IL-8,CXCR4在多發性骨髓瘤患者骨髓活檢組織中的應用研究*

文/胡冬梅，譚艷仙，梁國華，張道蓮，黎清鳳

多發性骨髓瘤屬于較為常見的一種血液系統惡性腫瘤，其屬于惡性漿細胞疾病，該病多發于中老年人，男性的發病率略高于女性。在患者發病后，其骨髓中的漿細胞將會無限制地增生，這將會對患者的組織和器官造成極大的損傷，危及患者的生命安全[1]。所以，在對患者確診后，需要及時采取有效的治療措施，控制患者的病情進展。隨著現代醫療技術的發展，對多發性骨髓瘤的治療方法也獲得了極大的進步，極大地提高對患者的治療效果，能夠更好地延長患者的生存時間[2]。但是，在實際的治療過程中，由于對患者的治療難度較高，無法取得有效治愈的效果，為了能夠更好地改善患者的預后，在患者發病早期及時確診，對患者的預后有著極其顯著的意義[3]。目前，針對該病主要是采用影像學檢查、血清指標檢驗以及骨髓細胞檢驗等方式，其中骨髓組織活檢的應用效果最為顯著，通過檢查患者的骨髓組織，對判斷和分析患者的病情有著極為顯著的幫助。因此，本文旨在探討分析多發性骨髓瘤患者骨髓活檢組織中白細胞介素-8 以及C-X-C 趨化因子受體4水平的表達與意義。

1 資料和方法

1.1 一般資料

選取陽江市第三人民醫院于2021 年7 月至2022年6 月期間收治的120 例初診多發性骨髓瘤患者進行研究，根據患者的R-ISS 分期進行分組，1 期患者30 例設為甲組，2 期患者50 例設為乙組，3 期患者40 例設為丙組。另選取同期于我院體檢確定正常骨髓象的30 例骨髓組織樣本為丁組。甲組的男女比例為18 ∶12，年齡為38 到72 歲，平均年齡為（54.62±11.86）歲；乙組的男女比例為30 ∶20，年齡為40 歲到71 歲，平均年齡為（54.53±11.92）歲；丙組的男女比例為24 ∶16，年齡為39 歲到74歲，平均年齡為（55.03±12.01）歲；丁組的男女比例為17 ∶13，年齡為41 歲到73 歲，平均年齡為（54.85±11.73）歲。常規資料對比未見顯著差異（P＞0.05）。

1.2 方法

通過全自動免疫組化染色機對全部患者完成檢查，使用試劑為免疫顯色劑。檢查流程為：首先，提取患者適量檢驗標本，通過石蠟包埋處理后，進行切片置入67℃烘箱內，經脫蠟水化后，將樣本取出在過氧化氫溫室中進行10min 的孵育，完成后對切片通過磷酸緩沖液進行沖洗，每次沖洗2min，共沖洗3 次。完成后需要滴加一抗，并再次孵育2h。其次，在完成孵育后，需要在切片添加適量聚合物輔助劑，在常溫環境下孵育20min。孵育完成后需要再次通過磷酸緩沖液進行沖洗，每次沖洗2min，共沖洗3 次。在切片上添加辣根過氧化物酶標記的二抗，在常溫環境下孵育20min。孵育完成后需要第三次通過磷酸緩沖液進行沖洗，每次沖洗2min，共沖洗3 次。最后，通過二氨基聯苯胺法對切片進行染色，并利用清水對切片進行徹底的清洗，再利用蘇木精進行復染，復染完畢后對切片進行脫水處理、封固，利用顯微鏡對切片進行觀察。

1.3 觀察指標

在完成對患者骨髓組織細胞切片的處理后，利用顯微鏡隨機觀察10 個高倍視野范圍內的細胞（每個視野計數100 個細胞），通過對陽性細胞的染色強度以及所占百分比進行統計與分析，確定陽性率。

陽性的判斷標準為：陽性細胞所占百分比低于10%計0 分，陽性細胞所占百分比在10%～25%之間計1 分，陽性細胞所占百分比在26%～50%之間計2分，陽性細胞所占百分比超過50%計3 分；無染色計0 分，染色強度為淡黃色計1 分，染色強度為黃色或棕黃色計2 分，染色強度為棕褐色計3 分。陰性：不超過1 分；弱陽性：2 分到3 分；中強陽性：4 分到5 分；強陽性不低于6 分。

1.4 統計學分析

通過SPSS22.0 統計學軟件分析，百分比表示計數資料，進行卡方檢驗；對計量資料進行t 檢驗，用均數±標準差表示。P＜0.05 表明對比存在差異。

2 結果

2.1 多發性骨髓瘤患者的白細胞介素-8與C-X-C趨化因子受體4檢查結果

多發性骨髓瘤患者的檢查結果如表1 所示。

表1 多發性骨髓瘤患者的白細胞介素-8 與C-X-C 趨化因子受體4 檢查結果[n(%)]

2.2 白細胞介素-8陽性率對比

甲組的白細胞介素-8 陽性率為26.66%（陽性8例，陰性22 例），較乙組、丙組更低，較丁組的6.66%（陽性2例，陰性28例）更高，對比有統計學意義（x2=4.212，P=0.040；x2=16.414，P=0.000；x2=4.320，P=0.037）。

乙組的白細胞介素-8 陽性率為50.00%（陽性25 例，陰性25 例）較丙組更低，較丁組更高，對比有統計學意義（x2=7.149，P=0.007；x2=15.746，P=0.000）。

