外周時鐘基因在非酒精性脂肪性肝炎發展與防治中的作用

摘要：非酒精性脂肪性肝炎（NASH）作為非酒精性脂肪性肝病的嚴重臨床表現形式，以肝脂質沉積、炎癥損傷為特征。目前NASH的臨床治療藥物仍處于探索實驗階段，亟待取得進展。有研究指出NASH的發病機制與肝臟晝夜節律紊亂有關，具體可表現為肝時鐘基因如BMAL1等表達失調，導致肝內脂質生成增多、脂肪酸氧化減少以及促炎癥因子激活。因此，改善肝臟晝夜節律，調節肝時鐘基因表達被視為防治NASH的可行策略。目前已有通過激活時鐘基因編碼蛋白治療NASH的藥物應用于動物實驗，如REVERB全激動劑SR9009，其能抑制肝臟的炎癥發展，有效證實了靶向時鐘編碼蛋白在NASH治療中的可能性。本文總結了肝時鐘基因在調節肝脂質代謝與炎癥發生發展中的作用，闡述了近年來以時鐘基因及其相關蛋白作為靶點的藥物研究進展，以期為NASH治療提供新靶點。

關鍵詞：非酒精性脂肪性肝病；晝夜節律；時鐘蛋白質類

非酒精性脂肪性肝炎（NASH）作為非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）的嚴重臨床表現形式，以肝脂質沉積、炎癥損傷為特征。隨著生活水平的提高和飲食習慣的改變，NASH的發病率逐年升高，預計其全球發病率將在未來10年增加56%，到2030年，將成為肝移植的主要原因[1-2]。NASH導致的肝硬化死亡占中國大陸肝硬化總死亡病例的32.6%[3]。

臨床上，NASH的治療包括飲食干預、運動干預、藥物治療以及減肥手術。目前最為廣泛推薦的治療方法仍是干預患者的不良生活方式、控制體質量和腰圍[4]，但此類治療方法需要較好的監管，患者較難長期維持標準的飲食攝入，因此常無法達到理想的減重效果。除飲食干預之外，運動也可以預防與肝臟相關的死亡，并降低肥胖帶來的風險[5]。藥物治療方面，保肝藥物如雙環醇、多烯磷脂酰膽堿等效用有限，且其對NASH無研究證實的肯定療效。減肥手術雖然可以最大限度地幫助患者減輕體質量，同時有效控制代謝紊亂，但適用人群十分有限，且對NASH的長期治療效果尚未得到證實。目前，尚無藥物被批準用于NASH的治療[5]。因此，深入研究NASH的發病機制，找到相關的治療靶點，對NASH 的防治具有重要意義。

晝夜節律是由分子生物鐘產生的一系列內源性自主振蕩器，其在24小時的周期中，協調內部時間與外部環境相適應[6]。事實上，多種重要的肝臟生理功能以及細胞過程均受到生物鐘的調節，肝時鐘維系的晝夜節律通過影響肝時鐘基因的轉錄、翻譯，調節下游生理過程；其中部分時鐘基因被證實與肝脂質代謝、炎癥的發生發展密切相關。基于此，部分學者提出，改善肝臟晝夜節律是預防和治療NASH的可行策略。

本文就外周時鐘基因在NASH發病中的作用機制和靶向時鐘基因及其相關蛋白的治療藥物進行綜述，為NASH提供可能的治療靶點。

1"""" 晝夜節律

1.1" 簡介"""""" 地球自轉產生了以日為周期的環境變化，例如一天內光照和溫度的變化。為了在生理、代謝和行為上適應這種環境改變，生物體進化出一種大約以24小時為周期的內源性計時機制，該機制能夠根據時間調整生物行為模式并改變生物行為的代謝狀態，例如人類晝出夜伏的作息、飲食行為的時間等。負責協調內部時間與外界環境相適應的機制被稱為生物鐘[6]。哺乳動物體內的生物鐘根據其分布的解剖位置不同，分為核心時鐘與外周時鐘。核心時鐘與外周時鐘組成成分相同，均由轉錄因子構成，參與調控下游時鐘基因的轉錄，此調節機制被稱為轉錄-翻譯反饋系統。該系統通過作用于細胞的代謝感受器，形成具有細胞自主性的節律性時鐘振蕩器，即晝夜節律[7]。

