2021—2022年豬偽狂犬病血清學調查

摘要：為了解豬偽狂犬病在不同地區、不同季節和不同生長階段等條件下的感染情況。本次調查利用ELISA方法，對全國15個省、市、自治區的4 285份樣品進行豬偽狂犬病病毒PRV gE和gB抗體檢測，其中包括2021年于30個規模化養殖場采集2655份和2022年于35個規模化養殖場采集1630份。結果顯示，2021年和2022年gE樣品陽性率分別為21.4%和21.2%，gE場陽性率分別為36.7%和34.3% ，gB樣品陽性率分別為82.3%和84.5%，gB場陽性率分別為100%和97.1%；按照不同地區進行統計分析，gE陽性率分別為安徽55.2%、福建24.3%、湖南59.0%、江西49.3%、山西90.0%、新疆62.0%（較高），北京、貴州、內蒙古、陜西均為0%；按照不同季節進行統計分析， gE陽性率在春季最低，為16.7%，在秋季最高，為34.3%；按照不同生長階段進行統計分析，母豬gE陽性率為38.3%，高于其他生長階段的豬群，哺乳仔豬陽性率最低，為9.5%。結果表明，在上述地區豬群中PRV gB抗體陽性率較高，豬偽狂犬病感染率處于較低水平，但不同條件下存在較大差異并且分布廣泛，依舊存在流行風險。因此，確保疫苗接種率和有效率，加強豬群衛生防疫，提高飼養管理水平，對防控此病有積極意義。

關鍵詞：豬偽狂犬病；PRV ；gE抗體；血清學調查

豬偽狂犬病病毒（pseudorabies virus，PRV）屬于皰疹病毒科、甲型皰疹病毒亞科的成員，豬皰疹病毒 I 型，病毒粒子呈球形，直徑為150～180 nm，其核衣殼直徑為105～110 nm，形態由芯髓、衣殼、中間質層和囊膜組成，囊膜表面有放射狀纖突，線狀雙鏈DNA 病毒[1]。感染后可能導致懷孕母豬的流產以及死胎，對于新生仔豬可能會引發腹瀉性死亡，育肥豬則可能出現呼吸道癥狀[2] ，該病是危害整個養豬行業的重要疫病之一[3] 。偽狂犬病毒不僅可以感染豬、牛、山羊、綿羊等家養動物，還可感染貓、犬等伴侶動物以及野豬等野生動物[4]。本病的傳播途徑有3條，分別是直接接觸傳播、經空氣傳播和經生殖接觸進行傳播[5]。由于多種動物均可以感染本病，導致發病動物及隱性感染者為主要傳染源，但在規模化養殖場以帶毒豬和發病豬為主要的傳染源。PRV gB基因編碼的結構蛋白非常保守且具有良好的免疫原性，使用PRV gE基因缺失疫苗進行免疫后，可通過檢測PRV gB抗體和PRV gE抗體掌握免疫效果和野毒感染情況。因此為了解豬偽狂犬病野毒的感染情況以及疫苗接種情況，對未來可能的流行趨勢判斷提供數據支持，利用ELISA方法對2021至2022年不同地區、季節和生長階段的豬群，開展本次豬偽狂犬病流行性病學調查。

1 材料與方法

1.1 材料

1）檢測樣品。來自全國15個省、市、自治區（以下簡稱省）的4 285份樣品，其中包括2021年于30個規模化養殖場采集的2 655份和2022年于35個規模化養殖場采集的1 630份，受檢豬群包括仔豬、母豬、后備豬、育肥豬等。無菌采集血液樣本2～3 mL ，靜置2～4 h，3 000 r/min離心5 min，取上清液至無菌離心管中，置負20 ℃冷凍保存備用。

2）主要試劑。豬偽狂犬病病毒g1抗體檢測試劑盒，購自美國愛德士生物科技有限公司（批號：JS807、JS840、JT387）；偽狂犬病病毒 gB（PRVgB）抗體 ELISA 檢測試劑盒，購自鄭州中農快檢科技有限公司（批號：FS8250、FS8767）。

3）主要儀器。臺式冷凍離心機，德國sigma公司產品（型號：3K15）；電熱恒溫培養箱，上海森信實驗儀器有限公司產品（型號：DRP-9082）；酶標儀，TECAN公司產品（型號：F50）。

