IFN-γ、IL-2聯合檢測對老年發熱患者結核病診斷的價值

【摘要】 目的：探索結核特異性細胞因子γ干擾素（IFN-γ）、白細胞介素-2（IL-2）聯合檢測在老年發熱患者結核病診斷中的價值。方法：回顧性分析2022年1月—2024年3月于安徽醫科大學附屬阜陽人民醫院感染科就診的≥60歲因反復發熱住院患者127例。所有患者在進行相關檢查后不排除結核感染，并進行結核特異性細胞因子IFN-γ、IL-2聯合檢測及結核分枝桿菌DNA（TB-DNA）擴增檢測。比較結核病（TB組）與非結核發熱（NTB組）患者的IFN-γ、IL-2水平，并分析IFN-γ、IL-2聯合檢測診斷結核病的價值。結果：127例發熱患者中，結核病18例，占14.2%（18/127），其中肺結核14例，肺外結核4例，非結核發熱109例，以感染性發熱、慢性阻塞性肺疾病急性加重、肺癌為主。TB組IFN-γ、IL-2水平均顯著高于NTB組（Plt;0.05）。以TB-DNA為金標準，IFN-γ、IL-2聯合檢測的敏感度為83.3%、特異度為84.4%。受試者操作特征（ROC）曲線顯示，IFN-γ、IL-2聯合診斷結核病的AUC為0.940[95%CI（0.886，0.994）]。結論：結核特異性細胞因子IFN-γ、IL-2聯合檢測在老年發熱患者結核病診斷中具有良好價值。

【關鍵詞】 老年患者 發熱 γ干擾素 白細胞介素-2 結核病

Value of Combined Detection of IFN-γ and IL-2 in the Diagnosis of Tuberculosis in Elderly Patients with Fever/LI Qianqian， HUANG Mengxin， LI Jiabin， GAO Yufeng， WANG Baogui. //Medical Innovation of China， 2025， 22（02）： -156

[Abstract] Objective： To explore the value of combined detection of tuberculosis specific cytokines interferon-γ （IFN-γ） and interleukin-2 （IL-2） in the diagnosis of tuberculosis in elderly patients with fever. Method： A retrospective analysis was performed on 127 hospitalized patients ≥60 years old with recurrent fever who were admitted to Department of Infectious Diseases， Fuyang People's Hospital Affiliated to Anhui Medical University from January 2022 to March 2024. Tuberculosis infection was not excluded in all patients after relevant examination， and tuberculosis specific cytokines IFN-γ， IL-2 combined detection and Mycobaterium tuberculosis DNA （TB-DNA） amplification detection were performed. The levels of IFN-γ and IL-2 in patients between tuberculosis （TB group） and non-tuberculosis fever （NTB group） were compared， and the value of combined detection of IFN-γ and IL-2 in the diagnosis of tuberculosis was analyzed. Result： Among the 127 patients with fever， 18 cases of tuberculosis， accounting for 14.2% （18/127）， including 14 cases of pulmonary tuberculosis， 4 cases of extrapulmonary tuberculosis. 109 cases of non-tuberculous fever， mainly infectious fever， acute exacerbation of chronic obstructive pulmonary diseases， lung cancer. The levels of IFN-γ and IL-2 in TB group were significantly higher than those in NTB group （Plt;0.05）. Using TB-DNA as the gold standard， the sensitivity and specificity of combined detection of IFN-γ and IL-2 were 83.3% and 84.4%， respectively. Receiver operating characteristic （ROC） curve showed that the AUC of IFN-γ and IL-2 combined diagnosis of tuberculosis was 0.940 [95%CI （0.886， 0.994）]. Conclusion： The combined detection of tuberculosis specific cytokines IFN-γ and IL-2 has good value in the diagnosis of tuberculosis in elderly patients with fever.

