落葉松枯梢病生防菌的篩選、鑒定及其生物學(xué)特性

摘要：[目的]為獲得落葉松枯梢病的生防菌。[方法]通過對(duì)峙實(shí)驗(yàn)和發(fā)酵液復(fù)篩，篩選獲得對(duì)落葉松枯梢病菌（Neofusicoccum laricinum）具有較強(qiáng)抑制效果的菌株，對(duì)篩選得到的菌株進(jìn)行鑒定，并對(duì)其生物學(xué)特性展開研究。[結(jié)果]篩選得到1株對(duì)落葉松枯梢病病原菌有顯著拮抗作用的土壤真菌T2，結(jié)合形態(tài)學(xué)以及分子生物學(xué)鑒定為鉤狀木霉（Trichoderma hamatum）。其平板對(duì)峙抑菌率達(dá)到74.16％，發(fā)酵液的抑菌率達(dá)到91.29％。發(fā)酵液對(duì)多種植物病原真菌均具有較強(qiáng)的抑菌作用，對(duì)松球殼孢菌、金黃殼囊孢菌、揚(yáng)灰星葉點(diǎn)霉和立枯絲核菌表現(xiàn)出強(qiáng)抑制作用，抑菌率均為92.00％，對(duì)擬枝孢鐮刀菌和楊生褐盤二孢菌的抑茵效果較好，分別為79.67％和62.67％。T2能利用多種碳氮源、有廣泛的酸堿度適應(yīng)能力及較高的致死溫度。[結(jié)論]通過篩選得到的鉤狀術(shù)霉T2對(duì)落葉松枯梢病病原菌的拮抗作用顯著，抑菌譜廣，環(huán)境適應(yīng)力強(qiáng)。本研究可為落葉松枯梢病的防治提供理論研究和基礎(chǔ)。

關(guān)鍵詞：落葉松；Neofusicoccum laricinum；生物防治，鉤狀木霉

中圖分類號(hào)：S432.4 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1001-1498（2024）04-0182-11

落葉松枯梢病于1938年在日本北海道被發(fā)現(xiàn)，該病于上世紀(jì)70年代在我國(guó)東北地區(qū)報(bào)道發(fā)生，日前已擴(kuò)散至內(nèi)蒙古、遼寧、吉林、黑龍江、山東、陜西、甘肅、江蘇、安徽和江西等多個(gè)省份。落葉松枯梢病的病原菌為Neofusicoccum laricinum （Sawada）Y.Hattori＆C Nakash，病菌一般通過傷口潛入，落葉松感病后，嫩梢褪綠逐漸變?yōu)楹诤稚瑥澢麓钩抒^狀，已木質(zhì)化的枝梢感病不彎曲，葉逐漸枯萎脫落，最終生長(zhǎng)停止，嚴(yán)重者形成小老樹或全株枯死。松枯梢病傳播范圍廣、危害嚴(yán)重，給我國(guó)林業(yè)經(jīng)濟(jì)造成重大損失。目前的防治措施有營(yíng)林技術(shù)措施、化學(xué)防治和生物防治。其中化學(xué)防治應(yīng)用廣，效果明顯，但是長(zhǎng)期施用化學(xué)農(nóng)藥，不但會(huì)有帶來(lái)耐藥性病原菌株的風(fēng)險(xiǎn)，還會(huì)提高成本和污染環(huán)境刪。因此，生物防治是目前備受關(guān)注的防治森林病害的有效方法。

根際土壤微生物和植物內(nèi)生菌有巨大的生防潛力。根際是植物根系與土壤物質(zhì)能量交換的場(chǎng)所，在根際土壤微生物與植物的互作中，植物招募有益微生物，這些微生物可以促進(jìn)植物生長(zhǎng)，提高其抗病能力。植物內(nèi)生菌在與植物的長(zhǎng)期共存里，一些內(nèi)生菌可以分泌抗菌物質(zhì)抵抗病菌侵染植物，不同的植物部位，其內(nèi)生菌種類和豐度也存在差異。生防菌可以通過定殖競(jìng)爭(zhēng)作用，拮抗作用，誘導(dǎo)抗性和重寄生等多種作用機(jī)制，抑制或殺死植物病原菌，達(dá)到生物防治的作用，生物防治不僅對(duì)環(huán)境友好、效果突出還價(jià)格低廉。目前科學(xué)界有一些關(guān)于松枯梢病生防菌的研究，蔣萍從松樹針葉上分離篩選松枯梢病拮抗細(xì)菌，篩選出防效達(dá)60％以上的拮抗細(xì)菌。黃潔芳發(fā)現(xiàn)新洋蔥伯克霍爾德菌的代謝物對(duì)松枯梢病菌有拮抗作用。Yun Dai發(fā)現(xiàn)Bacillius purmllus Meyer＆Gottheil對(duì)松枯梢病的防治效果明顯，有效抑制病害發(fā)生。張銘篩選出一種對(duì)松枯梢病原菌有顯著抑制效果的土壤真菌M75，該真菌被鑒定為森吉木霉（Trichoderma songyi M.S.Park.S.Y.Ohamp; Y.WLim）。但是落葉松枯梢病的生防菌目前鮮見報(bào)道。

本研究擬通過對(duì)峙實(shí)驗(yàn)和發(fā)酵液復(fù)篩，篩選獲得對(duì)落葉松枯梢病菌（Neofusicoccum Iaricinum）具有較強(qiáng)抑制效果的菌株，對(duì)篩選得到的菌株進(jìn)行鑒定，并對(duì)其生物學(xué)特性展開研究，為實(shí)際生產(chǎn)應(yīng)用中防治落葉松枯梢病奠定基礎(chǔ)。