血清ANGPTL8、ITLN-1對川崎病患兒冠狀動脈損傷的預測價值

［摘 要］目的 探討血清血管生成素樣蛋白8（ANGPTL8）、凝集蛋白-1（ITLN-1）對川崎病（KD）患兒冠狀動脈損傷的預測價值。方法 選取2020年5月至2023年5月在本院就診的108例KD患兒作為研究組，根據是否發生冠狀動脈損傷分為冠狀動脈損傷組（n=37）與無冠狀動脈損傷組（n=71）；另選取同期體檢健康兒童72例作為對照組。采用雙抗體夾心-酶聯免疫吸附法檢測所有受試者血清炎癥相關指標及ANGPTL8、ITLN-1水平；Pearson法分析冠狀動脈損傷KD患兒血清ANGPTL8、ITLN-1水平與炎癥指標的相關性；評估血清ANGPTL8、ITLN-1水平對KD患兒冠狀動脈損傷的預測價值。結果 冠狀動脈損傷組KD患兒PLT、CRP、IL-6和TNF-α水平明顯高于無冠狀動脈損傷組及對照組（F/χ2值分別為67.198、75.056、71.876及94.158，P＜0.05）；與對照組相比，研究組KD患兒血清ANGPTL8水平明顯升高（t=17.490，P＜0.05），ITLN-1水平明顯降低（t=13.162，P＜0.05）；與無冠狀動脈損傷組相比，冠狀動脈損傷組患兒血清ANGPTL8水平明顯升高（t=7.454，P＜0.05），ITLN-1水平明顯降低（t=7.631，P＜0.05）。Pearson相關分析結果顯示，冠狀動脈損傷KD患兒血清ANGPTL8水平與PLT及CRP、IL-6、TNF-α水平均呈正相關（r=0.514、0.638、0.484、0.674，P＜0.05），ITLN-1水平與PLT及CRP、IL-6、TNF-α水平均呈負相關（r=-0.603、-0.659、-0.439、-0.646，P＜0.05）。ROC曲線分析結果顯示，血清ANGPTL8、ITLN-1聯合預測KD患兒冠狀動脈損傷的曲線下面積（AUC）為0.950，敏感度為89.19%，特異度為85.91%。多因素Logistic回歸分析結果顯示，PLT、CRP、IL-6、TNF-α、ANGPTL8水平升高是KD患兒冠狀動脈損傷的獨立危險因素，ITLN-1水平升高是KD患兒冠狀動脈損傷的保護因素。其OR值及95%CI分別為1.623（1.088～2.421）、1.722（1.266～2.342）、1.413（1.035～1.930）、1.725（1.210～2.460）、1.534（1.114～2.111）和0.685（0.485～0.967）。結論 KD冠狀動脈損傷患兒血清ANGPTL8水平明顯升高，ITLN-1水平明顯降低，且ANGPTL8水平升高、ITLN-1水平降低為KD患兒冠狀動脈損傷的獨立危險因素，聯合檢測二者血清水平對KD患兒冠狀動脈損傷有較高的預測價值。

