ELISA體外檢測過敏原在蕁麻疹病因篩查中的價值

文/金曉玲，趙振

在各大醫(yī)院的皮膚科室中，既常見又高發(fā)的一種疾病類型當屬蕁麻疹。該疾病的發(fā)生機制主要是因人體受到多種因素的刺激，從而造成皮膚、黏膜及血管發(fā)生暫時性的炎性充血與組織內(nèi)水腫現(xiàn)象[1]。此疾病的特點在于病程長、易反復發(fā)作。其病癥表現(xiàn)包括軀干、四肢或者是面部出現(xiàn)風塊、斑塊，不僅影響機體的美觀性，其瘙癢等病癥在長時間的抓撓下，將會造成患者出現(xiàn)苔蘚、血痂樣變，直接干擾到患者的日常生活[2-3]。而想要有效治療該疾病，預先的病因篩查至關重要，只有了解患者的過敏原，方可提出針對性的治療方案，使患者盡快康復及治愈疾病。目前，隨著醫(yī)療技術的全力發(fā)展，愈來愈多的醫(yī)療人員已重視ELISA 體外檢測的運用。通過對血清定性檢測過敏原特異性IgE 抗體，從而了解引起患者發(fā)病的過敏原，不僅安全可靠，同時也可獲取到準確度更高的結果，是獲取更高療效的核心要素[4]。鑒于此，本文將著重圍繞篩選蕁麻疹病因中選用ELISA 體外檢測過敏原的真實價值進行細致化、深入化分析研究，具體的報道內(nèi)容如下。

1 一般資料與方法

1.1 一般資料

針對本院2021 年12 月至2022 年12 月節(jié)點內(nèi)收治的蕁麻疹患者病歷信息進行抽取與篩查，后確定146 例入選成為觀察對象，同時選擇健康人士15 例起到對照作用，將其分別稱作對照組、觀察組。其中，對照組男女人數(shù)為比9/6，年齡6 個月至73 歲，平均年齡（58.36±0.17）歲，病程1 月至5 年，平均病程（3.52±0.04）年；觀察組男女人數(shù)為83/63，年齡5 個月至75 歲，平均年齡（61.61±0.13）歲，病程1月至5 年，平均病程（3.43±0.06）年。準入條件為：（1）所有調(diào)查對象對此次調(diào)研活動均知情且簽訂同意書；（2）排除因寒冷、日光、壓力等物理原因所誘發(fā)蕁麻疹疾病的患者；（3）無其他過敏史患者；（4）檢測1 周前并未服用過免疫抑制劑、糖皮質(zhì)激素等藥物；（5）排除妊娠期或者是哺乳期女性患者；（6）排除精神異常，限制正常交流的人員。

1.2 方法

針對觀察組與對照組均在清晨空腹的狀態(tài)下，對其抽取3～5ml 的靜脈血液樣本，并將血液保存于加蓋試管中，隨后，以4000r/min 的方式共計進行10min 的離心處理，從而獲取上清液，用于后續(xù)的檢測。在檢測受檢者的血液樣本過程中，所選用的試劑盒主要源于美國ASI 公司所生產(chǎn)，選用的型號分別為IVT708 與IVT706。其中，IVT708 試劑盒用于蚊子、蟑螂、蒿屬植物、普通豚草、點青霉、黑根霉、交鏈孢、貓、狗毛發(fā)皮屑、桉樹、桑樹、梧桐、榆樹、白樺、粉螨、塵螨及屋塵等吸入性過敏原類型的檢測；IVT706 試劑盒用于牛肉、羊肉、雞肉、鱈魚、帶魚、金槍魚、大比目魚、大馬哈魚、蛋白、蛋黃、牛奶、蝦、龍蝦、螃蟹、綠豆、大豆、花生等食入性過敏原類型的檢測。隨后，通過ELISA 體外檢測方法的運用檢測所有觀察對象的樣本。首先，在反應管中注入受檢人員的血清，并且在室溫條件下進行90min至100min 的孵育；其次，檢測人員將血清取出，并在管內(nèi)注入清洗液進行清洗，后添加適量的綠色結合液，進行約16h 的孵育，待達到孵育時間后，將結合液取出，并通過清洗液的運用展開2 次沖洗；最后，在管內(nèi)添加適量的黃色底物，待靜置約90min 后，檢測人員對顏色變化情況進行觀察，如果反應管所呈現(xiàn)的顏色為黃色，則可判定為陰性；如果反應管所呈現(xiàn)的顏色為紫色，則可判定為陽性。

1.3 觀察指標

對應用不同檢測試劑盒下，所有觀察對象的吸入性、食入性、2 種或2 種以上過敏原檢出陽性率進行對比分析。

1.4 統(tǒng)計學方法

調(diào)研所得數(shù)據(jù)的處理利用SPSS24.0 統(tǒng)計學軟件；計量資料采用（x±s）表示，經(jīng)t 檢驗；計量資料采用（%）表示，經(jīng)x2檢驗；統(tǒng)計學差異采用P＜0.05 表示。

2 結果

2.1 兩組血清IVT706試劑盒檢測結果對比

見表1 所示，觀察組利用IVT706 試劑盒檢測后，結果顯示食入性過敏原陽性反應總檢出率為77.39%（113/146），對照組為0.00%（0/15），觀察組檢出率顯著高于對照組（P＜0.05）。