1.2 檢測方法

PRV gE使用競爭法ELISA檢測，其操作步驟及判定標準均嚴格按照豬偽狂犬病病毒 g1抗體檢測試劑盒說明書進行；PRV gB使用間接法ELISA檢測，其操作步驟及判定標準均嚴格按照偽狂犬病病毒 gB（PRVgB）抗體 ELISA 檢測試劑盒說明書進行。每次檢測均設置陽性對照和陰性對照。

1.3 數據統計分析

利用 Microsoft Excel 2016軟件進行數據統計。

2 結果

2.1 PRV抗體檢測結果

2021年和2022年樣品經PRV gB抗體檢測結果見表1，gB場陽性率分別為100%（30/30）和97.1%（34/35）合計98.5%（64/65），gB樣本陽性率分別為82.3%（2 186/2 655）和84.5%（1 378/1 630）合計83.2%（3 564/4 285）。

2021年和2022年樣品經PRV gE抗體檢測結果見表2，gE場陽性率分別為36.7%（11/30）和34.3%（12/35）合計35.4%（23/65），gE樣本陽性率分別為21.4%（569/2 655）和21.2%（346/1 630）合計21.4%（915/4 285）。

2.2 不同地區規模豬場PRV gE抗體結果

對2021至2022年不同地區樣品PRV gE抗體結果進行統計結果見表3，不同地區的PRV gE抗體陽性率不盡相同，其中安徽55.2%（16/29）、福建24.3%（101/416）、湖南59.0%（112/190）、山西90.0%（18/20）、江西49.3%（182/369）、新疆62.0%（70/113），高于本次調查PRV gE總樣品陽性率21.4%（915/4 285）；北京（0/361）、貴州（0/162）、內蒙古（0/138）、陜西（0/10）樣本陽性率最低均為0%。

2.3 不同季節PRV gE抗體檢測結果

對不同季節PRV gE抗體檢測結果進行統計結果見表4，春季（3—5月）gE抗體陽性率最低為16.7%（318/1 903）；夏季（6—8月）gE抗體陽性率為24.9%（237/951）；秋季（9—11月）gE抗體陽性率最高為34.3%（217/633）；冬季（12—次年2月）gE抗體陽性率為17.9%（143/798）。

2.4 不同生長階段PRV gE抗體檢測結果

對不同生長階段PRV gE抗體檢測結果進行統計結果見表5，母豬的gE抗體陽性率高于其他生長階段的豬群，為38.3%（448/1 169），哺乳仔豬gE抗體陽性率最低，為9.5%（76/801）。

3 討論

本次調查利用PRV gE基因缺失疫苗免疫與野毒感染產生抗體差異的特點通過gE和gB抗體ELISA檢測方法，對15個省的部分規模化豬場進行豬偽狂犬病的血清學調查。監測了豬群整體的PRV抗體陽性率，并對不同地區、季節和生長階段豬群的豬偽狂犬野毒感染率進行統計分析，根據數據分析其原因、制定防控建議，以期達到降低該病感染率、提高經濟效益的目的[6，8]。

本次調查結果顯示，2021至2022年15省豬群的PRV gE 樣本陽性率為21.4%，PRV gB抗體樣品陽性率為83.2%。這與康篤利[9]報道，2015至2017年19省豬群的PRV gE 樣本陽性率60.33%相差較大，可能是因為有效的接種疫苗使得總體gB抗體陽性率較高，降低了野毒感染率。初步認為近年來豬偽狂犬野毒感染總體情況較為穩定并處于較低水平。但目前尚未出現針對豬偽狂犬病的特效藥物[10]，因此選擇恰當的疫苗接種是降低感染率和提高生產性能的最有效手段[11]。

在對不同地區PRV gE抗體結果進行統計時發現，安徽、福建、湖南、山西、新疆，均高于總樣品陽性率，而北京、貴州、內蒙古、陜西未檢出陽性樣本。由此可以看出野毒感染水平地區間分布不均，部分地區存在較高的野毒感染率。這可能是疫苗接種滯后或疫苗保護力不佳引起，依然存在大規模傳播風險。應加強日常疫病監測，選擇專業機構或正規公司生產的試劑產品定期進行抗體檢測，主動掌握疫情數據。若確實出現的野毒感染率升高，需結合場區實際情況及時調整免疫程序和防疫手段。同時部分地區之間的野毒感染率差異較大也可能受到樣品數量少的影響，為更準確地掌握野毒感染情況，還應對具體地區進行針對性調查研究。

