干細胞因子在3例犬急性脊髓神經系統疾病治療中的應用和體會

王福軍

(1.黑龍江民族職業學院生物科技系 , 黑龍江 哈爾濱 150000 ; 2. 哈爾濱市福愛寵物醫院 , 黑龍江 哈爾濱 150000)

犬常見的神經系統疾病主要包括腦、脊髓和外周神經的損傷,癥狀主要見于疼痛、抽搐、骨骼肌肌肉震顫、癱瘓、神經反射減弱或消失等。雖然神經系統對損傷有一定的自我修復能力,但是過程復雜且漫長,需要把握住最佳治療時間積極的治療[1]。目前,干細胞治療技術作為新的治療手段已逐漸應用到寵物臨床方面,給神經系統疾病治療開辟了新的方向[2]。干細胞在一定條件下可以分化成多種功能細胞或組織器官,醫學界稱其為“萬能細胞”[3],通過靜脈回輸可以遷移到中樞神經病變部位,經旁分泌作用產生可溶性細胞因子修復受損組織。干細胞因子在體內迅速補充細胞新陳代謝所需的營養,靶向修復受損細胞,激活休眠的干細胞,刺激新生組織再生。本文將介紹3例犬急性脊髓神經系統疾病,通過結合臨床癥狀和數字高清X線或磁共振成像(Magnetic resonance imaging,MRI)診斷結果,使用干細胞因子加以干預治療,觀察患犬的恢復效果,以期為犬類似神經系統疾病的診斷和治療提供參考。

1 病例一

1.1 發病情況 八哥犬,2歲,雄性,體重10 kg?；既诰驮\前2 d開始出現行動緩慢,運動量少,高處跳躍活動減少,病情漸進加重,臨床表現為雙側后肢行動困難,勉強支撐身體,就診當日突然出現雙側后肢癱瘓,僅靠兩前肢呈“劃水狀”方式移動?；既疅o既往病史,未受到撞擊和跌落。飲食有所減少,排便困難。

1.2 診斷

1.2.1 一般檢查 該患犬體溫正常,精神狀態一般,體表毛發狀態正常。觸診患犬腰部伴有疼痛反應,疼痛刺激雙側后肢,反應極不敏感,且雙側后肢本體反射輕度消失。

1.2.2 影像學檢查 X線檢查:腰5～腰7椎間隙狹窄,椎間孔狹小灰暗,“馬頭狀”結構外觀消失。

1.2.3 診斷結果 結合臨床癥狀和X線影像學檢查結果初步診斷患犬為腰5～腰7椎間盤突出癥,壓迫脊髓而導致雙側后肢癱瘓。

1.3 治療和效果 對患犬使用甲強龍連續靜脈滴注3 d以消除急性水腫?；既顾枭窠浶迯椭委?靜脈滴注犬干細胞因子注射液,1支/d,連用3 d。支持治療時給予患犬靜脈滴注葡萄糖酸鈣;皮下注射維生素B1和維生素B12以營養神經;皮下注射骨肽,口服康仕健,修復軟骨,以改善患犬關節的靈活性;皮下注射痛立定以緩解其疼痛。

經過3 d的綜合治療用藥并結合犬干細胞因子注射液靜脈輸注治療后,該患犬的雙側后肢痛覺逐漸靈敏,本體反射逐漸恢復正常,并可以正常站立,但行走還未恢復正常速度。除犬干細胞因子注射液外,其他藥物繼續使用。治療第7天,該患犬的癥狀完全消失,走路和跑動恢復正常。此后每日飼喂康仕健口服藥,半年后回訪,主述該犬平日表現未見異常。

2 病例二

2.1 發病情況 雜交蝴蝶犬,10歲,雌性,已絕育,無嚴重既往病史。患犬至本院就診前3 d突然前后肢均站立不穩,運動量明顯下降,精神沉郁,食欲下降。主人帶其在家附近寵物醫院就診并進行血常規、血清生化和X線檢查,結果均未見明顯異常。采用激素療法、抗生素治療、降顱內壓和皮下注射維生素B1和維生素B12等常規治療3 d,患犬未見好轉,遂轉至本院。