核心時鐘位于大腦的視交叉上核，對光敏感，與光照周期同步后負責驅動機體休息、活動，并調節禁食的周期。其可根據外周組織的自主神經支配、內分泌信號（糖皮質激素和褪黑素）、體溫等相關信號，來調控外周振蕩器[8]。值得注意的是，核心時鐘基因的表達不會受飲食因素影響[9]。外周時鐘又稱非核心時鐘，位于機體的外周組織，主要受到溫度、光照等因素的影響，其中肝時鐘主要受食物攝入的影響[10]。

1.2" 晝夜節律的分子調控機制"" 在分子水平上，晝夜節律由轉錄因子組成的轉錄-翻譯反饋調節環路即分子鐘實現（圖1）。其中，時鐘相關蛋白是轉錄因子的重要組成部分，其可通過反饋調節環路實現對時鐘基因表達的調控。哺乳動物體內存在多種時鐘基因，包括腦和肌肉組織芳香羥受體核轉運類似蛋白1基因（brain and muscle ARNT-like protein-1，BMAL1）、時鐘基因（circadian locomotor output cycles kaput，CLOCK）、周期基因（period，PER）、隱花色素基因（cryptochrome，CRY）以及核受體家族1D組成員基因（nuclear receptor subfamily 1 group D member 1，NR1D1，即REVERB）等。

時鐘振蕩器通過兩個基本的轉錄-翻譯反饋環路發揮作用。核心環路中：一方面，異源二聚體（CLOCK-BMAL1）作為哺乳動物生物鐘的起搏器，通過與DNA的E-box結合位點（5'-CACGTG-3'）結合，調控時鐘基因PER1/2、CRY1/2、REVERB的轉錄[11]；另一方面，PER1/2、CRY1/2轉錄生成的PER1/2和CRY1/2可作為BMAL1-CLOCK的功能抑制因子，但當其通過翻譯后修飾抑制活性后，便失去了對BMAL1-CLOCK的抑制，從而形成了一種自我調節循環機制[11]。第二個調節環路中，視黃酸相關孤兒受體α（retinoid-related orphan nuclear receptor，RORα）和REVERB通過與BMAL1/CLOCK上的RORE位點競爭性結合，調節BMAL1與CLOCK基因的表達；其中ROR作為轉錄促進因子，REVERB作為轉錄抑制因子發揮作用。

2"""" 外周時鐘基因參與NASH發生、發展的可能機制

脂肪在肝臟的異位沉積、變性及肝臟炎癥的發生、發展，被視為NASH的重要病理機制。近年來隨著對晝夜節律的深入探索，研究者逐漸開始重視其在疾病發展中的作用。有學者[10]提出肝時鐘基因表達紊亂，可造成其下游調節脂質代謝及促炎癥因子分泌的蛋白水平異常。如REVERB可以作為轉錄抑制因子，間接調控肝脂質的從頭合成；BMAL1可以通過調節肝臟核受體蛋白——過氧化物酶體增殖物激活受體（PPARa）的mRNA甲基化水平，控制脂肪酸的氧化代謝。另一方面，RORα可以降低肝細胞、Kupffer細胞內過量活性氧（ROS）水平，參與應對炎癥的發生。

2.1" 時鐘基因及其相關蛋白參與調節肝脂質代謝（圖2）

2.1.1""""" BMAL1基因" BMAL1基因參與肝臟的脂質代謝，其與極低密度脂蛋白（very-low-density lipoprotein，VLDL）的分泌密切相關；其中高水平VLDL易誘發高脂血癥，被視為NASH發展的因素之一。

lncRHL是一種在肝臟中高表達的長鏈非編碼RNA （lncRNA），其能夠直接與異質核核糖核蛋白U（heterogeneous nuclear ribonucleoprotein U，hnRNPU）結合，增強自身穩定性的同時，提高BMAL1的轉錄活性，從而減少肝細胞VLDL分泌[12]。lncRHL缺失會加速hnRNPU蛋白降解，抑制BMAL1轉錄，促進肝細胞VLDL分泌[12]；而BMAL1水平在脂肪肝小鼠模型中降低[13]。上述研究提示，BMAL1水平的減低可能在脂肪肝疾病中起到病因學的作用，但確切機制仍需要進一步的研究。

目前IncRHL被作為hnRNPU調節劑應用于代謝性疾病如糖尿病的治療中，但其能否通過恢復肝臟晝夜節律作用于NASH尚不明確。因此，闡明BMAL1對晝夜節律調節的潛在機制，探究其對于NASH的治療效果，可為改善晝夜節律治療NASH開辟新的前景。