［關鍵詞］血管生成素樣蛋白8；凝集蛋白-1；川崎?。还跔顒用}損傷；預測價值

Doi：10.3969/j.issn.1673-5293.2024.07.006

［中圖分類號］R179［文獻標識碼］A

［文章編號］1673-5293（2024）07-0038-06

Predictive value of serum ANGPTL8 and ITLN-1 for coronary artery

injury in children with Kawasaki disease

［Abstract］ Objective To explore the predictive value of serum angiopoietin-like protein 8 （ANGPTL8） and intelectin-1 （ITLN-1） in coronary artery injury in children with Kawasaki disease （KD）. Methods A total of 108 children with KD who were admitted to our hospital from May 2020 to May 2023 were regarded as the study group，they were divided into coronary artery injury group （n=37） and non-coronary artery injury group （n=71） according to the occurrence of coronary artery injury;another 72 healthy children who underwent physical examination were regarded as the control group.Double-antibody sandwich enzyme-linked immunosorbent assay was applied to detect serum inflammation related markers and levels of ANGPTL8 and ITLN-1 in all subjects.Pearson’s method was applied to analyze the correlation between serum levels of ANGPTL8，ITLN-1 and inflammatory markers in KD patients with coronary artery injury.The predictive value of serum ANGPTL8 and ITLN-1 levels for coronary artery injury in children with KD was evaluated. Results In the coronary artery injury group，KD children had significantly higher levels of platelet （PLT），C-reaction protein （CRP），interleukin-6 （IL-6） and tumor necrosis factor alpha （TNF-α） compared to the non-coronary artery injury group （F/χ2＝67.198，75.056，71.876 and 94.158，respectively，all P＜0.05）;compared with the control group，KD children in the study group showed a significant increase in serum ANGPTL8 levels （t=17.490，P＜0.05），and a significant decrease in ITLN-1 levels （t=13.162，P＜0.05）;compared with the non-coronary artery injury group，KD children in the coronary artery injury group exhibited a significant increase in serum ANGPTL8 levels （t=7.454，P＜0.05） and a significant decrease in ITLN-1 levels （t=7.631，P＜0.05）.The results of pearson correlation analysis showed that in KD children with coronary artery injury，serum levels of ANGPTL8 were positively correlated with PLT，CRP，IL-6 and TNF-α levels （r=0.514，0.638，0.484 and 0.674，respectively，P＜0.05），while the ITLN-1 levels were negatively correlated with PLT，CRP，IL-6 and TNF-α levels （r=-0.603，-0.659，-0.439 and -0.646，respectively，P＜0.05）.The results of receiver operating characteristic （ROC） curve analysis showed that the combined prediction of serum ANGPTL8 and ITLN-1 for coronary artery injury in KD children had an area under the curve （AUC） of 0.950，with a sensitivity of 89.19% and a specificity of 85.91%.The results of multivariate logistic regression analysis showed that elevated levels of PLT，CRP，IL-6，TNF-α and ANGPTL8 were independent risk factors for coronary artery injury in children with KD，while an elevated level of ITLN-1 was a protective factor for coronary artery injury in children with KD.The OR values and 95%CI were as follows：1.623 （1.088-2.421） for PLT，1.722 （1.266-2.342） for CRP，1.413 （1.035-1.930） for IL-6，1.725 （1.210-2.460） for TNF-α，1.534 （1.114-2.111） for ANGPTL8，and 0.685 （0.485-0.967） for ITLN-1. Conclusion The serum levels of ANGPTL8 in KD children with coronary artery injury are obviously increased，while the level of ITLN-1 is obviously decreased.The independent risk factors for coronary artery injury in KD children include elevated levels of ANGPTL8 and decreased levels of ITLN-1.The combined assessment of their serum levels holds a high predictive value for coronary artery injury in children with KD.

［Key words］ angiopoietin-like protein 8;intelectin-1;Kawasaki disease;coronary artery injury;predictive value

川崎病（Kawasaki disease，KD）是嬰幼兒期及兒童期常見的一種急性血管炎，臨床特征表現為發熱、手足硬腫、皮疹、頸部淋巴腫大等癥狀，嚴重時會導致冠狀動脈病變，從而影響全身多個系統［1］。研究表明，冠狀動脈是KD主要的受累血管，而冠狀動脈病變會引發心肌炎、冠狀動脈瘤、心肌梗死等一系列并發癥［2］。據研究統計，有高達30%的KD患兒出現冠狀動脈損傷，其中部分患兒因漏診而延誤病情，因此，尋找能準確預測冠狀動脈損傷的生物標志物是臨床預防和治療KD的關鍵［3］。研究表明，血管生成素樣蛋白8（angiopoietin-like protein 8，ANGPTL8）是一種分泌蛋白，其可通過調控脂肪酶活性及炎癥因子表達，促進甘油三酯積累和炎性反應，最終導致冠狀動脈病變［4］。而凝集蛋白-1（intelectin-1，ITLN-1）能抑制炎性細胞因子表達及巨噬細胞浸潤，對改善冠狀動脈狹窄、維持血管內斑塊穩定具有積極作用［5］。然而，目前國內有關ANGPTL8和ITLN-1對KD患兒冠狀動脈損傷的作用研究鮮有文獻報道，故本研究旨在探究KD患兒血清ANGPTL8、ITLN-1水平，并分析其對患兒冠狀動脈損傷的預測價值，以期為臨床早期診斷KD及改善患兒預后提供一定的理論依據。

