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非洲豬瘟防治與治療技術分析

2024-10-08 00:00:00陳華瓊
安徽農學通報 2024年18期

摘要為進一步降低非洲豬瘟傳播風險,提高預防能力,加強治療手段,本文對該病常用檢測技術、具體防治措施以及治療技術進行總結分析。常用檢測技術包括早期診斷、分子生物學檢測以及血清學檢測,具體防治措施主要有消毒防護、豬場日常管理、市場監管、防控意識以及疑似病害處理等,治療技術包括疫苗研發與藥物治療技術。以上分析為生豬養殖業的相關人員提供參考。

關鍵詞非洲豬瘟;檢測手段;防治手段;治療技術

中圖分類號S851.33文獻標識碼A文章編號1007-7731(2024)18-0037-05

DOI號10.16377/j.cnki.issn.1007-7731.2024.18.009

Technical analysis of prevention and treatment of African swine fever

CHEN Huaqiong

(Supervision Office of Agricultural and Rural Bureau of Taihu County, Anqing 246400, China)

Abstract In order to further reduce the risk of African swine fever transmission, improve prevention capacity and strengthen treatment. In this paper, the common detection techniques, specific prevention measures and treatment techniques of this disease were summarized and analyzed. Common detection techniques included early diagnosis, molecular biological detection and serological detection. Specific prevention measures mainly included disinfection protection, daily management of pig farms, market supervision, prevention and control awareness and treatment of suspected diseases. Treatment technologies include, vaccine research and development and drug therapy technology were summarized. The above analysis provided references for the relevant personnel of pig farming industry.

Keywords African swine fever; detection means; control means; therapeutic techniques

非洲豬瘟(African swine fever, ASF)是由非洲豬瘟病毒(African swine fever virus, ASFV)誘發的一種具有高度傳染性的病毒性疾病,嚴重影響豬肉生產與貿易。近年來,對于ASF的防治與治療技術研究逐漸被重視,Aliro等[1]采用早期診斷技術、生物安全措施以及疾病監測等對ASF進行預防,結果表明,通過基因編輯技術增強了豬的抗病性,暫沒有形成有效的防控體系。黃文海[2]通過分析ASF臨床鑒別診斷及防治措施,指出做好鑒別診斷,以便及時采取正確的防治措施,是降低該病對生豬養殖產業的影響的有效手段之一。本研究對ASF檢測技術手段、防治與治療技術手段進行總結分析,以促進生豬養殖產業的健康發展,為該病防治提供參考。

1 非洲豬瘟檢測技術分析

1.1 早期診斷技術

早期診斷主要分為實驗室檢測和現場快速檢測技術。實驗室檢測方法主要基于分子生物學技術,準確檢測和鑒定ASFV的特定DNA序列,但通常需要專業的設備和較長的處理時間,與之相對的是現場快速檢測技術,例如便攜式PCR儀器和免疫層析法條帶測試,Wen等[3]采用重組酶聚合酶擴增技術與側向層析技術相結合的方法,研發了ASFV核酸檢測量子點試紙條;李昱昊[4]利用ASF常見抗原與特定片段結合特性,建立了一種新型檢測ASFV抗體膠體金試紙條方法。以上方法的建立為現場提供快速、初步的診斷結果,其靈敏度和特異性略低于實驗室方法,但其效率相對較高,利用快速檢測工具識別初期疫情并進行隔離至關重要,有助于限制疾病的傳播。

1.2 分子生物學檢測技術

在分子生物學檢測技術中,聚合酶鏈反應技術是最常用的方法之一,該技術通過特異性擴增ASFV的DNA片段,快速準確地檢測出病毒,哈登楚日亞等[5]利用重組酶聚合酶擴增技術,針對(p72)基因設計引物和探針,建立了實時熒光重組酶聚合酶擴增技術方法。PCR技術具有高靈敏度和特異性,即使在病毒載量極低的樣本中也能進行有效檢測,極大地提高早期診斷的準確率。潘會賢[6]分析認為,除了常規PCR,實時定量PCR技術能提供病毒負荷的定量信息,有助于評估病情的嚴重程度和監測疫情的發展趨勢,序列分析可進一步擴展分子生物學的檢測范圍,通過比較病毒基因組的序列差異,確認病原體的種類,追蹤病毒的傳播路徑和變異情況,為病情防控和疫苗設計提供重要的分子流行病學信息,極大地提升了對ASF的監控、研究和防控能力。

