３個廠家４種口蹄疫疫苗對塔河馬鹿免疫效果評價

摘要：為進一步做好塔河馬鹿口蹄疫免疫工作，找到最佳免疫程序。采用３個廠家４種口蹄疫O型、A型二價滅活疫苗和不同免疫程序對未免疫過的塔河馬鹿進行免疫試驗，采用液相阻斷ELISA檢測其免疫抗體。結果發現：使用Ｃ廠的口蹄疫O型、A型二價滅活高端疫苗免疫2次就可以使抗體效價達到合格；使用B、C廠的口蹄疫O型、A型二價滅活統采疫苗免疫3次可使抗體效價達到合格；Ａ廠的口蹄疫O型、A型二價滅活統采疫苗免疫３次不合格（除成年公鹿）。本試驗為鹿場口蹄疫疫苗免疫程序的提供參考。

關鍵詞：塔河馬鹿；口蹄疫疫苗；免疫評估

塔河馬鹿為世界上唯一棲息在荒漠中的馬鹿亞種，分布在新疆塔里木河流域。新疆兵團第二師鐵門關市為最大的養殖基地。2020年農業農村部規定馬鹿為特種家畜，納入家畜管理，需免疫口蹄疫疫苗。口蹄疫是當今世界上最為嚴重的家畜傳染病之一，危害豬、牛、羊、鹿等偶蹄類動物[1]，該病傳播迅速，發病率高，是世界動物衛生組織（WOAH）規定必須報告的傳染病之一，為一類動物疫病。該病不但引起幼畜死亡，生產性能下降，而且嚴重影響家畜及畜產品流通和貿易活動。目前中國沒有鹿專用的口蹄疫疫苗，故本試驗選用牛羊的口蹄疫疫苗進行試驗，通過對比分析3個廠家4種疫苗的抗體水平以及評價疫苗免疫效果，為鹿場口蹄疫疫苗免疫程序制定提供參考。

1 材料和方法

1.1 鹿的選擇

母鹿共240頭，其中2歲以上成年母鹿120頭，70日齡左右雌性仔鹿120頭。公鹿共240頭，其中2歲以上成年公鹿120頭，70日齡左右公仔鹿120頭。以上鹿均健康且未免疫過口蹄疫疫苗。

1.2 主要試劑

疫苗：A、B、C 3個廠家生產的口蹄疫O型、A型二價滅活統采苗以及C廠的口蹄疫O型、A型二價滅活高端商品苗。

檢測試劑：蘭獸研O型口蹄疫液相阻斷ELISA抗體檢測試劑盒檢測。

1.3 試驗方法

1）小群試驗。采用吹管肌肉注射10%鹽酸賽拉嗪注射液1 mL/只對70日齡左右的20只（公母各半）斷奶仔鹿進行麻醉，肌肉注射1.5 mL口蹄疫O型、A型二價滅活疫苗，肌肉注射3%鹽酸苯噁唑注射液2 mL解除麻醉，觀察應激反應情況；采用吹管肌肉注射10%鹽酸賽拉嗪注射液5 mL/只對20頭（公母各半）2歲以上成年鹿進行麻醉，肌肉注射2 mL口蹄疫疫苗，肌肉注射3%鹽酸苯噁唑注射液10 mL解除麻醉，觀察應激反應情況。對出現應激反應的肌注腎上腺素或地塞米松急救。

2）正式實驗。①仔鹿免疫和采樣：吹管肌肉注射10%鹽酸賽拉嗪注射液1 mL/只對70日齡左右斷奶仔鹿進行麻醉，無菌頸靜脈采血3 mL，肌肉注射1.5 mL口蹄疫疫苗，肌肉注射3%鹽酸苯噁唑注射液3 mL/只解除麻醉，觀察鹿反應，分別于第1天采血檢測O型口蹄疫抗體和第1次免疫、第31天采血檢測和第2次免疫、第61天采血檢測和第3次免疫、第241天采血檢測。血樣室溫靜置2 h后，離心收集血清；②成年鹿免疫和采樣：采用吹管肌肉注射10%鹽酸賽拉嗪注射液5 mL/只對成年鹿進行麻醉，無菌頸靜脈采血3 mL，肌肉注射2 mL口蹄疫疫苗，肌肉注射3%鹽酸苯噁唑注射液10 mL/只解除麻醉，觀察鹿反應，分別于第1天采血檢測O型口蹄疫抗體和第1次免疫、第31天采血檢測和第2次免疫、第61天采血檢測和第3次免疫、第241天采血檢測。血樣室溫靜置2 h后，離心收集血清。