1資料和方法

1.1一般資料

選取2020年5月至2023年5月期間在本院就診的108例KD患兒作為研究組，其中男性58例、女性50例，年齡6個月～9歲，平均（3.57±0.83）歲。納入標準：①患兒經臨床確診，符合KD相關診斷標準［6］；②患者年齡≤10歲；③入院前未服用阿司匹林及其他治療藥物；④患兒臨床資料完整;⑤患者本人及家屬知曉并同意，本人自愿簽署同意書。排除標準：①有其他心血管疾病者；②合并先天性疾病者；③有細菌感染、慢性炎癥者。參考《川崎病冠狀動脈病變的臨床處理建議》［7］中的診斷標準，并根據心臟彩超結果判定KD患兒是否出現冠狀動脈損傷，將其分為冠狀動脈損傷組（n=37）與無冠狀動脈損傷組（n=71）。另選取同期體檢健康兒童72例作為對照組，其中男性39例、女性33例，年齡8個月～10歲，平均（3.64±1.06）歲。三組年齡、性別比較，差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。本研究經本院醫學倫理委員會批準實施。

1.2方法

1.2.1血常規指標檢測

采集所有兒童晨起空腹外周靜脈血5mL，采用BC-7500血細胞分析儀（深圳邁瑞生物醫療電子股份有限公司）檢測白細胞計數（white blood cell，WBC）和血小板（platelet，PLT）計數。

1.2.2血清炎癥因子及ANGPTL8、ITLN-1水平檢測

取5mL血液樣本，室溫靜置20min，待析出血清后于4℃，3 000r/min離心15min，收集上清，轉至-20℃保存待測。采用雙抗體夾心-酶聯免疫吸附法，并根據試劑盒檢測步驟，加入待測血清及相應抗體，待反應終止，采用C16200型全自動生化分析儀（美國Bio-Rad公司）測定血清C反應蛋白（C-reaction protein，CRP）、白細胞介素（interleukin-6，IL-6）、腫瘤壞死因子α（tumor necrosis factor alpha，TNF-α）、ANGPTL8、ITLN-1水平。

1.3統計學分析

采用SPSS 25.0軟件進行數據分析。計量資料以例數n表示，組間比較進行χ2檢驗。符合正態分布的計量資料采用平均值±標準差（x-±s）表示，組間比較采用獨立樣本t檢驗。多組間比較采用單因素方差分析，進一步兩兩比較用SNK-q檢驗；采用Pearson法分析冠狀動脈損傷KD患兒血清ANGPTL8、ITLN-1水平與炎癥指標的相關性；采用受試者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲線評估ANGPTL8、ITLN-1單獨及聯合檢測對KD患兒冠狀動脈損傷預測價值；采用多因素Logistic回歸分析KD患兒冠狀動脈損傷的影響因素。P＜0.05表示差異有統計學意義。

2結果

2.1三組臨床資料比較

結果顯示，三組研究對象的體溫、WBC、PLT、CRP、IL-6和TNF-α水平比較，差異具有統計學意義（P＜0.05），且冠狀動脈損傷組患兒PLT、CRP、IL-6和TNF-α水平明顯高于無冠狀動脈損傷組（P＜0.05），見表1。

