不同樣本存放時間在血凝指標檢測中的對比分析

【摘要】 目的 探究不同樣本存放時間對血凝指標檢測結果的影響。方法 選取2022年6月—2023年5月周寧縣醫院100名健康體檢者作為研究對象，均進行血凝指標檢測，包括凝血酶原時間（prothrombin time，PT）、活化部分凝血酶原時間（activated partial thromboplastin time，APTT）、凝血酶時間（thrombin time，TT）、血漿纖維蛋白原（fibrinogen，FIB），檢測時間分別為采集即刻、存放6 h、存放12 h、存放24 h、存放36 h、存放48 h。樣本在20～25 ℃室溫下保存，準確記錄每個時間點的檢測結果，并進行對比分析。結果 比較分析采集即刻、存放6 h、存放12 h、存放24 h、存放36 h、存放48 h，PT、APTT、TT的檢測結果，差異有統計學意義（P＜0.05）。采集即刻、存放6 h、存放12 h、存放24 h、存放36 h、存放48 h，FIB檢測結果對比，差異無統計學意義（P＞0.05）。存放24 h、存放36 h、存放48 h，PT檢測結果高于采集即刻（P＜0.05）；采集即刻、存放6 h、存放12 h，PT檢測結果對比，差異無統計學意義（P＞0.05）。存放12 h、存放24 h、存放36 h、存放48 h，APTT檢測結果高于采集即刻（P＜0.05）；采集即刻、存放6 h，APTT檢測結果對比，差異無統計學意義（P＞0.05）。存放12 h、存放24 h、存放36 h、存放48 h，TT檢測結果低于采集即刻（P＜0.05）；采集即刻、存放6 h，TT檢測結果對比，差異無統計學意義（P＞0.05）。結論 樣本存放時間可對血凝指標檢測結果產生影響，應在血液采集后盡快進行檢測，盡可能減少存放時間，以保障檢測結果準確性。

【關鍵詞】 血液樣本；存放時間；活化部分凝血酶原時間；凝血酶原時間

文章編號：1672-1721（2024）32-0063-03" " "文獻標志碼：A" " "中國圖書分類號：R446.11

凝血功能檢測是臨床常用的一個檢查項目，可用于術前凝血功能評估、抗凝藥物治療效果評價、出血性/血栓性疾病輔助診斷、溶栓治療監測等，能夠判斷機體凝血功能是否正常，為臨床工作者提供有價值的信息[1-2]。凝血酶原時間（PT）、活化部分凝血酶原時間（APTT）、凝血酶時間（TT）、血漿纖維蛋白原（FIB）為凝血功能檢測主要內容。當檢測結果出現異常時，臨床主要表現為出血傾向和血栓形成，應予以針對性治療[3-4]。目前不同醫院對血液樣本保存時間沒有統一標準。有研究發現，在室溫條件下，不同保存時間會對PT、APTT等檢測結果產生影響，繼而影響臨床判斷的準確性。本研究以100名健康體檢者作為觀察對象，分析不同樣本存放時間對血凝指標檢測結果的影響性，報告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

選取2022年6月—2023年5月在周寧縣醫院體檢的100名健康體檢者作為研究對象，男性53名，女性47名；年齡20～70歲，平均年齡（48.52±5.65）歲；體質量指數18.5～26.7kg/m2，平均體質量指數（22.87±2.04）kg/m2。

納入標準：研究對象年齡≥20周歲且≤70周歲；臨床資料完整；無暈針、暈血等問題；精神、認知狀態良好，可同醫護人員正常交流；對研究內容知情，表示支持和配合。

排除標準：合并重要臟器嚴重功能障礙；處于妊娠期或者哺乳期的女性；合并凝血功能障礙、血友病、自身免疫性疾病、惡性腫瘤疾病、傳染性疾病、急慢性感染性疾病；既往有精神病史、意識不清、視覺聽覺發音障礙或者其他因素無法配合進行血液采集工作；近期有進行抗凝藥物治療。

1.2 方法

為保障血液樣本檢測結果準確性，應盡可能消除不良因素干擾。叮囑健康體檢者保持清淡飲食、避免飲酒，檢測前1天22：00后禁食，保持空腹狀態（禁食8 h以上）。在采血工作前，不可進行劇烈運動，保持心情放松。以坐姿方式采血，嚴格按照血液樣本采集制度實施無菌操作，捆扎止血帶的時間不宜超過1 min。所有健康體檢者均采集2 mL空腹肘部靜脈血，將采集到的血液樣本放置于抗凝管中，緩慢搖晃試管8～10次使其混合。對血液樣本進行離心處理，將離心機轉速設置為3 000 r/min，離心10 min后取出。血凝檢測儀器設備為日本Sysmex公司生產的CS-2000i全自動血凝分析儀，試劑盒為德國西門子公司生產的試劑盒。檢驗科工作人員按照說明書要求即刻進行血凝指標檢測，記錄下即刻檢測結果。之后在室溫環境下（20～25 ℃）保存血液樣本，分別在存放6 h、存放12 h、存放24 h、存放36 h、存放48 h時進行血凝指標檢測。

