一起不明原因食源性疾患流行病調查及實驗室結果分析

摘 要：目的：查明一起食物中毒事件暴發(fā)的原因和可疑危險因素，提出有針對性的防控措施和建議，防止類似事件再次發(fā)生。方法：收集整理暴發(fā)疫情調查處理資料，包括病例搜索及個案調查、現(xiàn)場衛(wèi)生學調查、實驗室檢測等資料，通過實驗室檢測數(shù)據(jù)和流行病學特征綜合分析得出事件原因。結果：現(xiàn)場流行病學調查發(fā)現(xiàn)有儲存不當?shù)氖称罚Ｓ嗍称泛铜h(huán)境涂抹樣本中檢出有金黃色葡萄球菌和蠟樣芽孢桿菌，二層男廁所廁坑及門把手檢出金黃色葡萄球菌，腸毒素A陽性，患病學生桌面及座椅、二層和三層男廁所的廁坑及門把手檢出I型諾如病毒。結論：本次食源性腹瀉疫情為不潔飲食和諾如病毒疊加作用引起。

關鍵詞：食物中毒；流行病學調查；實驗室檢測；諾如病毒

Epidemiological Investigation and Laboratory Analysis of a Food-Borne Disease of Unknown Cause

ZHANG Bowen， LIU Dandan

（Mentougou District Center for Disease Control and Prevention， Beijing 102300， China）

Abstract： Objective： To identify the cause and suspected risk factors of an outbreak of food poisoning， and put forward targeted prevention and control measures and suggestions to prevent the recurrence of similar incidents. Method： The investigation and processing data of the outbreak were collected and sorted out， including case search and case investigation， field hygiene investigation， laboratory testing and other data. The causes of the outbreak were obtained by comprehensive analysis of laboratory testing data and epidemiological characteristics. Result： On-site epidemiological investigation revealed improperly stored food， Staphylococcus aureus and Bacillus cereus were detected in residual food and environmental smear samples， Staphylococcus aureus and enterotoxin A positive were detected in the toilet pit and door handle of the 2nd floor men’s toilet， and norovirus type I was detected in the table top and seat of the sick student， and in the toilet pit and door handle of the 2nd and 3rd floor men’s toilet. Conclusion： This outbreak of food-borne diarrhea was caused by the combination of unclean diet and norovirus.

Keywords： food poisoning; epidemiological survey; laboratory testing; norovirus

食物中毒是指攝入了含有生物性、化學性有毒、有害物質的食品或者把有毒有害物質當作食品攝入后出現(xiàn)的非傳染性（不屬于傳染病）的急性、亞急性疾病，是引發(fā)突發(fā)公共衛(wèi)生事件的重要原因之一[1]。全世界每年因食物污染而致病的人數(shù)達數(shù)億，中國平均每年有近5萬人因食物中毒而使健康受到損害，食物安全直接關系到居民健康和生命安全[2]。2023年4月6日，北京市某中學多名學生出現(xiàn)腹瀉、腹痛、惡心和嘔吐等癥狀，經調查疑似為食物中毒事件。本文針對發(fā)生食源性疾患的某學校，依據(jù)《食品安全事故流行病學調查技術指南》[3]進行調查，根據(jù)《食物中毒診斷標準及技術處理總則》（GB 14938—1994）進行判定，為今后科學有效防控食源性疫情提供參考。

1 調查對象與方法

1.1 對象

2023年4月6日，北京市某區(qū)醫(yī)院兒科門診接診9名嘔吐、腹痛患者，伴有食品共同暴露史，疑似食源性疾患。患者均來自北京市某區(qū)某中學，學校供餐人數(shù)共703人，均納入調查對象。

1.2 方法

1.2.1 流行病學調查

根據(jù)實際情況，制訂病例定義并進行搜索。病例定義：2023年4月6日中午在學校就餐后，其主要癥狀為嘔吐（次數(shù)≥1次/d）合并腹痛的在校學生，共確定病例9人，年齡分布在7～11歲，均為在校就讀學生。對所有病例進行采樣，同時開展流行病學個案調查，然后進行現(xiàn)場衛(wèi)生學調查。