2.2研究組和對照組血清ANGPTL8、ITLN-1水平比較

結果顯示，與對照組相比，研究組KD患兒血清ANGPTL8水平明顯升高（P＜0.05），ITLN-1水平明顯降低（P＜0.05），見表2。

2.3 有無冠狀動脈損傷組KD患兒血清ANGPTL8、ITLN-1水平比較

結果顯示，與無冠狀動脈損傷組相比，冠狀動脈損傷組KD患兒血清ANGPTL8水平明顯升高（P＜0.05），ITLN-1水平明顯降低（P＜0.05），見表3。

2.4冠狀動脈損傷KD患兒血清ANGPTL8、ITLN-1水平與炎癥指標的相關性分析

Pearson相關分析結果顯示，冠狀動脈損傷KD患兒血清ANGPTL8水平與PLT及CRP、IL-6、TNF-α水平均呈正相關（r=0.514、0.638、0.484、0.674，P＜0.05），ITLN-1水平與PLT及CRP、IL-6、TNF-α水平均呈負相關（r=-0.603、-0.659、-0.439、-0.646，P＜0.05），見表4。

2.5血清ANGPTL8、ITLN-1水平對KD患兒冠狀動脈損傷的預測價值

通過繪制ROC曲線反映ANGPTL8、ITLN-1水平對KD患兒冠狀動脈損傷的預測價值。結果顯示，血清ANGPTL8、ITLN-1水平單獨及聯合預測KD患兒冠狀動脈損傷的曲線下面積（area under curve，AUC）分別為0.873、0.861、0.950，且二者聯合優于各自單獨診斷（Z二者聯合-ANGPTL8=2.205、P=0.028，Z二者聯合-ITLN-1=2.101，P=0.036），見圖1和表5。

2.6多因素Logistic回歸分析KD患兒冠狀動脈損傷的影響因素

以KD患兒是否出現冠狀動脈損傷作為因變量（是=1，否=0），以PLT、CRP、IL-6、TNF-α、ANGPTL8及ITLN-1水平（實測值）為自變量，行Logistic回歸分析。結果顯示，PLT、CRP、IL-6、TNF-α、ANGPTL8水平升高是KD患兒冠狀動脈損傷的獨立危險因素，ITLN-1水平升高是KD患兒冠狀動脈損傷的保護因素。見表6。

3討論

3.1血清ANGPTL8在KD患兒中的水平及與冠狀動脈損傷的關系

ANGPTL8是由人C19orf80基因編碼的分泌蛋白，屬于ANGPTL蛋白家族的新成員，其主要在肝臟和脂肪組織中表達［8］。Yang等［9］研究報道，ANGPTL8在血管緊張素Ⅱ（angiotensin Ⅱ，AngⅡ）等病理因素的刺激下，會在動脈細胞中高度表達，并參與炎癥反應、氧化應激等生理過程，是心血管疾病發生的危險因素。而研究認為KD是由未知刺激在遺傳易感嬰幼兒及兒童中引發大量炎癥因子介導一系列炎癥級聯反應所致，且KD發展到一定程度會導致機體冠狀動脈損傷，具體表現為動脈彌漫性增大、血管內狹窄，甚至發生瘤變，從而導致患兒呼吸受阻、心肌缺血，最終引發休克，甚至死亡［10-11］。近期有研究發現，由動脈粥樣硬化引發的腹主動脈瘤患者血清ANGPTL8明顯升高，而腹主動脈瘤的主要特征表現為動脈血管內皮功能障礙、血管局灶性擴張和動脈壁炎性細胞浸潤，這與KD患兒冠狀動脈損傷病理特征相似［12］。本研究結果顯示，與對照組相比，ANGPTL8水平明顯升高，冠狀動脈損傷組患兒ANGPTL8水平高于無冠狀動脈損傷組，且血清ANGPTL8水平升高是KD患兒冠狀動脈損傷的危險因素，提示ANGPTL8與KD患兒冠狀動脈損傷密切相關。