2.2 診斷

2.2.1 一般檢查 該患犬前后肢均無法站立,本體反射消失,疼痛反應輕度敏感,神經系統疾病癥狀明顯,結合其他寵物醫院的檢查和治療進一步進行MRI檢查。

2.2.2 影像學檢查 MRI檢查結果顯示:頸胸腰椎多處椎間盤髓核信號降低,呈脫水變性,椎體背縱韌帶肥厚;其中頸3～頸4椎間隙狹窄,椎間盤背側纖維環連續性中斷,鄰近頸3～頸4椎間盤椎管內可見脫出髓核(圖1A);頸2～頸5、頸6～胸1和胸12～腰5椎間盤背側向椎管內改變(圖1B);相應段脊髓受壓變形水腫明顯。

圖1 病例二MRI脊髓掃描圖

2.2.3 診斷結果 患犬頸胸腰椎多處椎間盤退行性改變,頸2～頸3、頸4～頸5、頸6～胸1和胸12～腰5椎間盤突出,頸3～頸4椎間盤髓核脫出,相應段脊髓受壓損傷。

2.3 治療和效果 綜合分析該患犬此前治療過程和療效,本院建議對患犬采用常規用藥和靜脈輸注干細胞因子注射液進行嘗試治療。

首日采用甲強龍對患犬急性脊髓損傷進行治療以緩解組織水腫,采用抗生素進行抗菌消炎和皮下注射維生素B1和維生素B12營養神經藥進行常規支持治療,但患犬癥狀未見改善。次日對患犬增加靜脈滴注干細胞因子治療,1支/d,連續3 d。

干細胞因子治療期間患犬精神狀態逐漸改善,飲食飲水增加,攙扶其前肢站立平穩,本體反射恢復,但仍無法行走,后肢較前肢恢復緩慢。此后患犬繼續接受抗菌消炎藥與維生素B1和維生素B12營養神經藥支持療法。7 d后對患犬后肢應用動物專用輪椅,可支持其前肢正常行走,半個月后患犬行動自如,恢復其發病前狀態。

治療1個月后對患犬進行MRI影像學復查,可見椎間盤突出緩解,椎體背縱韌帶肥厚解除,脊髓水腫信號消失,頸3～頸4椎間盤髓核脫出物固化、脫水萎縮,未對脊髓造成明顯壓迫(圖1C),胸12～腰5段脊髓受壓變形水腫明顯緩解(圖1D)。

3 病例三

3.1 發病情況 雪納瑞,8歲,雄性,患犬無既往病史,飲食和排便均正常。就診1周前患犬出現行動緩慢,安靜時有渾身抖動現象,病情逐漸加重。

3.2 診斷

3.2.1 一般檢查 患犬就診當日雙側后肢行走時不受支配,人為攙扶下勉強支撐其身體,腰間無力,身體前傾,頭伸直,兩前肢呈強力支撐狀態。疼痛刺激雙側后肢反應不敏感,按壓其胸腰椎,多處有疼痛反應。

3.2.2 影像學檢查 X線檢查未見明顯異常,需MRI檢查進一步確診。MRI檢查結果顯示:胸10～胸11和胸12～腰1椎間盤背側向椎管內改變,腰1～腰2椎間盤背側向椎管內改變,背側纖維環呈“鋸齒樣”改變(圖2A);患犬胸腰椎多處椎間盤髓核T2信號減低,椎體背縱韌帶肥厚;胸13～腰5椎體終板腹側少量增生和鈣化(圖2B);鄰近腰1～腰2椎間盤右側椎管內見少量等T1和等T2髓核脫出物;相應段脊髓受壓變形水腫明顯。

圖2 病例三MRI脊髓掃描圖

3.2.3 診斷結果 患犬椎體和椎間盤退行性改變;胸13～腰5椎體終板腹側增生和鈣化;胸10～胸11和胸12～腰1椎間盤突出;腰1～腰2椎間盤髓核脫出;相應段脊髓受壓損傷。

3.3 治療和效果 綜合分析該患犬病情發展時長,采用常規用藥結合靜脈輸注犬干細胞因子注射液進行治療。

治療方案:給予患犬非甾體抗炎藥止疼,糖皮質激素甲強龍進行抗炎消除患部水腫,維生素B1和維生素B12用來營養神經,干細胞因子靜脈輸注以恢復其受損神經細胞,連續治療3 d。

該患犬表現出精神狀態逐日改善,疼痛緩解,后肢逐日站立平穩。經3 d治療后該患犬走路基本無異常,相較以往未用干細胞因子注射液用藥治療的患犬恢復迅速。

患犬康復后10 d復查MRI可見椎間盤突出得到緩解,椎體背縱韌帶肥厚解除,脊髓水腫信號消失,腰1～腰2脫出椎間盤髓核固化并脫水萎縮,未對脊髓造成壓迫(圖2C和2D)。