1.3 血清學檢測技術

在ASF的診斷過程中,血清學檢測技術是一種重要的輔助手段,主要用于監測豬群中ASFV抗體的存在,這類檢測包括酶聯免疫吸附試驗(ELISA)、間接熒光抗體測試和血凝試驗等方法。王秀[7]對非洲豬瘟實驗室檢測技術研究進展進行綜合分析,指出ELISA由于其高度的自動化和標準化,被廣泛應用于大規模篩查過程中,能夠提供定量分析,對ASFV特異性抗體有良好的敏感性和特異性。通過血清學檢測,即使是無癥狀感染,也能檢測到感染病毒的豬只,對控制ASF傳播具有重要意義。實踐應用中,血清學檢測通常不適用于早期診斷,因為ASFV的抗體一般在感染后的數周內才出現[8],因此該檢測技術更多地被用作病情調查和監測程序中的一部分,以評估免疫響應和疫苗接種效果。

2 非洲豬瘟防治措施分析

2.1 加強消毒防護

ASFV具有較強的環境抵抗能力,能在不同的物理和化學條件下存活較長時間,因此選擇正確的消毒劑和方法尤為重要。選擇消毒劑時確保其對ASFV有明確的殺滅效果,廣泛使用的消毒劑包括次氯酸鈉、碘伏和甲醛等。崔修軍[9]探析了豬場ASF防控消毒技術,認為在具體實施消毒工作的過程中,必須采取全面的消毒方案,包括對養殖場的圍墻、圈舍、飼料倉庫、排泄物處理區域以及運輸工具等進行定期消毒,特別是對于進出場地的車輛和人員,要求通過消毒池或消毒通道進行嚴格的消毒程序。針對不同的場所和物品,養殖人員要選擇合適的消毒方式,如噴霧、擦拭和浸泡等。劉輝[10]總結了ASF臨床鑒別診斷及防治措施,認為對于固定設施和大面積的場地,采用噴霧方式較為方便高效;對于工具和設備等可移動物品,可采用浸泡或擦拭的方式進行消毒。黃文波[2]強調了消毒劑的安全使用和存儲,定期更換和輪換消毒劑,避免病毒產生抗藥性,同時對消毒效果進行評估,根據評估結果調整消毒策略,確保消毒措施的有效性。

2.2 加強豬場日常管理

劉輝[10]研究指出,豬場的日常管理對ASF防治有重要意義,提出建立并執行入場消毒制度,為進入豬場的人員和車輛設置消毒通道,確保所有進入場地的人員及物品都進行嚴格的消毒程序,可有效控制ASF的傳播。在人員管理方面,需要對豬場工作人員進行專業培訓,增強工作人員對ASF的認識,規范操作流程,避免通過人員帶入病源,并限制外來人員訪問,必要時進行健康檢查和記錄追蹤。在飼料和水源管理方面,肖錦紅等[11]綜述了ASF背景下規模化豬場飼料生產管理關鍵技術,表明ASFV在部分飼料組分中(如大豆粉、豆粕和膽堿等)可維持較長時間的致病性。因此使用經過檢測的無病原的飼料,防止污染飼料引發病情,對ASF的預防具有重要意義。確保供給豬只的水源安全、清潔,定期對飼料與水源進行檢測,此外,建立健全疾病監測系統,一旦發現疑似病例即刻隔離并上報,以便快速應對可能的病情擴散。

2.3 做好市場監管工作

由于市場存在不確定風險,導致其成為ASFV潛在傳播的高風險區域之一,因此要進一步加強活豬及其產品的來源可追溯系統建設,謝希玲等[12]詳細分析了ASF發生的原因,提出加強建立可追溯系統可及時精準追根溯源,封鎖疫點,定點清除,將病情控制在小范圍內,防止ASF的大暴發、大流行。確保所有在市場上銷售的豬肉和豬產品都來源于無疫區,并且有明確的供應鏈記錄,同時需要協調養殖戶、運輸商、屠宰場以及零售商之間的信息共享,確保信息更加透明、公正和規范。實行市場準入制度,僅允許經過認證的、采取有效生物安全措施的養殖場所和企業進入市場,定期對進入市場的生豬進行隨機抽檢,以及禁止銷售來自疫區的豬只和豬肉產品。建立快速響應機制,一旦發現市場內有疑似感染的情況,立即進行封鎖、樣品采集和檢測確認,及時啟動應急預案,徹底清潔消毒,同時對感染源頭進行追蹤與隔離。

