人類免疫缺陷病毒抗體初篩中采取膠體層析法與酶聯免疫吸附試驗檢測的價值對比

【摘要】 目的 對比膠體層析法與酶聯免疫吸附試驗（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）應用于人類免疫缺陷病毒

（human immunodeficiency virus，HIV）抗體初篩中的臨床價值。方法 回顧性分析2019年6月—2022年6月信豐縣疾病預防控制中心60例接受HIV感染篩查者的臨床資料，所有入選病例均接受膠體層析法與ELISA法進行HIV抗體初篩，并經過免疫印跡法檢測最終確認。比較2種方法檢測HIV抗體的效能。結果 60例篩查者經免疫印跡法確認HIV抗體陽性25例（41.67%），HIV抗體陰性35例（58.33%）。膠體層析法檢測HIV抗體的符合率為83.33%、靈敏度為76.00%、特異度為88.57%、陽性預測值為82.61%、陰性預測值為83.78%；ELISA法檢測HIV抗體的符合率為91.67%、靈敏度為92.00%、特異度為91.43%、陽性預測值為88.46%、陰性預測值為94.12%；膠體層析法與ELISA法比較，ELISA法檢測HIV抗體的靈敏度、陰性預測值均高于膠體層析法，差異有統計學意義（P＜0.05）。結論 ELISA法檢測HIV抗體的效能高于膠體層析法，主要表現在ELISA法具有更高的靈敏度與陰性預測值，有助于提高HIV感染篩查準確率。

【關鍵詞】 人類免疫缺陷病毒；抗體初篩膠體層析法；酶聯免疫吸附試驗

文章編號：1672-1721（2024）04-0115-03? ? ?文獻標志碼：A? ? ?中國圖書分類號：R512.91

獲得性免疫缺陷綜合征（acquired immune deficiency syndrome，AIDS）已成為全球性公共衛生難題，具有病死率高、患者預后差、傳染性強等特點，嚴重影響患者身心健康[1]。HIV是引起AIDS的病原微生物。性接觸與血液是HIV主要傳播途徑。通過控制傳播途徑與早期病毒感染檢測能夠有效降低AIDS發生風險，并為AIDS患者的早期治療提供參考依據[2]。HIV抗體檢測技術是臨床篩查AIDS的重要手段，但不同檢測方法診斷效能有所差異。膠體層析法是臨床HIV抗體初篩中應用最廣泛的檢測方法，具有操作簡單、迅速且經濟適用性好的優勢，尤其適用于HIV急診檢測中，但膠體層析法特異度較低，存在一定假陽性與假陰性率，篩查精度仍存在不足[3]。ELISA檢測HIV抗體的準確率在一代試劑基礎上得到了大幅提高，具有操作簡單、準確度高、可大范圍檢測等優勢[4]。目前關于膠體層析法與ELISA法在HIV抗體初篩中的優劣勢仍存在爭議。本研究以60例接受HIV感染篩查者為研究對象，進一步對比了二者的檢測效能，報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性分析2019年6月—2022年6月信豐縣疾病預防控制中心60例接受HIV感染篩查者的臨床資料，男性33例，女性27例；年齡16～68歲，平均（30.16±11.35）歲；體質量指數17～29 kg/m2，平均（22.35±4.69）kg/m2。

納入標準：因身體不適、與HIV患者存在血液或性接觸等原因進行HIV抗體檢測；均接受膠體層析法、ELISA法進行HIV抗體初篩，并經過免疫印跡法檢測確認；入院檢測期間依從性良好；臨床資料完整。

排除標準：合并肢體創傷；合并血流感染；合并嚴重內分泌疾病；合并精神疾病。

1.2 方法

1.2.1 儀器與試劑

全自動生化分析儀（德國西門子公司，ASVIA1800型），高速臺式離心機（美國貝克曼庫爾特有限公司，Avanti型），酶標儀（美國賽默飛世爾科技公司，MULTISKAN MK3型），化學發光全自動免疫分析儀（美國雅培公司，i2000型），實時熒光定量PCR儀（濟南程騰生物技術有限公司，MA-6000型），洗板儀（北京拓普分析儀器有限公司，DEMⅢ型），HIV質控品（北京康徹思坦生物技術有限公司，批號201810203），HIV校準品、HIV抗體診斷試劑（北京康徹思坦生物技術有限公司），ELISA抗體診斷試劑盒（上海晶抗生物工程有限公司），膠體層析法抗體診斷試劑盒（上海晶抗生物工程有限公司），免疫印跡法檢測試劑盒（廣州達安基因股份有限公司）。