對不同季節PRV gE抗體檢測結果進行統計結果顯示，夏秋兩季gE抗體陽性率較高。春秋防疫是每年開展防疫的工作重心，春防秋防工作的有效開展也關系到全年的防疫成果。因此開展春防秋防要及時，接近尾聲時不松懈確保全年疫病防控工作的高效有序進行。

呂遠蓉等[12]調查顯示，南充地區豬場中仔豬的PRV gE 樣本陽性率為15%處于較低水平；佘志成等[13]報道，江蘇部分地區公豬、母豬和仔豬PRV gE抗體陽性率分別50%、42%、33%。本次調查對不同生長階段PRV gE抗體結果進行統計，母豬的gE抗體陽性率高于其他生長階段的豬群，有可能是養殖場擔心因疫苗接種對母豬的生產性能造成影響，免疫接種比較保守。哺乳仔豬gE抗體陽性率最低，則可能是母豬自然感染或接種疫苗后產生母源抗體對仔豬產生了保護。

本次調查結果表明，豬偽狂犬病野毒感染率較低，總體gB抗體陽性率較高，不同地區、不同季節和不同生長階段野毒感染情況存在差異。說明相關防疫程序可能存在制定不適合、實施不及時、落實不到位等情況，而這將導致投入增加和產能下降最終影響養殖收益。同時應結合實際情況制定適當防疫程序，及時有效開展免疫工作，做好疫病監測；提高自繁自養比例，提高各生長段飼養管理水平；盡量做到全進全出，為全面消殺創造條件；做好環境消毒、滅蟲滅鼠和飼料防潮防霉措施；做好控溫控濕和通風換氣，避成豬群免疫力低下增加感染風險。

參考文獻：

[1] 王久余.豬偽狂犬病防治的研究進展[J].中國畜禽種業，2022，18（3）：56-57.

[2] 斯特勞B E，阿萊爾S D，蒙加林W L，等.豬病學[M].趙德明，張仲秋，沈建忠，譯.8 版.北京：中國農業大學出版社，2000：195-196.

[3] 李海琴，康昭風，譚美芳，等.2016—2017年江西省部分地區規模化豬場豬偽狂犬病血清流行病學調查[J].江西農業大學學報，2018，40（5）：1037-1041.

[4] 唐宏.豬偽狂犬病的臨床癥狀和防治措施[J].特種經濟動植物，2022，25（4）：48-49.

[5] 杜潔，張樂.豬偽狂犬病的臨床癥狀與防控[J].養殖與飼料，2022，21（5）：73-75.

[6] 柒鐵平，曾軍輝，張勝斌，等.規模豬場應用偽狂犬gE基因缺失疫苗免疫及淘汰措施凈化豬偽狂犬病技術[J].廣西畜牧獸醫，2017，33（3）：134-136.

[7] 尉新華，王鵬翔.2018—2020年河南安陽部分地區種豬群豬偽狂犬病野毒的抗體檢測與分析[J].養豬，2022（4）：100-102.

[8] 王昌建，方鈴，林源，等.2018年湖南省規模豬場偽狂犬病血清學調查[J].動物醫學進展，2021，42（5）：132-135.

[9] 康篤利.2015～2017年國內部分地區豬偽狂犬病流行病學調查及豬偽狂犬疫苗免疫增強的研究[D].華南農業大學，2018.

[10]高翊翔，張永賓，吳萬里.豬偽狂犬病的診斷與防治[J].畜牧獸醫科技信息，2022（6）：154-156.

[11]朱美紅.豬偽狂犬病的綜合防控[J].養殖與飼料，2022，21（2）：70-72.

[12]呂遠蓉，王懷禹，劉強，等.南充地區部分規模化豬場豬偽狂犬抗體血清學監測[J].中國動物保健，2021 ，23（4）：30 -31+58.

[13]佘志成，李群，王凱，等.江蘇省豬偽狂犬病流行病學調查及兩種疫苗免疫效果評估[J].豬業科學，2019，36（6）：72-74.