2.4 增強防控意識

增強防控意識。要求從業者、養殖戶及相關人員深刻理解ASF的嚴重性及其對相關產業造成的不利影響,進一步增強危機意識。黃文波[2]認為正確認識ASF的危害,是增強對該病的防控意識的基礎。通過舉辦教育培訓班、研討會和網絡課程等形式,進一步普及ASF的基本知識、傳播途徑、預防和控制方法。廉子木[13]研究指出,進一步增強參與者對病情的認識和緊迫感,可促使其在實際工作中更加積極地采取防控措施。通過現代信息技術,利用媒體和社交平臺宣傳ASF的防控信息,包括病情動態、防控措施和成功案例等,可在迅速擴大影響范圍的基礎上,進一步增強公眾的防控意識。定期發布防疫指南和手冊,為養殖戶提供實用的防控技術和方法,通過建立病情報告和響應系統,鼓勵養殖戶和公眾積極報告疑似病情,以便及時采取措施防止疫病擴散。養殖戶和從業者可定期參加由獸醫部門或專業機構組織的防控技術培訓,王建華等[14]研究指出,技術培訓可改善養殖戶對相關規定的重視和了解程度,促進養殖戶遵守生物安全行為規范。

2.5 處理疑似病例

在ASF防控中,對疑似病例的處理是阻斷病毒傳播和維護生物安全的關鍵環節之一,一旦出現疑似ASF病例,必須迅速采取具體措施來進行有效管理。根據和建英[15]對疑似非洲豬瘟病毒陽性病例的應急處置經驗,對于疑似感染的豬只需要迅速隔離,將疑似病例轉移到預先設定的遠離健康豬群并有嚴格的生物安全措施的隔離區域,隔離期間嚴格監測疑似病例的健康狀況,并記錄所有相關的臨床癥狀,之后在進行疾病診斷的過程中,立即采集疑似病例的血液、組織樣本,送往具備ASF檢測能力的實驗室進行檢驗,采樣和運輸過程中遵循嚴格的生物安全協議,以防止樣本污染和病毒的潛在擴散。一旦被確診為ASF,立即執行撲殺并進行無害化處理,所有確診的病例及其密切接觸的豬只均采取化學或物理方法進行無害化處理,例如焚燒或深埋,處理過程中要確保病原體被徹底消滅,防止病毒通過土壤或水源再次傳播[16]。此外,對于受到該影響的養殖場區域,必須進行徹底的清潔和消毒工作,包括豬舍、運輸工具和飼養設備等所有可能被病毒污染的地方,使用經批準的消毒劑按照制造商的指導方針進行使用,以確保消毒效果。最后加強疫情監測和后續追蹤,對于經歷過ASF的養殖場,需要在一定時期內繼續進行疾病監測,確保該病得到完全控制,同時對病情處理過程中的所有活動和結果進行記錄,為未來的病情預防和控制提供參考。

3 非洲豬瘟治療技術分析

3.1 疫苗研發技術

3.1.1 滅活疫苗 滅活疫苗基本原理是通過使用經過特定處理的ASFV,這種處理能夠殺死或滅活病毒,使其失去感染性,但仍能激發宿主動物的免疫反應[17]。周鑫韜[18]研究表明,在制備滅活疫苗之前,需要選擇一株適宜的ASFV毒株作為疫苗株,該毒株應具備良好的免疫原性和低毒性,采用物理或化學方法滅活病毒。常見的滅活方法包括使用甲醛、β-丙內酯或紫外線照射等,隨后將滅活的病毒與適當的佐劑進行混合,以增強免疫反應。通過臨床試驗,驗證疫苗的安全性、免疫原性和保護效果。盡管滅活疫苗在理論上是一種安全有效的防控手段,但在ASF疫苗研發中面臨著一些挑戰,楊佳萍等[19]綜合分析了ASF疫苗和病原學診斷技術研究進展,表明滅活疫苗不能提供足夠長期的保護,以及在高度變異的ASFV毒株面前效果有限。疫苗生產成本、穩定性及其大規模生產和應用中的可行性也是研發過程中需要考慮的因素。