2.1.2""""" CLOCK基因" 載脂蛋白（apolipoprotein，apo）B參與內源性甘油三酯的運輸[14]；微粒體甘油三酯轉移蛋白（microsomal triglyceride transporter，MTP）協助apoB通過細胞膜向肝外轉移甘油三酯，預防甘油三酯在肝臟的異位沉積。

CLOCK可以與小異二聚體伴侶（small heterodimer partner，SHP）的啟動子E-box序列結合，上調SHP表達，從而抑制MTP基因表達，降低apoB水平[15]。動物實驗[16-17]證實Clock基因突變的小鼠（Clockml/ml）隨著年齡的增長，會出現食欲亢進、脂質代謝失調、肝脂肪變性、高甘油三酯血癥等代謝異常表現，提示CLOCK基因節律性表達的破壞極有可能擾亂肝脂質的代謝過程[17]。

2.1.3""""" NR1D1amp;NR1D2基因脂質在肝臟的異位沉積被視為NASH早期發展的關鍵病理機制。REVERB蛋白作為細胞內轉錄因子的核受體超級家族成員，是參與生物鐘調節的關鍵因子。其可以通過抑制脂肪生成酶，例如固醇調節兀件結合蛋白1c（sterol regulatory element-binding protein 1，SREBP1c），減少肝脂質沉積[18]。

REVERB分為兩種亞型：REVERBα和REVERBβ，分別由NR1D1、NR1D2基因編碼，其中REVERBβ的作用機制暫不明確。REVERBα作為轉錄抑制劑，可直接抑制胰島素誘導基因2（insulin induced gene 2，INSIG2）的轉錄，間接控制SREBP的表達。SREBP1c作為SREBP在肝臟的主要表達亞型，控制脂質的從頭合成，其過表達被視為肝脂質沉積的危險因素[10]。

有研究[18]表明，特異性敲除肝臟Reverb基因的小鼠表現出血漿游離脂肪酸水平升高，其比野生型小鼠更易發展為NAFLD。提示肝臟Reverb基因在NAFLD發展過程中極有可能起到保護作用。

2.1.4""""" RORA基因""" RORα參與調節脂質代謝相關基因的表達。具體表現為RORα可激活AMP活化蛋白激酶（AMP-activated protein kinase，AMPK），促進脂肪酸β氧化，減少脂質的沉積[19]。臨床研究[19]發現NASH患者肝臟中RORα水平較低，進一步提示RORα表達水平降低與NASH發展密切相關。未來可深入探討RORα激動劑是否可有效降低肝臟的脂質沉積水平。

2.2" 時鐘基因及其相關蛋白參與調節肝臟炎癥的發生、發展（圖3）

2.2.1""""" BMAL1基因" ROS是炎癥性疾病進展中的關鍵信號分子。肝時鐘基因BMAL1主要通過抑制肝組織ROS積累，參與預防肝臟炎癥的發生。體內實驗[20-21]發現，NAFLD小鼠肝內Bmall表達水平降低，與ROS、H2O2水平呈負相關；同時，體外實驗[13]證實HepG2細胞內BMAL1表達水平降低，將削弱藥物對ROS的抑制作用。以上實驗結果表明肝內細胞ROS水平受到BMAL1的抑制，且藥物對ROS的抑制作用很可能通過激活BMAL1實現。

2.2.2""""" NR1D1amp;NR1D2基因炎癥小體NLRP3作為機體固有免疫系統的組成成分，其激活促進NASH的發展。REVERB具有抑制IL-1β、IL-6、TNF-α以及NLRP3等促炎癥因子的作用，可作為NLRP3的直接調節因子，抑制NLRP3的激活[22]。因此REVERB激動劑有望作為NLRP3介導疾病（如NASH）的治療手段。

在NASH發生時，輔助性T淋巴細胞17（Th17）浸潤肝組織，產生大量的IL-17A，這與肝臟的炎癥和纖維化進展有關。RORγt作為IL-17的主要轉錄因子，參與調控Th17細胞分化以及IL-17A的激活。有學者[18]提出，REVERB可以通過與RORγt競爭結合底物——RORE，從而抑制Th17細胞活化及其后續信號通路，進而治療NASH。