1.2.2 檢測方法

所有受檢者均采集外周靜脈血樣5 mL，將部分血樣（2～3 mL）采用高速臺式離心機常規離心后分離血

清，將血清標本采用恒溫冰箱保存，2 h內采用膠體層析法與ELISA法進行HIV抗體檢測，同時將剩余血樣進行抗凝處理并留取血漿冷藏備用，以待后期進行免疫印跡法檢測。（1）膠體層析法檢測方法及結果判定。取膠體層析法抗體診斷試劑盒，采用移液槍將60 μL待測樣本置于試劑卡加樣處，應用免疫層析原理進行HIV抗體定性檢測。結果判讀，試劑卡對照區與檢測區均出現紫紅色條帶即判定HIV抗體陽性。（2）ELISA檢測方法及結果判定。采用ELISA抗體診斷試劑盒檢測HIV抗體，設置陰性、空白對照、陽性各2孔，待測樣孔、酶孔分別加樣本稀釋液10 μL、100 μL，37 ℃環境下孵育60 min，洗板加100 μL酶結合物后37 ℃環境下孵育30 min，洗板加100 μL顯色液后繼續37 ℃環境下孵育30 min，洗板加50 μL終止液。結果判讀，ELISA法比色主、副波長分別為450 nm、630 nm，Cutoff值以陰性對照孔均值+0.12計，S/CO＞1為陽性[5]。（3）免疫印跡法檢測方法及結果判定。所有待測者均接受免疫印跡法進行HIV感染確認，取受檢者備用血液樣本，采用免疫印跡法檢測試劑盒進行確認試驗，根據條帶顯色情況進行結果判讀。gP160、gP120、gP41中同時出現≥2條膜帶，或gP160、gP120、gP41中出現1條膜帶且同時出現P24帶即判定為陽性。

1.3 觀察指標

以免疫印跡法檢測結果作為金標準，對比膠體層析法與酶聯免疫吸附試驗在HIV感染篩查中的檢測效能，包括符合率、靈敏度、特異度、陽性預測值、陰性預測值。

1.4 統計學方法

采用SPSS 22.0統計學軟件分析數據，計數資料以百分比表示，行χ2檢驗，P＜0.05為差異有統計意義。

2 結果

2.1 膠體層析法與ELISA法檢測HIV抗體結果比較

免疫印跡法檢測結果顯示，60例篩查者中共確診HIV抗體陽性25例（41.67%），HIV抗體陰性35例（58.33%）。膠體層析法檢測HIV抗體陽性23例（38.33%）、陰性37例（61.67%），ELISA法檢測HIV抗體陽性26例（43.33%）、陰性34例（56.67%），見表1、表2。

2.2 膠體層析法與ELISA法檢測HIV抗體的效能比較

ELISA法與膠體層析法比較，ELISA法檢測HIV抗體的靈敏度、陰性預測值均高于膠體層析法，差異有統計學意義（P＜0.05）；2種方法的特異度、陽性預測值、符合率比較，差異無統計學意義（P＞0.05），見表3。

3 討論

AIDS是臨床常見傳染病。大量研究已證實[6-7]，AIDS會使患者免疫系統功能損傷，而免疫功能的破壞極易導致多重感染、惡性腫瘤等嚴重并發癥，危害患者生命安全。HIV感染是引起AIDS的直接原因。HIV是一種傳播途徑多樣的逆轉錄病毒，其傳播途徑包括血液、母嬰和性傳播等[8]。AIDS呈全球分布趨勢，截至2019年，世界范圍內AIDS患者已超過3 800萬例，其中僅2019年全球AIDS新發病例就超過了170萬例。我國AIDS患者人數較多，一項關于中國1990—2017年的AIDS疾病相關研究顯示[9]，1990—2017年中國的AIDS疾病負擔呈逐年升高趨勢，1990—2017年中國的AIDS年齡別標化傷殘調整壽命年率為（1.61～9.13）/10萬，年齡別標化病死率為（0.03～0.20）/10萬。HIV感染防控形勢嚴峻，給我國公共衛生醫療體系帶來了沉重負擔。利用HIV抗體檢測技術能夠對AIDS風險人群進行早期篩查與診斷，從而為AIDS的預防與控制提供參考。

