氣相色譜-串聯質譜法測定蔬菜中殺螟硫磷的不確定度評估

摘 要：本文依據《食品安全國家標準 植物源性食品中208種農藥及其代謝物殘留量的測定 氣相色譜-質譜聯用法》（GB 23200.113—2018）中的方法，以殺螟硫磷D6作為內標物，對蔬菜中的殺螟硫磷殘留量進行了檢測，對測定過程中所產生的不確定度進行評估。結果表明，蔬菜中殺螟硫磷的含量為0.303 mg·kg-1，其擴展不確定度為0.017 mg·kg-1（k=2）。影響測量結果不確定度的主要因素為標準溶液的稀釋配制、樣品測量重復性以及標準曲線擬合。

關鍵詞：殺螟硫磷；殺螟硫磷D6；不確定度

Evaluation of Uncertainty in the Determination of Fenitrothion in Vegetables by Gas Chromatography-Tandem Mass Spectrometry

CHEN Huapeng

（Shenzhen Yirui Biotechnology Co.， Ltd.， Shenzhen 518000， China）

Abstract： According to the method of GB 23200.113—2018， the residual amount of methanophos in vegetables was detected by using methanophos D6 as the internal standard， and the uncertainty caused by the determination process was evaluated. The results showed that the content of thiophos in vegetables was 0.303 mg·kg-1， and its extended uncertainty was 0.017 mg·kg-1（k=2）. The main factors affecting the uncertainty of measurement results are the dilution preparation of standard solution， the repeatability of sample measurement and the fitting of standard curve.

Keywords： fenitrothion; fenitrothion D6; uncertainty

有機磷農藥是農作物種植中廣泛應用的農藥，殺螟硫磷在有機磷農藥中屬于中等毒性農藥，殺蟲效果較好，是目前使用最廣泛的有機磷殺蟲劑之一。依據《食品安全國家標準 植物源性食品中208種農藥及其代謝物殘留量的測定 氣相色譜-質譜聯用法》（GB 23200.113—2018）[1]，以殺螟硫磷D6作為內標物，使用氣相色譜-三重四極桿質譜法檢測蔬菜中殺螟硫磷農藥殘留，依據《化學分析中不確定度的評估指南》（CNAS—GL06：2019）[2]和《測量不確定度評定與表示》（JJF 1059.1—2012）[3]建立數學模型，對測量的不確定度進行分析和評估，求出各不確定度分量對總測量不確定度的貢獻[4]，為蔬菜中殺螟硫磷測定結果的準確性提供一定的依據，并為有機磷農藥殘留監測機構提供一定參考。

1 材料與方法

1.1 材料、試劑與儀器

實驗所用樣品為市購一批上海青小白菜，經搗碎成勻漿后制成。

殺螟硫磷標準物質（100 μg·mL-1）；殺螟硫磷D6標準物質（100 μg·mL-1）；乙腈（農殘級）；乙酸乙酯（農殘級）；硫酸鎂；氯化鈉；檸檬酸鈉；檸檬酸氫二鈉；乙二胺-N-丙基硅烷化硅膠（Primary Secondary Amine，PSA）；石墨化炭黑（Graphitized Carbon Black，GCB）等。

賽默飛TRACE 1300/TSQ 9000型氣相色譜-三重四極桿質譜聯用儀；PTX-FA210電子天平。

1.2 實驗方法

1.2.1 標準溶液配制

準確移取1.00 mL殺螟硫磷D6標準溶液（100 μg·mL-1）至10 mL容量瓶中，用乙酸乙酯定容，配制成10 μg·mL-1的內標溶液。

準確移取1.00 mL殺螟硫磷標準溶液（100 μg·mL-1）至10 mL容量瓶中，用乙酸乙酯定容，配制成10 μg·mL-1的標準儲備溶液。再準確移取一定量的標準儲備液和內標液，用甲醇溶解并定容至10 mL，逐級稀釋配制成10 ng·mL-1﹑20 ng·mL-1﹑50 ng·mL-1﹑100 ng·mL-1﹑200 ng·mL-1和500 ng·mL-1系列標準工作液，內標濃度為100 ng·mL-1。

1.2.2 樣品制備方法

稱10 g試樣（精確至0.01 g）于50 mL塑料離心管中，加入50 μL 10 μg·mL-1殺螟硫磷D6內標溶液，充分混勻后加入10 mL乙腈、4 g硫酸鎂、1 g氯化鈉、1 g檸檬酸鈉、0.5 g檸檬酸氫二鈉及1顆陶瓷均質子，蓋上離心管蓋，劇烈振蕩1 min后6 000 r·min-1離心5 min。吸取6 mL上清液于含885 mg硫酸鎂、150 mg PSA及15 mg GCB的15 mL離心管中，渦旋混勻1 min。6 000 r·min-1離心5 min，準確吸取2 mL上清液于10 mL試管中，40 ℃水浴氮氣吹至近干，加入1 mL乙酸乙酯復溶，0.22 μm濾膜過濾后，待測。

1.2.3 儀器條件

色譜柱：DB-5MS（30 m×0.25 mm，2.5 μm）；載氣：氦氣；載氣流速：1.0 mL·min-1；進樣口溫度：290 ℃；離子源溫度：280 ℃；分流模式：不分流；進樣量：1 μL；升溫程序：初始40 ℃保持1 min，以20 ℃·min-1升溫至160 ℃，保持6 min，以10 ℃·min-1升溫至250 ℃，以30 ℃·min-1升溫至300 ℃，保持2 min；傳輸線溫度：280 ℃。質譜條件參數見表1。