1.2.2 實驗室檢測方法

對剩余食物、留樣食品，患者所在班級的環(huán)境涂抹和相關人員的生物樣本，進行病原體檢測及病毒檢測。開展項目為菌落總數(shù)、沙門氏菌、金黃色葡萄球菌、蠟樣芽孢桿菌、致瀉大腸埃希氏菌、霉菌和酵母菌計數(shù)及諾如病毒檢測。

使用實時熒光定量PCR對樣本進行初篩檢測，根據(jù)核酸檢測結果，針對性地對樣本進行病原菌分離。蠟樣芽孢桿菌和金黃色葡萄球菌開展毒力基因檢測。

2 結果與分析

2.1 流行病學調查

經區(qū)疾控中心流行病學調查分析，在2023年

4月6日12：00，學生在學校集體就餐，餐食由學校食堂統(tǒng)一提供，其中一年級（1）班32人，發(fā)病4例；四年級（1）班29人，發(fā)病5例。發(fā)病前午餐提供餐品有宮保雞丁、胡蘿卜豆芽、炸雞排、米飯、雞蛋黃瓜湯、盒裝酸奶，9名患者均食用午餐提供的所有餐品。

2.2 現(xiàn)場衛(wèi)生學調查

學校老師反映部分盒裝酸奶有脹氣，打開包裝盒后有肉眼可見的黑色物質，疑似菌斑。現(xiàn)場調查發(fā)現(xiàn)盒裝酸奶置于常溫保存，未按要求冷藏保存。初步調查結果為可疑食次是4月6日中餐，可疑食品為盒裝酸奶，不排除因食用其他食品或其他傳染病傳播導致此次事件發(fā)生的可能。

2.3 流行病學特征及臨床癥狀

9名患者，其中男生2名，女生7名，男女比例為1∶3.5，涉及班級一年級（1）班4人，四年級（1）5人，均為學生。年齡分布為7歲4人，10歲4人，11歲1人。詳見表1。

經調查了解，所有學生12：00左右在班級就餐后，13：00至15：00，9名學生陸續(xù)出現(xiàn)惡心、嘔吐（嘔吐次數(shù)≥1次/24 h），偶有不同程度腹痛（上腹部，臍周部）、腹瀉情況，所有病例均無發(fā)熱表現(xiàn)，9名患者均到區(qū)醫(yī)院兒科門診就診。實驗室檢驗結果顯示，患者白細胞不高，臨床診斷為急性胃腸炎。在對癥治療后效果良好，無重癥病例，所有病例均已痊愈回家，無危重病例報告。詳見表1。

經核實，首發(fā)患者為四年級（1）班學生，女，10歲，發(fā)病時間為4月6日13：00，就診時間為4月6日14：35。臨床治療為益生菌對癥、補液鹽和中藥治療。

2.4 采樣情況與實驗室檢測結果

2.4.1 采樣情況

①未采集到患者嘔吐物樣本。②采集廚師糞便樣本1件，開展腸道多病原檢測。③采集剩余食品4種14件（宮保雞丁、胡蘿卜豆芽、炸雞排，開展菌落總數(shù)、沙門氏菌、金黃色葡萄球菌、蠟樣芽孢桿菌和致瀉大腸埃希氏菌檢測；盒裝酸奶11件，開展霉菌和酵母菌計數(shù)、菌落總數(shù)、沙門氏菌、金黃色葡萄球菌、蠟樣芽孢桿菌和致瀉大腸埃希氏菌檢測）。④采集食堂涂抹樣品6件（4個案板、1個水池、1個地漏），開展菌落總數(shù)、沙門氏菌、金黃色葡萄球菌、蠟樣芽孢桿菌檢測和致瀉大腸埃希氏菌檢測。⑤環(huán)境樣品6管30件，分別為一年級（1）班和四年級（1）班的患病學生桌面及座椅、二層和三層男廁所的廁坑及門把手，開展菌落總數(shù)、沙門氏菌、金黃色葡萄球菌、蠟樣芽孢桿菌和致瀉大腸埃希氏菌及諾如病毒檢測。

2.4.2 實驗室檢測結果

4月12日區(qū)疾控中心實驗室結果顯示，可疑食品酸奶，經實驗室分離培養(yǎng)，結果均未檢出，未分離到菌株。食品樣品中胡蘿卜豆芽檢出金黃色葡萄球菌，毒力基因陰性。環(huán)境樣品中水池涂抹樣品、一年級（1）班和四年級（1）班涂抹樣品檢出蠟樣芽孢桿菌，毒力基因陰性；案板涂抹樣品檢出金黃色葡萄球菌，毒力基因陰性。二層男廁所的廁坑及門把手樣品檢出金黃色葡萄球菌，A型腸毒素陽性。患病學生桌面及座椅、二層和三層男廁所的廁坑及門把手檢出諾如病毒Ⅰ型，詳見表2。