2.2.3""""" RORA基因""" 體內實驗[23]發現，髓系巨噬細胞Rora基因敲除的小鼠更易被高脂飲食誘導為NASH，提示RORA基因在NASH發展中可能起到保護作用；該研究也證實了RORA對炎癥的抑制作用。一方面，RORa可通過抑制巨噬細胞中TNF-α和IL-1β的產生，有效預防肝臟炎癥發生、發展[23]；另一方面，RORα還可通過增強肝細胞、Kupffer細胞內超氧化物歧化酶2（superoxide dismutase 2，SOD2）及谷胱甘肽過氧化物酶（glutathione peroxidase 1，GPx1）等ROS清除酶mRNA的水平，減少肝內細胞內ROS，從而抑制脂質過氧化[24]。

除此之外，線粒體功能障礙與肝細胞死亡、肝脂肪變性也密切相關。RORα可以通過BCL2/腺病毒E1B 19 kD相互作用蛋白3和PPARγ共激活因子1a（PPAR- γcoactivator 1 alpha，PGC-1α）共同維持肝細胞線粒體的正常結構、功能和數量，保護線粒體呼吸復合物的完整性和活性，減少裂變，促進其再生，從而減輕線粒體自噬和氧化應激[7]，預防肝脂肪變性發生。

近年來越來越多的研究者開始重視時鐘基因在NASH中的致病或防御作用，如RORα不僅可以通過促進脂肪酸氧化減緩肝內脂質的堆積，還可以通過抑制ROS水平實現對肝細胞損傷的保護作用。且臨床數據[23]顯示，NASH患者中RORα水平降低，這一數據不僅支持前期體內外實驗提出的RORα在NASH發病過程中的保護機制，同時也提示RORα可以作為診斷和監測NASH發展的生物標志物。此外，RORα參與NASH發病過程中的時鐘蛋白還有望成為靶向治療NASH的藥物靶點。

然而，目前大多數的研究都關注于時鐘基因作為上游調節因子參與調節脂質沉積、炎癥發展，如REVERBA可以通過INSIG2間接調節SREBP1c的表達水平，控制脂質在肝臟的沉積情況。但下游因子對上游時鐘基因也存在反向的調節作用，如AMPK可以通過磷酸化作用抑制CRY1、PER的轉錄，這一反向調節可能會進一步加重NASH的發展。目前針對反向調節作用的研究仍處于起步階段，相信隨著對下游因子反向調節作用的深入研究，未來可為NASH的靶向藥物研究提供新的方向。

3"""" 時鐘基因相關的NASH治療藥物

3.1" 時鐘基因激動劑

3.1.1""""" SR9009（REVERB全激動劑）""" REVERB核受體幾乎在所有細胞中表達，其中以肝、骨骼肌以及脂肪組織表達水平為最高。其在調節肝臟代謝相關基因的晝夜節律性表達方面起到了重要的作用[25]。REVERB作為轉錄抑制因子，調控機體內多種生理過程，其可以間接控制肝細胞內核SREBP1c的水平，從而調控肝臟的脂質代謝；也可以抑制促炎癥因子、炎癥小體的激活，阻止肝臟炎癥的發展。因此靶向激活REVERB治療NASH具有極大的可行性。

動物實驗[26]顯示，在高膽固醇、高脂肪飲食構建的NASH小鼠模型中，空腸、回腸及結腸的REVERB表達降低，腸道通透性也伴隨減小。在接受REVERB全激動劑SR9009治療后，小鼠腸道內REVERB節律有所恢復，肝內脂質積累、胰島素抵抗、炎癥及纖維化均有不同程度的減輕。但該實驗并非聚焦于肝時鐘基因的改善，而是腸道晝夜節律的恢復，體現了不同器官之間的外周時鐘存在著交互作用；這種肝、腸時鐘的“相互溝通”可能進一步促進了NASH病理表現的減輕。時鐘基因靶向激動劑的作用范圍不僅局限于病變發生的肝臟，還能作用于紊亂的腸道晝夜節律[26]，考慮到肝臟與膽囊、胰島的密切關系，未來可深入研究這些器官在接受激動劑治療后的晝夜節律變化以及該變化與NASH緩解之間的聯系。

3.1.2""""" 川陳皮素（ROR激動劑）" RORα可以通過激活AMPK，促進脂肪酸氧化，同時還可以降低肝臟ROS水平以及抑制Kupffer細胞產生IL，進而起到對NASH的防治作用。