分組：每組鹿30頭，共16組，分別使用A、B、C廠家4種疫苗。

1.4 檢測方法

按照試劑盒說明書對采集血清進行O型口蹄疫液相阻斷ELISA抗體檢測。

判定標準：O型口蹄疫免疫抗體效價＞27為陽性，陽性率70%以上為合格。

1.5 數據處理：運用統計軟件SPSS 19.0對數據進行分析。

2 結果

2.1 小群試驗

1頭仔鹿和1頭成年鹿出現注射部位紅腫情況，1天后消失。1頭鹿仔鹿注射出現厭食、精神不振的情況，第2天恢復正常。其余未見不良反應。

2.2 O型口蹄疫抗體結果

免疫次數比較：第1次免疫后30天所有鹿抗體效價不合格（陽性率18.3%）；第2次免疫后30天抗體效價不合格（陽性率61.9%，顯著高于第1次）；第3次免疫后抗體效價合格（陽性率81.0%，顯著高于第1、2次）；241天后抗體效價不合格（陽性率66.9%）。雌性仔鹿第1次免疫后抗體效價陽性率12.5%和成年母鹿差異不顯著；雌性仔鹿第2次免疫后抗體效價陽性率56.7%，顯著低于成年母鹿65.8%；第3次免疫后均合格，效價陽性率差異不顯著。公仔鹿第1次免疫后抗體效價陽性率22.5%和成年公鹿23.3%差異不顯著；公仔鹿第2次免疫后抗體效價陽性率56.7%顯著低于成年公鹿的68.3%；第3次免疫后均合格，效價陽性率差異不顯著。

不同廠家比較：對雌性仔鹿和成年母鹿：第1次免疫3個廠家4種疫苗抗體效價均不合格；第2次免疫后只有C廠家高端苗抗體效價合格，分別達到76.7%和80.0%，均顯著高于A、B、C廠家統采苗；3次免疫后A廠家疫苗抗體效價不合格，其他廠家均合格，抗體效價在70%以上；免疫第241天后B、C廠家抗體效價均合格。對公仔鹿和成年公鹿：第1次免疫3個廠家4種疫苗抗體效價均不合格；第2次免疫后只有C廠家高端抗體效價合格，達到73.3%、83.3%，公仔鹿C廠家高端苗顯著高于A、C廠家統采苗，成年公鹿C廠家高端苗顯著高于A、B、C廠家統采苗；第3次免疫后公仔鹿除A廠家疫苗抗體效價不合格外，其他所有疫苗抗體效價均合格且B、C廠家顯著高于A廠家。詳見表1。

3 討論

1）本次實驗使用口蹄疫O型、A型二價滅活疫苗對塔河馬鹿進行免疫，3只鹿出現應激狀況，應激率0.75%，第2天均恢復正常，一方面疫苗本來就有應激，另一方面可能不是鹿專用疫苗。

2）塔河馬鹿野性比較強，每次保定需要使用吹管肌肉注射麻藥才能進行保定。本次實驗使用疫苗免疫，仔鹿抗體陽性率顯著低于成年鹿，可能由于麻醉對成年鹿應激較小，對仔鹿應激較大有關。

3）本實驗疫苗免疫效果C廠家高端疫苗免疫2次就可以達到抗體效價合格，B、C廠家統采苗免疫3次以后抗體效價就合格，A廠家不合格（除成年公鹿），可能因為不是鹿專用疫苗，要多次免疫才合格，A廠家疫苗對塔河馬鹿不敏感有關。

4）本次試驗對塔河馬鹿推薦使用口蹄疫O型、A型二價滅活高

端疫苗免疫2次或使用B、C廠家統采疫苗免疫3次。■

參考文獻：

[1] 王雪偉，馬亞賓，賈琳，等．犢牛口蹄疫O型滅活苗兩種不同免疫程序的免疫效果比較[J].黑龍江畜牧獸醫，2018（6）：160-163.

[2] 田來明，權心嬌，李男，等.梅花鹿口蹄疫病及繼發病癥的綜合防制措施[J].

吉林畜牧獸醫，2021，42（16）：64-65.