表1 兩組血清IVT706 試劑盒檢測結果對比（%）

2.2 兩組血清IVT708試劑盒檢測結果對比

見表2 所示，觀察組利用IVT708 試劑盒檢測后，結果顯示吸入性過敏原陽性反應總檢出率為58.89%（86/146），對照組為6.67%（1/15），觀察組檢出率顯著高于對照組（P＜0.05）。

表2 兩組血清IVT708 試劑盒檢測結果對比（%）

2.3 兩組2種或2種以上過敏原陽性反應對比

見表3 所示，對照組無2 種或2 種以上過敏原陽性反應，觀察組2 種或2 種過敏原陽性反應的總檢出率為21.91%（32/146），兩組相較有顯著差異（P＜0.05）。

表3 兩組2 種或2 種以上過敏原陽性反應對比（%）

3 討論

在醫(yī)院的皮膚科中，蕁麻疹已屬于多發(fā)性、難治性的一種疾病，任何年齡段皆有可能發(fā)病。在身患蕁麻疹疾病后，患者最初的病癥表現(xiàn)為病灶部位瘙癢，隨著病情的不斷發(fā)展，相較于周邊的皮膚表面來講，病灶部位的皮膚將會發(fā)生發(fā)紅、光滑、蒼白或者是風團凸起表現(xiàn)，雖然直徑相對較小，普遍在12mm 以下，但是患者在情緒激動、運動以及遇熱的情況下，將會誘發(fā)針刺疼痛、瘙癢難忍等表現(xiàn)，直接影響到患者的正常生活，降低其生活質(zhì)量[5-6]。在臨床治療中，多數(shù)采取服用抗組胺藥物。但是，長期的臨床實踐發(fā)現(xiàn)：由于病因不同、過敏原不同，造成患者用藥后的療效同樣也存在較大的差異?，F(xiàn)階段，主要劃分蕁麻疹疾病的過敏原為吸入性、食入性兩大類，同時又可將這兩大類劃分為諸多種過敏原類型，如果對其發(fā)病的主要過敏原因素缺乏了解，便難以提高后續(xù)治療的針對性與有效性。由此可見，在蕁麻疹疾病篩查病因中采取可靠的過敏原檢測方法顯得至關重要。臨床目前將蕁麻疹疾病劃分為四種變態(tài)反應類型。其中,I 型變態(tài)反應普遍與食物變態(tài)反應相關；II型變態(tài)反應普遍與藥物反應、輸血反應相關；III 型變態(tài)反應普遍與免疫復合物及蕁麻疹所誘發(fā)的血管炎相關；IV 型變態(tài)反應普遍與物理性因素或者是局部接觸致敏物相關。而所有類型的介導均在于IgE，同時也將其稱之為IgE 依賴反應，在此機制方面，就是上述所提到的各類變態(tài)反應原使患者機體中有IgE類抗體的生成，并且在血循環(huán)中嗜堿性粒細胞以及血管四周肥大細胞處起到吸附作用，再次侵入抗原并且與肥大細胞結合，其表面的高親和性IgE 受體會有抗原抗體反應的出現(xiàn)，直接改變肥大包膜的穩(wěn)定性，也使其內(nèi)部產(chǎn)生系列性的生化改變，釋放一系列的脫顆粒以及其他化學介質(zhì)，使患者皮膚表面有風團的形成[7-8]。因此，在篩查蕁麻疹疾病的病因中，IgE 起到了重要作用，對變應特異性IgE 進行檢測可提高診療蕁麻疹疾病的有效性。本文通過對美國ASI公司生產(chǎn)的試劑盒（IVT708、IVT706）的運用，針對146 例蕁麻疹患者以及15 例健康人士利用ELISA體外定性檢測血清過敏原IgE 抗體，顯示觀察組、對照組食入性過敏原陽性檢出率分別為77.39%、0%，吸入性過敏原陽性檢出率分別為58.89%、6.67%，有著明顯的差異（P＜0.05）。同時，觀察組患者2 種或2 種以上的吸入性、食入性過敏原陽性檢出率分別為14.38%、7.53%，如此可充分表明在檢測蕁麻疹患者過敏原中利用ELISA 體外檢測的準確性、可靠性與必要性，也整體提高了篩查蕁麻疹病因的效率。陳慧敏、蔣源學者在其研究中提出運用免疫印跡法進行蕁麻疹過敏原篩查，其吸入性過敏原陽性檢出率為65%，食入性為57.5%，其結果與本文調(diào)查結果相似[9]。楊夢瑤學者在其研究中發(fā)現(xiàn)：蕁麻疹患者的主要過敏原在于粉螨、塵螨、牛奶、腰果、屋塵、混合草，其中，以吸入性過敏原的發(fā)病率較高，認為這與調(diào)查所在地區(qū)雨量充沛、植被茂密、農(nóng)業(yè)發(fā)達相關[10]。而本文的調(diào)查結果顯示：患者的主要過敏原來自肉產(chǎn)品、屋塵以及動物毛發(fā)，表明所處的地域不同，蕁麻疹患者發(fā)病的過敏原同樣也有著較大差異。

綜上所述，在篩查蕁麻疹患者病因中，運用ELISA 體外檢測過敏原，相較于免疫印跡法、皮膚點刺試驗法等諸多種過敏原檢測法而言，其結果有著良好的一致性，但是，此種檢測方法能夠避免患者接受體內(nèi)試驗，具備無痛苦、無創(chuàng)、安全可靠、操作便利、結果準確值高、篩查效率高等諸多優(yōu)勢。因此，具備在臨床檢測中推行運用的價值。