1.3 觀察指標

對比采集即刻、存放6 h、存放12 h、存放24 h、存放36 h、存放48 h的PT、APTT、TT、FIB檢測結果。其中，PT的正常值范圍為11～13 s，APTT的正常值范圍是25～35 s，TT正常值范圍是16～18 s，FIB正常值范圍為190～414 mg/dL。

1.4 統計學方法

采用SPSS 24.0統計學分析處理數據，計量資料以x±s表示，組間對比將應用t檢驗，3組及3組以上對比應用方差分析和重復測量方差分析，計數資料以百分比表示，采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

采集即刻、存放6 h、存放12 h、存放24 h、存放36 h、存放48 h，PT、APTT、TT檢測結果對比，差異有統計學意義（P＜0.05）。采集即刻、存放6 h、存放12 h、存放24 h、存放36 h、存放48 h，FIB檢測結果對比，差異無統計學意義（P＞0.05）。存放24 h、存放36 h、存放48 h，PT檢測結果高于采集即刻（P＜0.05）；采集即刻、存放6 h、存放12 h，PT檢測結果對比，差異無統計學意義（P＞0.05）。存放12 h、存放24 h、存放36 h、存放48 h，APTT檢測結果高于采集即刻（P＜0.05）；采集即刻、存放6 h，APTT檢測結果對比，差異無統計學意義（P＞0.05）。存放12 h、存放24 h、存放36 h、存放48 h，TT檢測結果低于采集即刻（P＜0.05）；采集即刻、存放6 h，TT檢測結果對比，差異無統計學意義（P＞0.05），見表1。

3 討論

凝血功能是指血液從流動狀態轉變成為凝膠狀態過程的一種能力。血液中的凝血、纖溶、抗凝3個系統處于動態平衡，當凝血功能過高或者過低時，可影響患者的健康狀態，甚至威脅到生命安全[5]。血凝指標檢測可以有效評估患者凝血功能狀態，其檢測結果的準確性將直接關系到臨床治療方案的有效性[6]。在實際研究中發現，許多因素可影響血凝指標檢測的準確性。例如，在臨床檢驗工作中有著較多的檢驗樣本或檢驗工作人員不足時，樣本可能長時間放置，出現血細胞破裂、血液pH值改變等情況，導致凝血功能改變，血凝檢測結果無法準確反映患者的健康狀態[7-8]。

PT測定的是暴露于組織因子時血漿凝固所需的時間，可反映外源性凝血是否正常，顯示血漿中凝血因子Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ活性情況。PT是監測口服抗凝劑的首選指標[9]。PT超過正常對照值3 s以上為異常。PT延長多見于先天性凝血因子缺乏、肝病、原發性纖溶癥、維生素K缺乏等，PT縮短常見于血栓性疾病、多發性骨髓瘤、口服避孕藥等。PT檢測結果對于出血性疾病、外源性凝血途徑導致的先天性凝血疾病以及早期肝硬化的臨床診斷有重要意義[10]。本研究發現，存放24 h、存放36 h、存放48 h，PT檢測結果高于采集即刻，呈逐漸延長趨勢。上述結果說明PT檢測結果在存放24 h以內有一定的穩定性。當存放24 h以上，PT檢測結果將無法滿足臨床需求。應盡量在24 h以內完成檢測工作。

APTT測定的是血漿暴露于可激活接觸因子的物質后發生凝固所需的時間，可反映內源性凝血系統是否正常，顯示血漿中凝血因子XI、XII、Ⅷ、IX水平[11]。APTT延長常見于嚴重肝臟疾病、血友病A/B、口服抗凝藥、凝血因子VI、VI缺乏癥等，APTT縮短常見于高凝狀態和血栓性疾病[12]。本研究發現，樣本室溫存放6 h以內APTT檢測結果無變化；存放12～48 h，APTT檢測結果呈延長趨勢。樣本采集后長時間放置，血細胞持續新陳代謝，隨著氧氣消耗產生二氧化碳、乳酸，使血液pH下降，Ⅷ因子活性程度隨著保存時間延長而逐漸降低。APTT處于內源性凝血機制初始階段，最先受到影響，出現APTT延長現象。為了確保此項檢測結果的準確性，應在采血6 h內完成檢驗。