3.2血清ITLN-1在KD患兒中的水平及與冠狀動脈損傷的關系

ITLN-1是一種新型脂肪細胞因子，其在人體內臟脂肪組織和血液中高度表達，已被證實其作為抗炎因子在IL-6和TNF-α引發的糖脂代謝紊亂及慢性動脈疾病中發揮著重要的調節作用［13］。此外，ITLN-1能通過抑制巨噬細胞活化，并促使其分化為抗炎M2表型來阻斷炎癥反應，從而減少促炎因子的產生，對維持動脈粥樣硬化模型小鼠血管內斑塊穩定具有重要作用［14］。Askin等［15］研究表明，冠狀動脈粥樣硬化患者血清ITLN-1水平明顯低于健康者，且與頸動脈斑塊形成呈負相關。此外，還有研究報道，ITLN-1能通過激活AMPK/eNOS和PI3K/Akt通路增加血管舒張和內皮細胞存活，并抑制TNF-α表達，對巨噬細胞產生有益作用，從而改善血管損傷和炎癥［5］。以上研究表明，ITLN-1與動脈損傷和病變密切相關。在本研究中，通過檢測KD患兒血清ITLN-1水平發現，與對照組相比，ITLN-1水平明顯降低，冠狀動脈損傷組患兒ITLN-1水平低于無冠狀動脈損傷組，且KD患兒血清ITLN-1水平降低為患兒發生冠狀動脈損傷的危險因素，表明ITLN-1與KD患兒冠狀動脈損傷有關。

3.3血清ANGPTL8、ITLN-1水平與KD患兒冠狀動脈損傷的相關性

研究表明，冠狀動脈損傷與長期炎癥反應密切相關，在炎癥細胞因子水平高的KD患兒極易發生KD休克綜合征［16］。目前IL-6、IL-1β、INF-γ、TNF-α等炎癥細胞因子已被證實在KD中發揮著重要作用，其中IL-6和TNF-α與急性KD的血管內皮損傷和冠狀動脈病變有關［17-18］。本研究通過Pearson相關性分析ANGPTL8、ITLN-1水平與炎癥指標之間的相關性發現，冠狀動脈損傷KD患兒血清ANGPTL8、ITLN-1水平分別與PLT、CRP、IL-6、TNF-α水平呈正相關和負相關。眾所周知，CRP一種反應炎癥水平的蛋白指標，當機體組織受損或發生感染，血清CRP水平會急劇升高［19］。因而以上結果提示，ANGPTL8、ITLN-1可通過調節炎癥反應來參與KD患兒冠狀動脈損傷過程，且冠狀動脈受損會導致機體炎癥反應增強。此外，有研究表明，PLT高度活化、粘附和聚集是冠狀動脈受損的重要標志，其可通過誘導血管平滑肌細胞去分化，引發血管損傷及形成動脈瘤，進而誘使機體分泌大量炎癥因子如IL-6、IL-1β、TNF-α的表達［20］。因而推測KD患兒機體在持續分泌的炎癥因子刺激下，ANGPTL8表達增加，并反過來刺激炎癥因子表達，導致炎性反應不斷增強，ITLN-1抗炎作用受到抑制而表達下調。

3.4血清ANGPTL8、ITLN-1對KD患兒冠狀動脈損傷預測價值

本研究ROC曲線分析結果顯示，血清ANGPTL8、ITLN-1水平對KD患兒發生冠狀動脈損傷均有一定預測價值，且二者聯合預測的AUC為0.950，敏感度為89.19%，聯合預測價值高于二者單獨預測，此結果說明血清ANGPTL8、ITLN-1聯合預測KD患兒冠狀動脈損傷的價值較高，ANGPTL8、ITLN-1可能是預測冠狀動脈損傷的潛在標志物。

綜上所述，KD患兒血清ANGPTL8水平明顯升高、ITLN-1明顯降低，且在冠狀動脈損傷患兒中，二者血清水平變化程度更為顯著，且與炎癥相關指標有明顯的相關性，聯合檢測血清ANGPTL8、ITLN-1水平對KD患兒冠狀動脈損傷有較高的預測價值。此外，結合前人研究，推測ANGPTL8、ITLN-1可能通過調節IL-6和TNF-α炎癥因子分泌，介導相關炎癥反應信號通路來參與KD進展，導致冠狀動脈損傷，其具體作用機制將進一步進行深入研究。

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