丙組的白細胞介素-8 陽性率77.50%（陽性31例，陰性9 例）較丁組更高，對比有統計學意義（x2=34.517，P=0.000）。

2.3 C-X-C趨化因子受體4陽性率對比

甲組的C-X-C 趨化因子受體4 陽性率為53.33%（陽性16 例，陰性14 例）較乙組差異較小，對比無統計學意義（x2=0.053，P=0.816），較丙組、丁組的3.33%（陽性1 例，陰性29 例）更高，對比有統計學意義（x2=6.944，P=0.008；x2=18.467，P=0.000）。

乙組C-X-C 趨化因子受體4 陽性率為56.00%（陽性28 例，陰性22 例）較丙組更低，較丁組更高，對比有統計學意義（x2=7.145，P=0.007；x2=22.505，P=0.000）。

C-X-C 趨化因子受體4 陽性率為83.33%（陽性33 例，陰性7 例）較丁組更高，對比有統計學意義（x2=43.011，P=0.000）。

3 討論

多發性骨髓瘤的發病具有發病能夠隱匿、進展緩慢以及診斷難度高等特點，主要是因為患者在發病后，出現的臨床癥狀與表現較多，這就很難對患者進行準確的鑒別與診斷[4]。這種情況主要是因為該病起源于晚期B 細胞，將會對患者的骨髓微環境造成影響，致使腫瘤細胞以及骨髓瘤細胞會大量增殖，從而導致患者發病。隨著骨髓瘤的繁殖、生長以及侵襲，才會導致患者出現相關癥狀，但是骨髓瘤的發病部位較多，從而引發患者出現不同的表現[5]。其中，最為常見的臨床癥狀為骨痛、骨骼變形以及病理性骨折。這種情況的發生主要是因為患者的破骨細胞以及骨細胞活性失衡，尤其是隨著破骨細胞活性的不斷提高，將會對患者的骨細胞產生極大的抑制，致使患者出現骨形成缺失的問題，最終引發患者出現多發性骨髓瘤相關骨病，這將會給患者帶來極大的痛苦，嚴重影響其生活質量[6]。針對這種情況，就需要在患者發病早期及時為患者確診，并采取及時有效的治療措施，才可以有效控制患者的病情進展。

有大量研究資料顯示，骨髓瘤細胞的繁殖與生長，與骨髓微環境有著極為密切的關系。促使越來越多對該病的研究人員，不斷進行深入的研究。尤其是白細胞介素-8 作為炎癥趨化因子，在多發性骨髓瘤的進展中，有著密切的關聯。相關研究資料顯示，骨髓內皮細胞以及骨髓基質細胞都會導致人體白細胞介素-8 水平的提高，該細胞能夠對單核細胞產生影響，促使其轉化為破骨細胞，這將會極大地提高其溶骨以及破骨功能，并可以誘發血管新生，影響人體的微循環。特別是會加劇骨髓瘤細胞的繁殖以及侵襲，極易導致患者的病情加劇，加快患者的病情進展[7]。

同時，還有研究人員發現，白細胞介素-8 還會與C-X-C 趨化因子受體產生相結合，導致生物軸的產生，并能夠在人體中形成更為復雜的信號通路，這種情況會對患者的骨髓微環境產生直接的影響，并促使血管的生成，干擾人體的血液循環，從而對腫瘤細胞增殖起到促進作用。尤其是C-X-C 趨化因子受體4 屬于趨化因子受體，其不僅會對骨髓瘤細胞造成影響，還會對多種白血病細胞產生影響，并能夠與多種相關物質結合，促進腫瘤的侵襲，加劇患者的病情。本次研究結果顯著：甲組的白細胞介素-8陽性率較乙組、丙組更低，較丁組更高，對比有統計學意義（P＜0.05）；乙組的白細胞介素-8 陽性率較丙組更低，較丁組更高，對比有統計學意義（P＜0.05）；丙組的白細胞介素-8 陽性率較丁組更高，對比有統計學意義（P＜0.05）。提示正常骨髓象患者的白細胞介素-8 陽性率較低，而多發性骨髓瘤患者的白細胞介素-8 陽性率明顯更高，且患者的病情分期越嚴重，則陽性率越高；甲組的C-X-C 趨化因子受體4 陽性率較乙組差異較小，對比無統計學意義（P＞0.05），較丙組、丁組更高，對比有統計學意義（P＜0.05）；乙組C-X-C 趨化因子受體4 陽性率較丙組更低，較丁組更高，對比有統計學意義（P＜0.05）；C-X-C 趨化因子受體4 陽性率較丁組更高，對比有統計學意義（P＜0.05）。提示正常骨髓象患者的趨化因子受體4 陽性率較低，而多發性骨髓瘤患者的趨化因子受體4 陽性率較高，而1 期與2 期患者的陽性率大致相同，3 期患者的趨化因子受體4 陽性率則明顯更高。上述結果的出現主要是因為白細胞介素-8 以及C-X-C趨化因子受體4 之間具有直接的聯系，能夠結合形成生物軸，并在人體內建立網絡通路，并能夠對骨髓瘤細胞產生直接的影響，導致微環境血管的大量生成，從而促進患者的病情進展。所以，在對患者進行治療的過程中，可以通過檢查這兩項指標來對患者的病情進行判斷和分析，并采取有效的調節和控制措施，控制患者的病情進展，從而提高患者的治療效果[8]。但是，此次研究由于選取的樣本量有限，存在著一定的局限性，還需要開展更為深入的研究，才可以更好地確認白細胞介素-8 以及C-X-C 趨化因子受體4在多發性骨髓瘤中的作用機制和影響。

綜上所述，通過檢查多發性骨髓瘤患者的白細胞介素-8 以及C-X-C 趨化因子受體4 水平，可以對患者的病情分期進行準確的鑒別與分析，并能夠用于判斷患者的預后效果，這樣就可以根據檢查結果對患者的治療方案進行針對性的調整，從而提高患者的治療效果，更好地控制患者的病情，延長患者的生存時間。