TT是指在血漿中加入標準化的凝血酶后血液凝固的時間，可以反映血漿纖維蛋白原的水平和功能。TT檢測結果時間延長可能是機體出現低纖維蛋白原血癥、彌漫性血管內凝血、感染、白血病等。樣本存在微小凝塊或者鈣離子時，可導致TT縮短[13-14]。本研究顯示，存放6 h內進行TT檢測，檢測結果無明顯變化；存放12～48 h，TT檢測結果呈縮短趨勢（P＜0.05）。這主要是由于FⅦ因子活化導致。最好在6 h內進行TT檢測。

FIB是肝細胞合成和分泌的一種糖蛋白（含2 964個氨基酸），是血漿中含量最高的凝血因子，可參與凝血和止血過程[15]。FIB水平升高時，可使血小板聚集，導致血液呈高凝狀態。FIB增加除生理情況下的應激反應和妊娠晚期外，可見于機體感染、糖尿病酸中毒、急性心肌梗死、自身免疫性疾病、尿毒癥等。FIB減少可見于肝臟疾病、原發性纖維蛋白原缺乏癥、惡性貧血、DIC等。當出現FIB水平異常變化時，應聯合動態監測患者其他凝血指標及一些炎癥指標（如C-反應蛋白、血降鈣素原等），為臨床判斷患者病情程度及預后提供依據。本研究發現，FIB在各時間點檢測結果對比，差異無統計學意義（P＞0.05），可見FIB有著較高的穩定性。在進行FIB單項檢測時，48 h內完成檢測即可。

在進行血凝指標檢測時，為保障檢測結果的準確性，要求患者保持空腹狀態，避免劇烈運動、飲酒等影響檢查結果的行為。操作人員應嚴格遵照采血規范進行血液樣本采集工作，及時將樣本送檢，按照說明書要求進行檢驗，最大程度減少誤差。

綜上所述，在室溫條件下，隨著血樣本放置時間延長，PT、APTT、TT等血凝指標會發生改變，應在采集血液樣本后盡快進行檢測，以保障檢測結果準確性。

參考文獻

[1] 魏曉薇.標本存放時間對血凝三項檢測結果的影響[J].中國實用醫藥，2023，18（6）：88-90.

[2] 張春雨.探討凝血真空采血管和標本放置溫度及時間對凝血檢驗的影響[J].當代醫學，2021，27（32）：120-121.

[3] 王葛.血液標本存放時間對血凝檢驗結果的影響[J].中國實用醫藥，2021，16（15）：181-183.

[4] 丁侶霞，蔣勇.血液標本存放時間對血凝檢驗結果的影響[J].世界最新醫學信息文摘，2019，19（91）：21-22.

[5] 范見佩，鄭遠華，李區杰.標本因素對凝血五項檢測結果的影響[J].血栓與止血學，2019，25（3）：411-414.

[6] 易康平.凝血酶原時間和活化部分凝血活酶時間測定的臨床意義[J].基層醫學論壇，2019，23（31）：4527-4528.

[7] 王艷.不同保存條件和存放時間的血液標本對生化指標檢測結果的影響[J].安徽預防醫學雜志，2019，25（2）：151-152.

[8] 吳剛.標本放置時間、離心時間以及溶血與否對凝血檢測結果的影響分析[J].中國現代藥物應用，2020，14（1）：228-230.

[9] 郁玲，胡益飛.標本不同存儲時間對常規凝血功能指標影響的研究[J].中國衛生檢驗雜志，2019，29（9）：1111-1112.

[10] 陳柳玲，張志，宋晗，等.血液標本存放時間對血凝中PT、APTT檢測結果的影響[J].中國實用醫藥，2020，15（18）：197-198.

[11] 鄧進進.影響血凝試驗檢驗結果的相關因素分析[J].基層醫學論壇，2018，22（7）：958-959.

[12] 劉婷.血液標本存放時間對血凝中PT、APTT檢測結果影響[J].世界最新醫學信息文摘，2018，18（1）：137.

[13] 張琦.凝血真空采血管及標本放置溫度、時間對凝血檢驗的影響[J].中國醫藥指南，2020，18（19）：89-90.

[14] QIANG L，WEI C，YONG LI W，et al.A new method of monitoring catheter-directed thrombolysis for deep venous thrombosis-application of D-dimer and fibrinogen testing[J].Phlebology，2022，37（3）：216-222.

[15] 仝曉寧，陳葳.血液標本存放的時間、離心的時間及發生溶血對患者凝血四項檢驗結果的影響[J].當代醫藥論叢，2020，18（7）：174-175.

（編輯：張興亞）