3.1.2 重組疫苗 在ASF治療技術中,重組疫苗開發是一個前沿領域,主要利用分子生物學技術,針對ASFV的特定基因或蛋白進行設計,重組疫苗通過將ASFV的一個或多個免疫原基因插入無害的載體病毒或細菌中,以激發宿主動物的免疫反應,從而產生針對ASFV的免疫保護[19]。具體方法包括使用嗜熱鏈球菌、腺病毒或皰疹病毒等作為載體,如張霽輝[20]以大腸桿菌熱不穩定腸毒素B亞基作為佐劑,與ASFV的CD2v蛋白和p49蛋白共同構建的重組核酸疫苗,具有良好的免疫原性。通過基因工程技術將ASFV的免疫原基因(如p72蛋白、p54蛋白等)插入載體的基因組中,然后將這種重組病毒或細菌引入豬體,在豬體內生成ASFV的免疫原蛋白,從而誘發豬只產生針對這些蛋白的免疫反應。這種免疫反應能夠在豬只遇到ASFV時提供保護,減少病毒的復制和傳播。

3.2 藥物治療技術

3.2.1 抗病毒藥物 在抗病毒藥物設計中,一種主要的研究方法是篩選現有的抗病毒藥物庫,尋找能夠抑制ASFV復制和傳播的化合物,如國師榜[21]利用原代豬肺泡巨噬細胞建立了一種抗病毒化合物篩選模型,共篩選到6種對ASFV抑制率大于90%的候選化合物,通過體外細胞實驗和體內動物感染實驗,評估藥物降低ASFV滋生的能力,監測病毒載量的變化,驗證了Brincidofovir對ASFV感染在體外和體內的抑制活性。定向藥物設計通過結構生物學和分子建模設計新的分子,這些分子可以特異性地結合到病毒的關鍵蛋白或酶上,阻斷其功能,從而抑制病毒的生命周期,例如Goulding等[22]研究發現,ASFV的DNA聚合酶和RNA聚合酶的活性位點是藥物研究的潛在靶標,抑制其表達,以阻止病毒的快速復制。

3.2.2 免疫調節劑 免疫調節劑是指能夠調整宿主免疫系統反應的藥物或化合物,以增強機體對ASFV的防御能力。例如,使用干擾素(IFN)可以激活豬只的天然免疫反應,特別是類型Ⅰ干擾素如IFN-α和IFN-β,可有效抑制ASFV復制的效果[23]。此外,實驗中還采用基于Toll樣受體(TLR)激動劑的佐劑,這類佐劑能刺激先天免疫應答并增強疫苗引發的適應性免疫響應。許文杰[24]研究表明,可給豬只注射含有TLR激動劑的佐劑,這些佐劑通過模擬病原體的特定分子模式工作,以激活宿主的免疫細胞,TLR3的激動劑Poly(I:C)能夠模擬雙鏈RNA病毒的遺傳材料,并激發一系列免疫細胞產生抗病毒狀態,以增強宿主細胞對ASFV入侵的抵抗力,降低病毒的復制率,減輕疾病嚴重程度,提高生存率。

3.2.3 支持性治療 支持性治療主要是緩解癥狀、維持生命體征穩定,并降低次生感染風險,以提高生存率和恢復質量。在水分與營養支持方面,需要確保動物有足夠的水分攝入,通過靜脈或皮下注射補充電解質和營養素,尤其是當豬只出現食欲下降或不能自主飲食時進行治療。丁偉洋[25]研究認為,抗生素可以用來預防或治療繼發的細菌性感染,防止因細菌性感染加重豬的疾病狀況,在解熱和抗炎療法中,使用非甾體抗炎藥如布洛芬可控制高熱和減輕炎癥反應,幫助改善豬的整體舒適度和生存機會。

綜上,本文介紹了常用ASF檢測手段,包括早期診斷、分子生物學檢測以及血清學檢測;闡述了ASF的防治手段與治療技術,對于ASF的防治需要重點關注日常消毒、加強市場監管、做好病豬處理和增強防控意識等方面;對于ASF的治療技術應用,重點關注疫苗以及藥物兩個方面。為生豬養殖人員提供參考,以實現對ASF的有效控制,促進生豬養殖業的可持續發展。

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(責任編輯:胡立萍)

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