川陳皮素是一種天然存在的多甲氧基黃酮，可從柑橘皮分離獲得。其與ROR的配體結合域結合，激活ROR。動物實驗[27]證實，在飲食誘導肥胖的小鼠中，川陳皮素治療不僅顯著抑制了小鼠體質量的增加，還顯著提高了小鼠氧耗，降低了血糖水平。

3.1.3""""" 黃連素（CLOCK、BMAL1激動劑）" 黃連素作為一種傳統中藥，具有抗氧化、抗炎及抗胰島素抵抗作用。體內外實驗均證實黃連素可以通過增強CLOCK、BMAL1的表達水平，恢復氧化還原反應穩態，緩解代謝性疾病[13]。

部分傳統中藥在代謝性疾病中具有明顯的臨床緩解療效，但因其作用機制不明確，較少被推薦用于常規治療。Ye等[13]的研究發現為中藥作用機制的探索提供了新思路，亦使如黃連素類的傳統中藥有望被推薦用于NASH的臨床防治工作中。

3.2" 時鐘基因下游調節蛋白激動劑及抑制劑

3.2.1""""" A-769662和水楊酸鹽（AMPK激動劑）自噬是肝臟重要的代謝途徑，自噬失衡與脂質異位沉積和線粒體損傷密切相關[28]，在NASH中起病因學作用。AMPK作為肝臟富含的代謝調節分子[29]，參與自噬通路調節，在饑餓狀態下被激活，增強自噬起始激酶——Unc-51樣自噬激活激酶1的活性。

由于AMPK活性被發現在NAFLD、NASH患者中降低，激活AMPK治療NAFLD、NASH成為了臨床藥物研究的新方向。隨著研究進展，現已明確AMPK可通過AMPK- SREBP1c-lipin-1軸等機制發揮對NASH的治療作用[30]，但目前未有文獻提及AMPK療效與晝夜節律的關聯。

AMPK可以通過磷酸化修飾作用使得時鐘基因蛋白CRY1和PER結構不穩定湛至失活[30-31]。其中PER2可以通過直接抑制肝組織中PPARα、PPARγ以及REVERBA的轉錄水平[31]，促進脂質在肝臟的異位沉積。AMPK對PER水平的這種負性調節作用，可能在正常生理狀態下發揮保護作用。

AMPK激動劑可能通過抑制上游時鐘基因蛋白PER2的轉錄實現對NASH的緩解。后續可以開展體內外實驗，觀察敲除肝時鐘基因PER是否會降低AMPK激動劑的治療效果。

3.2.2""""" SRT2183[沉默信息調節因子2相關酶1（silent information regulator factor 2-related enzyme 1，SIRT1）激動劑]"" Toll樣受體（TLR）識別病原體相關分子模式以及核因子-κB（NF-κB）激活是炎癥發展中的重要通路[32]。TLR分布于肥大細胞上，識別脂多糖等，進一步激活NF-κB通路，誘發炎癥發展。SIRT1是重要的代謝傳感器和控制器，其可以通過干擾NF-κB信號通路、脫乙酰化SREBP1c及核因子類胡蘿卜素2相關因子2等轉錄因子，改善氧化應激和炎癥反應[33-34]。研究[33]表明，小鼠肝臟內SIRT1的表達缺失加速肝臟炎癥發展，而過表達則對于肝臟產生保護作用。

已證實SIRT1激動劑可能通過AMPK/SIRT1/SREBP1c/PPARγ通路[35]或SIRT1/PI3K/AKT/mTOR[36]通路發揮作用。但目前尚未有研究提出SIRT1是否可以通過調節時鐘基因表達實現對NASH的治療作用。

SIRT1可與CLOCK/BMAL1二聚體結合，調節下游時鐘基因如PER的表達，同時其還能夠通過脫乙酰化作用調節BMAL1的表達水平[37]。結合時鐘基因BMAL1、PER2在NAFLD發展過程中的保護、致病作用，SIRT1激動劑是否能通過恢復BMAL1、PER的正常表達水平發揮療效，有待進一步探究。

3.2.3""""" SZ0232——微粒體前列腺素E合成酶2（microsomal prostaglandin E synthase-2，mPGES-2）抑制劑 mPGES-2是一種雙功能酶，與谷胱甘肽和血紅素共同形成復合物。最新研究[38]發現，肝細胞特異性mPGES-2缺陷對小鼠肝脂肪變性、炎癥和纖維化具有很強的保護作用。