HIV抗體檢測技術發展至今已有數十年歷史，是臨床HIV感染快速篩查以及早期診斷的主要方式。膠體層析法因價格實惠且操作簡單的優勢被普遍應用，但有學者研究指[10]出，膠體層析法在HIV感染早期存在靈敏度低、假陽性率高等不足。ELISA法的運用為HIV抗體篩查提供了新的選擇，但其臨床接受度相對較低，關于膠體層析法和ELISA法在HIV抗體篩查中的價值仍不明確。本研究分別采用膠體層析法與ELISA法進行HIV抗體檢測，結果顯示膠體層析法檢測HIV抗體的符合率為83.33%、靈敏度為76.00%、特異度為88.57%，而ELISA的符合率為91.67%、靈敏度為92.00%、特異度為91.43%，與苗岳等[11]的研究相似，表明膠體層析法與ELISA在HIV抗體檢測中均具有較高的準確率。比較膠體層析法與ELISA檢測HIV抗體的效能，結果顯示，ELISA檢測HIV抗體的靈敏度與陰性預測值均高于膠體層析法，差異有統計學意義（P＜0.05），與鐘秀琴[12]的研究基本對應，表明ELISA法在HIV抗體檢測中的效能高于膠體層析法。分析原因，ELISA法檢測時可將HIV抗原于固相載體包被，利用酶催化底物反應顯色后經酶標儀測定結果，不受樣本溶血及脂血的影響，穩定性高且靈敏度增加，保證了檢測結果的準確性。ELISA法對于檢測條件的要求相對較低，不僅能夠在室內常規溫度下進行檢測，還無需價格昂貴的特種設備，操作簡單、便捷，極大地降低了HIV抗體檢測過程中對于設備與操作者水平的要求。ELISA法能一次性檢測多個待測樣本，在廣泛性HIV感染篩查過程中具有顯著優勢，能夠為HIV抗體檢測提供客觀、科學的參考依據，提高HIV篩查診斷準確率。

綜上所述，ELISA法檢測HIV抗體的效能高于膠體層析法，主要表現在ELISA法具有更高的靈敏度與陰性預測值。ELISA法不僅可以進行單份標本檢測，還可以一次性進行多樣本檢測，對于提高HIV感染篩查準確率具有重要價值。

參考文獻

[1] 班立芳，趙鮮麗，孔慶飛，等.醫院艾滋病住院患者合并真菌感染的菌種分布及影響因素[J].中國感染控制雜志，2021，20（5）：397-402.

[2] AMARE H，OLSEN M F，FRIIS H，et al.Predictors of glucose metabolism and blood pressure among Ethiopian individuals with HIV/AIDS after one-year antiretroviral therapy[J].Trop Med Int Health，2021，26（4）：428-434.

[3] 裴麗健，赫曉霞，王月華，等.尿液HIV-1抗體快速檢測（膠體金法）實驗室能力驗證質控品的制備與應用[J].中國艾滋病性病，2020，26（5）：483-486，492.

[4] 董莉.在臨床疑似艾滋病血清HIV檢測中ELISA法與膠體金免疫層析試驗法的檢測效果分析[J].黑龍江中醫藥，2021，50（3）：440-441.

[5] 賈思公，田娜，王曉帥.兩種品牌膠體金法檢測抗-HIV結果假陽性1例報告[J].醫藥前沿，2020，10（15）：209.

[6] BURGHI G，BIARD L，ROUX A，et al.Characteristics and outcome according to underlying disease in non-AIDS patients with acute respiratory failure due to pneumocystis pneumonia[J].Eur J Clin Microbiol Infect Dis，2021，40（6）：1191-1198.

[7] ZHAO N X，ZENG Z L，LIANG H Y，et al.Estimation of renal function by three CKD-EPI equations in Chinese HIV/AIDS patients：a STROBE-compliant article[J].Medicine（Baltimore），2021，100（22）：e26003.

[8] 金晶，潘玥，高智勇.2012—2018年北京市海淀醫院HIV抗體檢測結果分析及防控策略[J].標記免疫分析與臨床，2020，27（2）：186-189.

[9] 郭劍，高洪艷，王媛.1990—2017年中國艾滋病疾病負擔分析[J].中國艾滋病性病，2021，27（4）：356-359.

[10] LIANG Y H，LI L H，SHUI J W，et al.Reduction of anti-HIV antibody responses in subjects receiving antiretroviral therapy during chronic HIV-1 infection[J].J Clin Virol，2020，128（1）：104414.

[11] 苗岳，郭波，王欣銳，等.ELISA與膠體金法在HIV篩查中的診斷效果對比[J].臨床醫學工程，2021，28（11）：1519-1520.

[12] 鐘秀琴.酶聯免疫吸附法與膠體金法在篩查HIV感染中的意義[J].中國國境衛生檢疫雜志，2020，43（6）：430-431.

（編輯：郭曉添）

作者簡介：劉小蓮，女，大專。