[Key words] Elderly platients Fever IFN-γ IL-2 Tuberculosis

First-author's address： Department of Infectious Diseases， Fuyang People's Hospital Affiliated to Anhui Medical University， Fuyang 236000， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2025.02.035

截至2023年末，我國60周歲及以上人口約2.97億，占總人口的21.1%，老年人口基數大[1]。老年患者多有基礎疾病及免疫力下降，部分患者接受激素或免疫抑制劑治療，免疫系統容易出現功能紊亂[2-3]。老年發熱患者的病因診斷是臨床常見難題之一，引起發熱的病因繁多，如感染、腫瘤、結締組織病等[4]。但有研究表明，在發熱患者中，有50%～80%是由于感染性疾病造成的，其中結核感染引發的發熱比例呈明顯上升趨勢，結核病占感染性發熱的13%～60%[5-6]。結核病的臨床表現多為不典型癥狀，發熱是結核病常見臨床表現之一，容易造成誤診或延誤診斷，當無法獲取病原學證據時，對發熱患者快速診斷結核病并采取精準治療和結核病防控至關重要[7]。在診斷結核感染中，除肺結核外，淋巴結結核、骨結核等肺外結核感染引發的發熱也多見，提示臨床醫生對老年發熱患者應重視結核病的可能[8-9]。本研究回顧性分析了127例老年發熱患者的臨床資料，對不明確是否因結核感染造成發熱的患者進行輔助診斷與鑒別診斷，旨在分析結核特異性細胞因子γ干擾素（IFN-γ）、白細胞介素-2（IL-2）聯合檢測在老年發熱患者中的應用價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

采用回顧性研究，選擇2022年1月—2024年3月于安徽醫科大學附屬阜陽人民醫院感染科就診的≥60周歲反復發熱住院患者127例。納入標準：（1）年齡≥60周歲；（2）反復發熱，進行相關檢查后不排除結核感染；（3）行IFN-γ和IL-2檢測；（4）臨床資料完整。排除標準：（1）合并多種免疫系統疾病；（2）陳舊性結核。本研究已獲得安徽醫科大學附屬阜陽人民醫院醫學倫理委員會批準[批號：2021（141號）]。

1.2 方法

1.2.1 IFN-γ、IL-2檢測 肝素抗凝管采集所有患者外周血4 mL，采用結核分枝桿菌特異性細胞因子檢測試劑盒（廣州迪澳醫療科技有限公司），從全血中分離外周血單個核細胞（PBMC），在細胞培養板上按照每份樣本分布陰性對照孔（N）、蛋白刺激孔（T）、陽性對照物孔（P），每孔加入的細胞數量為2.5×105個。將細胞培養板放入37 ℃，5% CO2培養箱培養16～20 h，使用酶聯免疫吸附試驗分別對上清中IFN-γ和IL-2進行濃度測定。結果判定：IFN-γ T-N≥7 pg/mL和/或IL-2 T-N≥20 pg/mL為陽性；IFN-γ T-Nlt;7 pg/mL，IL-2 T-Nlt;20 pg/mL且IFN-γ P-N≥35 pg/mL，IL-2 P-N≥130 pg/mL為陰性；若IFN-γ T-Nlt;7 pg/mL，IL-2 T-Nlt;20 pg/mL而IFN-γ P-Nlt;35 pg/mL和/或IL-2 P-Nlt;130 pg/mL為不確定。

1.2.2 結核分枝桿菌DNA（TB-DNA）擴增檢測 用結核分枝桿菌特異性引物和特異性熒光探針，配以聚合酶鏈式反應（PCR）反應液、耐熱DNA聚合酶、4種核苷酸單體等成分，通過PCR體外擴增法進行DNA擴增，從而檢測結核分枝桿菌。

1.2.3 診斷標準 在樣本中檢測到結核分枝桿菌存在確診為結核病，以TB-DNA擴增檢測作為診斷金標準。非結核病按相應疾病的診斷標準進行診斷，并經臨床診斷及鑒別診斷最終確診。

1.3 統計學處理

采用SPSS 26.0軟件對數據進行統計分析。正態分布計量資料以（x±s）表示，比較采用t檢驗；非正態分布計量資料用M（P25，P75）表示，組間比較用Man-Whitney U檢驗；計數資料以率（%）描述，組間比較采用字2檢驗。采用受試者操作特征（receiver operator characteristic，ROC）曲線評估IFN-γ和IL-2聯合檢測在老年發熱患者中的診斷價值。以Plt;0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 基線資料