接受mPGES-2抑制劑SZ0232治療的高脂喂養小鼠、db/db小鼠和蛋氨酸膽堿缺乏飲食喂養小鼠的肝脂質積累、肝臟炎癥和肝纖維化均得到不同程度緩解，同時肝內與脂質吸收、生成以及纖維化發展相關的基因表達水平亦下降[38]。

有研究者[39]提出，mPGES-2復合物內血紅素可增加REVERBA介導的特定靶基因的轉錄抑制。但mPGES-2抑制劑與REVERBA聯合治療機制在NASH緩解中發揮的作用仍需進一步的動物實驗、臨床試驗探索。

3.3" 潛在的藥物治療靶點——CREBH 游離脂肪酸水平是誘發NAFLD疾病進展的危險因素，過量的脂肪酸加強肝臟脂肪酸的氧化，促進超氧化物的生成，進一步加重線粒體的工作負擔[40]，其中，線粒體功能紊亂被視為高脂飲食導致肝細胞損傷的主要機制。線粒體通過招募溶酶體吞噬移除已損害的線粒體片段，防止線粒體凋亡發生，此過程被稱為線粒體自噬，是延緩NAFLD進展的重要機制[40]。研究[41]發現細胞外信號調節激酶（extracellular signal-regulated kinase，ERK）-環AMP響應元件結合蛋白（cyclic AMP responsive element binding protein，CREB）信號通路作為上游信號分子，調節線粒體自噬的激活，其也被證實在高脂狀態下參與保護肝細胞及線粒體穩態。

CREB作為肝臟富含的轉錄因子，促進肝糖異生[42]，除此之外，其也是細胞內脂質合成的重要調節因子。CREBH作為肝臟特異性的CREB，通過激活負責脂質氧化、分解的基因，維持脂質代謝平衡[43]。一方面，CREBH受到時鐘基因BMAL1的調節，具體表現為BMAL1通過AKT/GSK-3B信號通路調節CREBH的蛋白水解程度[38]；另一方面，CREB還能上調上游時鐘基因PER1轉錄水平[44]。

既往已有實驗[40]表明分子SIRT3能夠通過ERK- CREB通路促進線粒體自噬，證實了激活ERK-CREB緩解NAFLD的可行性。考慮到CREBH在細胞代謝和時鐘基因中的雙向調節功能，未來研究可探究靶向激活CREBH治療NASH的可行性。

針對時鐘基因下游調節蛋白如AMPK、SIRT1以及mPGES-2的激動劑或抑制劑對NASH的療效已被大量研究所證實，但其作用機制尚在探索過程中。近來有部分研究證實調控脂質代謝和炎癥發展的因子既受到肝時鐘基因的調節，又可通過磷酸化等作用調控肝時鐘基因的蛋白水平。提示針對此類有反向調節作用蛋白的激動劑或抑制劑，其藥物機制可能與時鐘基因相關。后續研究可以開展基因敲除實驗，觀察敲除上游時鐘基因后，下游因子靶向藥物的療效是否減弱或消失，從而進一步明確時鐘基因在NASH防治中的作用。

同時，基于時鐘基因可以直接或間接調控下游控制脂質從頭合成、脂肪酸氧化蛋白的表達水平，未來可開展藥物聯合使用研究，如探究聯合使用上游時鐘蛋白激動劑（REVERBA激動劑）和下游蛋白激動劑（AMPK的激動劑）能否增加對NASH的治療作用。

4"""" 小結

綜上所述，肝臟晝夜節律紊亂影響著大部分與肝內脂質代謝、肝臟炎癥相關的基因表達，在NASH中發揮病因學作用。脂質代謝方面，可表現為NASH患者中BMAL1 水平降低，抑制了內源性甘油三酯的轉運，使得脂質在肝臟異位沉積；炎癥激活方面，轉錄負性調節劑REVERB水平失調，激活炎癥小體NLRP3，誘導NASH發展；肝內RORα水平降低，促使ROS清除酶活力減低，導致ROS 積聚于肝內細胞等。

隨著研究進展，晝夜節律在代謝性疾病中的新致病機制日新月異，但僅有少量直接激活或抑制時鐘基因的藥物被提出，且目前暫無研究探索靶向時鐘基因下游蛋白藥物的治療機制是否與其反向調節時鐘基因的表達有關。

深入探究時鐘基因在NASH中的防治機制，及下游蛋白對時鐘基因的反向調節作用，對尋找NASH的有效治療靶點具有重要意義。

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