4 討論

干細胞具有再生為各種組織的潛能,在傳統醫療手段束手無策的疾病方面顯示出了奇跡般的治療效果。在體內或體外特定的誘導條件下,干細胞可分化為多種組織細胞,可作為理想的種子細胞用于衰老和病變的組織器官損傷修復中。神經干細胞具有分化為神經元、星形膠質細胞和少突膠質細胞的能力,是一種能自我更新的細胞[4]?；疾〔课唤M織損傷后釋放各種趨化因子,吸引神經干細胞聚集到損傷部位,并在局部微環境的作用下分化為不同種類的細胞,修復并補充損傷的神經細胞。干細胞增殖分化過程中分泌干細胞因子,干細胞因子經血液循環進入組織,迅速補充細胞新陳代謝所需的全部營養,靶向激活休眠的干細胞,促進損傷細胞的修復,增強神經突觸之間的聯系,建立新的神經通路[5]。目前,干細胞的來源、分離、培養和鑒定還有許多工作要做,尤其體外培養的干細胞輸入體內后還不能控制其生長分化,極大地增加了臨床應用的風險,注射干細胞還有一定的副作用,加重免疫系統的負擔。雖然干細胞的作用越來越被認可,但是其高昂的價格讓很多人望而卻步。干細胞因子富含多種有效成分,可以刺激自體內源性干細胞生長,也是體外培養干細胞必不可少的物質。本文應用的犬干細胞因子注射液為北京京蒙細胞生物科技股份有限公司生產,3 mL/支,主要成分有:神經生長因子、上皮細胞生長因子、粒細胞集落刺激因子、促干細胞生長因子、成纖維細胞生長因子、腦源性神經營養因子、白細胞介素4、白細胞介素10、趨化因子、細胞間黏附分子-1和各種溶菌酶等100余種有效活性成分。干細胞因子進入機體后,休眠干細胞被大量激活,細胞分化速度達到生長期的水平,全面修復和補充受損、老化或病變的細胞。

病例一患犬通過急性雙側后驅癱瘓等癥狀和X線檢查結果診斷為急性椎間盤突出壓迫脊髓癥。對患犬采用緊急抗水腫治療,解除壓迫神經的不利因素,恢復神經細胞的功能。同時配合靜脈輸注干細胞因子對受損神經細胞進行治療,促進神經元的發育和分化,并恢復其正常功能,防止發生退行性病變。輔以其他藥物支持治療,將神經細胞損傷程度降到最低?；既唐谥委熜Ч黠@,后期預后良好。另有2例結合臨床癥狀和MRI影像學檢查結果確診患有急性椎間盤疾病繼發急性脊髓神經損傷,患犬臨床癥狀嚴重,在接受常規治療效果不明顯后,依靠干細胞因子靜脈輸注治療達到了理想的康復效果,而且未出現明顯不良反應,因此認為干細胞因子在修復神經損傷方面有一定療效。目前,藥物仍是治療急性脊髓損傷的主要措施,關鍵是通過消除水腫和控制炎癥保護部分正常的神經功能,并通過修復受損神經實現神經功能改善。

近些年中國小動物診療行業發展迅速,高清數字X光線、計算機斷層掃描(Computed tomography,CT)和MRI高端影像診斷技術逐漸被應用和推廣,極大的提高了影像學診斷的準確性。MRI診斷技術具有高軟組織分辨率優勢,既可以顯示解剖結構和病理改變,又可以清晰顯示出患犬椎間盤的退變情況和脊柱形態等,明顯優于CT檢查和X線檢查[6]。本文應用的犬干細胞因子注射液含有多種有效活性成分,包括多種干細胞因子、神經營養因子、神經生長因子和神經保護因子,對中樞和周圍神經元的發育、分化、生長、再生和功能特性的表達均具有重要的調控作用[7]。通過靜脈注射干細胞因子可以治療患犬神經損傷后出現的姿勢和行動異常、精神萎靡以及神經性抽搐等癥狀。本文報道均為寵物醫院臨床治療病例而非造模病例,臨床每個病例脊髓損傷位置和程度均有差異性,因此未使用干細胞因子注射液的病例沒有進行描述,希望通過后期增加對類似病例患犬使用該藥物,從而完善對干細胞因子的應用體會。