1.2.4 建立數學模型

蔬菜中殺螟硫磷含量計算公式為

式中：X為樣品中殺螟硫磷含量，mg·kg-1；C為樣液中殺螟硫磷的含量，ng·mL-1；m為樣品取樣量，g；V為定容體積，mL；F為分取體積比。

2 結果與分析

2.1 不確定度來源分析

從測量過程和數學模型分析[5]，殺螟硫磷含量測量不確定度來源主要有樣品稱量urel（m）、前處理過程中量器體積urel（V）、標準溶液的配制和稀釋urel（p）、標準曲線擬合urel（C）、樣品測量重復性urel（f）。不確定度來源分析如圖1所示。

2.2 不確定度分量的量化

2.2.1 標準溶液的配制和稀釋引入的相對標準不確定度urel（p）

（1）標準物質的純度引入的相對標準不確定度urel（p1）。本次實驗中，所使用的殺螟硫磷標準物質的編號為GBW（E）082287，其相對擴展不確定度為2%（k=2）。因此，標準物質的純度引入的相對標準不確定度為urel（p1）=0.02/2=0.01。

（2）標準溶液配制和稀釋過程中體積引入的相對標準不確定度urel（p2）[6-7]。標準溶液配制過程中的不確定度依據《常用玻璃量器檢定規程》（JJG 196—2006）[8]和《移液器檢定規程》（JJG 646—2006）[9]，計量器具的容量允許誤差d，按照矩形分布進行計算，包含因子為k，標準溶液配制和稀釋過程中玻璃量器的相對標準不確定度計算公式為，移液器體積引入的相對標準不確定度計算公式為，各不確定度來源和計算結果見表2。則標準溶液配制和稀釋過程中體積引入的相對標準不確定度為

（3）溫度變化也會引起容積變化，實驗室的溫度控制目標在20 ℃，實際溫度變化范圍為±5 ℃，乙酸乙酯的體積膨脹系數a=0.001 39/℃，取k=，溫度引起的相對標準不確定度公式為，則其引入的相對標準不確定度為

則標準溶液的配制和稀釋引入的相對標準不確定度為。

2.2.2 標準曲線擬合引入的相對標準不確定度urel（C）

配制標準溶液濃度點，進樣分析，每個濃度點測定1次，橫坐標為標液濃度，縱坐標為標準溶液與內標物的峰面積比，采用最小二乘法擬合曲線，結果見表3。

峰面積的殘余標準差及校準曲線擬合引入的相對標準不確定度urel（C）的計算公式為

式中：urel（C）為標準曲線擬合引入的相對標準不確定度；S為標準溶液峰面積殘差的標準差；a為斜率；b為截距；Ai為第i個標準溶液的峰面積；n為標準溶液測量次數；p為樣品測量次數；為標準溶液濃度的平均值；Ci為第i個標準溶液的濃度值，ng·mL-1；C樣為樣品溶液中濃度的平均值，ng·mL-1。

2.2.3 樣品稱量引入的相對標準不確定度urel（m）

樣品取樣量為10 g，查詢電子天平校準證書上標明的最大允許誤差為±0.5 mg，屬均勻分布，則稱量引入的標準不確定度為 g，相對標準不確定度為urel（m）=u（m）/10=2.89×10-5。

2.2.4 試樣前處理過程中量器體積引入的相對標準不確定度urel（V）

用1 mL移液器移取1 mL乙酸乙酯溶解樣品殘留物，1 mL移液器允差為±0.01 mL，其引入的相對標準不確定度為urel（V槍）。同時溫度變化會引起容積變化，取k=，其引入的相對標準不確定度為urel（V溫），相對標準不確定度為

2.2.5 樣品測量重復性引入的相對標準不確定度urel（f）

在相同的條件下對試樣進行6次重復性檢測。殺螟硫磷殘留量測定結果分別為0.315 mg·kg-1、0.295 mg·kg-1、0.292 mg·kg-1、0.297 mg·kg-1、0.311 mg·kg-1、0.306 mg·kg-1，平均值為0.303 mg·kg-1。RSD=0.030 9，p=6，則樣品重復測量引入的相對標準不確定度為。

2.3 相對標準不確定度的合成

蔬菜中殺螟硫磷的檢測中，所引入的合成相對標準不確定度為

2.4 擴展不確定度計算及結果報告

殺螟硫磷的不確定度分量匯總結果如表4所示。取置信概率95%，包含因子k=2，本次檢驗殺螟硫磷含量均值X為0.303 mg·kg-1，其擴展不確定度U=X×urel（X）×2=0.303×0.026 6×2=0.017 mg·kg-1，蔬菜中殺螟硫磷的檢測結果為（0.303±0.017）mg·kg-1，k=2。

3 結論

依據GB 23200.113—2018中的方法，以殺螟硫磷D6作為內標物，對蔬菜中的殺螟硫磷殘留量進行了檢測，對測定過程中所產生的不確定度進行評估。結果表明，蔬菜中的殺螟硫磷含量為0.303 mg·kg-1時，其擴展不確定度為0.017 mg·kg-1，k=2。各項不確定來源中，對檢測結果影響最大的是標準溶液的配制和稀釋，其次為樣品測量重復性，樣品的稱量及前處理過程中量器體積的影響較小。因此，在檢測工作中要盡量使用精密度高的移液器，使用經計量檢定的移液器和容量瓶進行標準溶液的配制，避免過大的稀釋倍數，選用濃度較低且不確定度小的有證標準物質，提高測量結果的準確度。

參考文獻

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