日齡卵LC₅₀為3.41mg/L，與多殺霉素?zé)o顯著差異。Darabian等研究發(fā)現(xiàn)蟲螨腈對(duì)甜菜夜蛾Spodoptera exigua卵和幼蟲有一定的作用，與本試驗(yàn)結(jié)果一致。另外蟲螨腈親脂性高，推測(cè)其到達(dá)卵內(nèi)作用靶標(biāo)的方式與多殺霉素類似，但農(nóng)藥在桃小食心蟲卵殼的滲透作用機(jī)制尚未明確，還需進(jìn)一步驗(yàn)證。氟酰脲、殺鈴脲和滅幼脲都屬于苯甲酰脲類殺蟲劑，通過(guò)干擾昆蟲幾丁質(zhì)生物合成從而達(dá)到殺蟲的目的，在本研究中，苯甲酰脲類殺蟲劑對(duì)桃小食心蟲卵毒力較高，與Yao等結(jié)果一致。另外，多數(shù)殺蟲劑對(duì)害蟲高日齡卵活性明顯弱于低日齡卵在其他殺蟲劑研究中也已被證明。

高效氯氟氰菊酯和高效氯氰菊酯是用于果園防治桃小食心蟲的常用藥劑，其對(duì)桃小食心蟲活性高，且有大量的復(fù)配劑型已登記用于該蟲防治，這足以體現(xiàn)這類藥劑在桃小食心蟲田間防治過(guò)程中的地位。本試驗(yàn)結(jié)果表明多殺霉素與高效氯氰菊酯對(duì)桃小食心蟲初孵幼蟲的LC₅₀無(wú)顯著差異。多殺霉素對(duì)其他鱗翅目幼蟲的較高活性已有報(bào)道，如甘藍(lán)夜蛾Mamestra brassicae、草地貪夜蛾和蘋果蠹蛾等。乙基多殺菌素是在多殺霉素化學(xué)結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)上，由鼠李糖基3-位甲醚基轉(zhuǎn)變?yōu)橐颐鸦玫剑鋵?duì)斜紋夜蛾Spodoptera litura、小菜蛾P(guān)lutella xylostella、番茄潛葉蛾和蘋果蠹蛾等害蟲具有較高活性。本研究發(fā)現(xiàn)多殺霉素對(duì)桃小食心蟲初孵幼蟲活性高于乙基多殺菌素，可能與二者結(jié)構(gòu)差異密切相關(guān)。氯蟲苯甲酰胺和四唑蟲酰胺是近年來(lái)在桃小食心蟲防治中應(yīng)用的新型殺蟲劑，有研究表明該類藥劑對(duì)桃小食心蟲有較高的殺初孵幼蟲活性，但其殺卵活性較低。董永龍等研究不同藥劑對(duì)荔枝蒂蛀蟲Conopomorphasinensis各蟲態(tài)的毒力，發(fā)現(xiàn)氯蟲苯甲酰胺對(duì)初孵幼蟲和卵的毒力都要高于高效氯氟氰菊酯，與本研究的結(jié)果略有不同，推測(cè)造成此現(xiàn)象的原因可能是與試蟲的生物學(xué)特性差異有關(guān)。Hassani等的研究表明，呋蟲胺對(duì)水稻田二化螟Chilo suppressalis的防治效果較好，與本研究結(jié)果呋蟲胺對(duì)桃小食心蟲初孵幼蟲活性較高一致。苯甲酰脲類殺蟲劑的作用方式以胃毒為主，觸殺和內(nèi)吸作用小，桃小食心蟲初孵幼蟲孵化后立即咬破果皮取食果肉隨后直達(dá)果心，附著于蘋果表面的藥劑不能到達(dá)幼蟲體內(nèi)發(fā)揮藥效。故本研究中氟酰脲、殺鈴脲和滅幼脲3種藥劑對(duì)桃小食心蟲初孵幼蟲毒力較低。

綜上所述，多殺霉素和乙基多殺菌素對(duì)桃小食心蟲低日齡和高日齡卵的活性相對(duì)較穩(wěn)定，兼具殺初孵幼蟲活性，且該兩種農(nóng)藥都源自菌體發(fā)酵物，對(duì)環(huán)境友好，將在桃小食心蟲防治中具有較大的應(yīng)用前景。本研究?jī)H分析了藥劑對(duì)桃小食心蟲卵和初孵幼蟲的室內(nèi)毒力，為更好地指導(dǎo)生產(chǎn)，明確不同因素對(duì)桃小食心蟲的防治效果，需開(kāi)展更多研究。