豬肺炎支原體實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測方法建立及應(yīng)用

劉 瑩,李 峰,殷宗俊,王敬茹,李書光*,鄭先瑞*

(1.山東省濱州畜牧獸醫(yī)研究院,山東濱州 256600;2.安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院,安徽合肥 230036;3.濱州市濱城區(qū)畜牧獸醫(yī)服務(wù)中心,山東濱州 256600)

豬肺炎支原體(Mycoplasmahyopneumoniae)是導(dǎo)致豬呼吸道疾病綜合征的主要病原體之一,這是一種慢性豬呼吸系統(tǒng)疾病[1],其主要癥狀為氣喘并伴隨著咳嗽,該病會(huì)導(dǎo)致豬生產(chǎn)性能降低、飼料轉(zhuǎn)化率下降,同時(shí)較易受到感染和誘導(dǎo)引發(fā)其他疾病,這就增加了對(duì)該病進(jìn)行防治的困難,對(duì)我國養(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展和經(jīng)濟(jì)效益造成嚴(yán)重影響[2-3]。豬肺炎支原體感染在幾乎所有的生豬產(chǎn)區(qū)都非常普遍,隨著藥物使用的增加和豬生產(chǎn)性能的下降,給養(yǎng)豬業(yè)造成了重大的經(jīng)濟(jì)損失[4]。該病菌會(huì)附著在氣管、支氣管和細(xì)支氣管的纖毛上皮細(xì)胞上,影響了黏膜清除系統(tǒng),并調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng),使動(dòng)物更容易受到其他呼吸道病原的感染[5]。豬肺炎支原體不僅能通過空氣傳播,還能進(jìn)行垂直傳播,仔豬染病后,臨床癥狀表現(xiàn)較晚。一旦豬場感染該病,病原很難在短時(shí)間內(nèi)清除,且容易出現(xiàn)繼發(fā)感染[6]。因此,必須對(duì)豬群進(jìn)行監(jiān)測,以便能早發(fā)現(xiàn)并早治療,避免造成更大的經(jīng)濟(jì)損失。

豬肺炎支原體的診斷主要有4種方法,包括臨床診斷、病理組織學(xué)診斷、病原檢測和抗體檢測等[7],感染豬肺炎支原體的臨床癥狀為間歇性且強(qiáng)度可變的干咳[8],在肺臟呈現(xiàn)“肉樣” 或“蝦肉樣”實(shí)變[9],剖檢變化呈現(xiàn)的特征是融合性支氣管肺炎,病理組織學(xué)診……