TB-DNA擴增檢測確診結核病患者18例，納入TB組，非結核發熱患者109例，納入NTB組。結核病患者中，肺結核11例，肺結核合并結核性胸膜炎3例，結核性胸膜炎2例，腰椎結核1例，心包結核1例。非結核發熱患者中，感染性發熱63例、慢性阻塞性肺疾病急性加重20例、肺癌14例、非結核分枝桿菌（NTM）肺病11例、結締組織病1例。127例患者中，因感染導致的發熱共92例（包括結核病、感染性發熱、NTM肺病），占72.4%，其中結核病占感染導致的發熱的19.6%。TB組男12例（66.7%），女6例（33.3%）；年齡61～83歲，平均（73.50±6.67）歲。NTB組男60例（55.0%），女49例（45.0%）；年齡60～89歲，平均（71.38±7.31）歲。兩組性別、年齡比較，差異均無統計學意義（字2=0.850、P=0.357，t=1.156、P=0.845）。

2.2 IFN-γ、IL-2聯合檢測結果

IFN-γ、IL-2聯合檢測診斷肺結核的敏感度為83.3%，特異度為84.4%；TB組IFN-γ、IL-2水平均顯著高于NTB組（Plt;0.05）。見表1、表2。

2.3 IFN-γ、IL-2聯合檢測診斷結核病的價值

IFN-γ、IL-2聯合檢測診斷老年發熱患者結核病的AUC為0.940[95%CI（0.886，0.994）]，見圖1。

3 討論

發熱為結核病常見癥狀之一，與其他感染、基礎疾病、癌癥等造成的發熱進行鑒別診斷非常重要，特別是在結核病發現的主要場所和前哨的綜合醫院，提高結核實驗室診斷和鑒別診斷能力，是提高綜合醫院結核病診、治、防、控水平的首要任務[10-12]。本研究中老年發熱患者127例，因感染造成的發熱占72.4%，是引發患者發熱的主要原因，與以往文獻[13]研究一致，其中結核病引發的發熱占19.6%，與以往文獻[14]研究數據基本相符。我國作為結核病的高發地區，老年人作為結核病高危人群，及時進行活動性結核病的排查，是早期主動發現活動性結核病的重要措施，對未明確發熱原因懷疑結核病老年患者進行結核病篩查，排除結核病值得關注。

結核病的診斷是以病原學（細菌學、分子生物學）、病理學作為確診依據，在樣本中找到結核分枝桿菌，可確診為結核病。但在老年人群中，由于呼吸道生理學特點、基礎疾病及普遍無力型體質，部分患者不會咳痰或不易獲得高質量的痰標本，且結核分枝桿菌培養、基因檢測時間較長，不利于結核病的早期診斷和治療[15-16]。故找到高效、快速診斷結核病的方法，對于結核病的早發現、早治療十分重要。近些年IFN-γ釋放試驗作為新建立的細胞免疫學檢測方法，廣泛應用于結核病的輔助診斷、非結核病的鑒別診斷及高危、健康人群潛伏性結核感染的篩查，具有較好的結核病輔助診斷價值，但是無法區分潛伏性結核感染和活動性結核病[15]。近些年發現結核特異性細胞因子IFN-γ和IL-2聯合檢測在提示活動性結核病中有良好的價值[17-18]，且IL-2應用于結核病的研究也較多[19-21]。本研究中TB組IL-2的水平顯著高于NTB組，說明IL-2可作為結核病診斷標志物對結核病輔助、鑒別診斷。在老年發熱患者中IFN-γ、IL-2聯合檢測的敏感度為83.3%，AUC為0.940，提示雙因子聯合檢測在老年發熱患者結核病的輔助診斷中有良好的應用價值，可更好的警示活動性結核病。

本研究不足之處在于病例數量有限，特別是老年結核病患者數量較少，且并未考慮患者之間差異，如基礎疾病、合并感染等。在未來，需要更大規模的前瞻性研究來確定IFN-γ、IL-2聯合檢測作為結核分枝桿菌感染診斷標志物的臨床應用，并收集各類結核患者，以更好的分析IFN-γ、IL-2聯合檢測在肺結核、肺外結核診斷中的應用效果。還有研究表明，IFN-γ、IL-2水平比值與結核病狀態、治療效果具有一定相關性，有待于進一步研究。

綜上所述，結核特異性細胞因子IFN-γ、IL-2聯合檢測在老年發熱患者結核病診斷中有良好的診斷價值。

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（收稿日期：2024-05-21） （本文編輯：陳韻）