3 結論與討論

本次事件所有患者均在學校就餐，且在餐后1～

3 h后出現(xiàn)不同程度的惡心、嘔吐、腹痛腹瀉等癥狀，結合發(fā)病快、潛伏期短的流行病學特征，通過現(xiàn)場樣本采集及實驗室結果分析，推測本次事件由飲用不潔食品同時疊加諾如病毒感染引起。

對采集樣本進行分析，發(fā)現(xiàn)部分盒裝酸奶有脹氣，打開包裝盒后有肉眼可見的黑色物質，疑似菌斑，但通過實驗室培養(yǎng)并未成功分離到菌株，懷疑是某種微生物僅在某種特定的環(huán)境中可以生存，在實驗室中較難培養(yǎng)，故未分離成功。現(xiàn)場調查盒裝酸奶置于常溫保存，未按要求冷藏保存，不排除酸奶變質可能，若因儲存不當，導致酸奶中細菌或霉菌大量繁殖，即會造成使用者腹瀉，甚至導致急性胃腸炎，推測酸奶可能也是此次事件發(fā)生的因素之一。

食品樣本、案板及廁所環(huán)境中均檢出金黃色葡萄球菌，但患者所處環(huán)境樣本并未檢出。有研究表明，金黃色葡萄球菌及其毒素已經成為我國引發(fā)細菌性食物中毒的主要致病因子之一[4]。所有分離菌株均做腸毒素篩查，廁所環(huán)境檢出腸毒素A，經一代測序分析，腸毒素結果為t062型，并不是我國主要的優(yōu)勢克隆株[5]，故其在人群中的流行暴發(fā)的概率較小，且僅在廁所環(huán)境中檢出。由于本次事件缺少患者的生物樣本分析，同時金黃色葡萄球菌的檢出量不大，故排除此次事件由金黃色葡萄球菌感染引起；水池涂抹及班級環(huán)境涂抹均檢出蠟樣芽孢桿菌，但其檢出量均遠遠小于105 CFU·g-1，且毒力基因陰性，蠟樣芽孢桿菌的致病力不強，故排除；患病學生桌面及座椅、二層和三層男廁所的廁坑及門把手檢出諾如病毒Ⅰ型。諾如病毒具有潛伏期短，易傳播，發(fā)病快，人群普遍易感等特點，且在多處環(huán)境樣本中檢出，為諾如病毒的快速傳播提供了有利條件，推測此次事件存在因諾如病毒在人和物間的不斷流轉，從而導致眾多人員感染腹瀉情況的存在。通過實驗室檢測結果分析可見，環(huán)境樣本及剩余食品中均有病原菌檢出，證實不潔食品的存在，且環(huán)境中有諾如病毒的檢出，證明學校在出現(xiàn)相關患者后并未采取有效的預防措施，導致諾如病毒在人群中傳播感染。因此，學校應對衛(wèi)生加強監(jiān)督，同時強調注意個人衛(wèi)生。

參考文獻

[1]LAI Y H，CHUNG Y A，WU Y C，et al.Disease burden fromfoodborne illnesses in Taiwan， 2012—2015[J].J Formos Med Assoc，2020，119（9）：1372-1381.

[2]劉建平，張錦周，梁浩，等.2009—2018年深圳市食物中毒事件流行病學分析[J].公共衛(wèi)生與預防醫(yī)學，2021，32（3）：41-44.

[3]衛(wèi)生部網站.食品安全事故流行病學調查技術指南（2012年版）[EB/OL].（2012-06-07）[2024-08-10].https：//www.cs.com.cn/xwzx/msxf/201206/t20120612_3368113.html.

[4]佚名.國家衛(wèi)生計生委辦公廳關于2015年全國食物中毒事件情況的通報[J].中國食品衛(wèi)生雜志，2016，28（3）：290.

[5]尚偉龍.耐甲氧西林金黃色葡萄球菌主要流行克隆替代的機制研究[D].重慶：第三軍醫(yī)大學，2014.