豬輪狀病毒G1P[7]株分離鑒定及多克隆抗體制備

李素芬，湯學超，周金柱，王丹丹，朱雪蛟，陶然，李運川，郭容利，張雪寒*，李彬*

(1. 南京農業大學動物醫學院，江蘇 南京 210095；2. 江蘇省農業科學院獸醫研究所，江蘇 南京 210014)

輪狀病毒(rotavirus，RV)感染與多種哺乳動物和鳥類的腸炎和腹瀉有關[1]。RV是非囊膜二十面體病毒顆粒，包含11段雙鏈 RNA基因組[1]。病毒粒子由3層病毒結構蛋白組成，VP2構成核心，VP6構成內層，VP7和VP4構成外殼，外殼包含血清型/基因型特異性表位。根據VP6蛋白的抗原性可將RV分類為12個血清群(A～L)[2-3]，A、B、C、E和H群RV已經被證實可感染豬，其中感染人和動物最常見的為A群輪狀病毒(RVA)。

豬輪狀病毒A群(PoRVA)感染仔豬呈世界流行，各國豬場中 PoRVA 的陽性率呈明顯走高趨勢，報道最高感染率可達70%以上，引起世界各國重視[4-5]，常與豬流行性腹瀉病毒(PEDV)等其他腹瀉病原混合感染，給世界養豬業造成嚴重的經濟損失[6-7]。2種外衣殼蛋白(VP7和VP4)刺激中和抗體的產生，形成了RVA菌株G(糖蛋白)和P(蛋白酶敏感)雙基因分型系統的基礎。這種雙基因分型系統通常用于RVA分類，并由輪狀病毒分類工作組不斷更新。根據這一分類體系，全球已描述了42種G和58種P基因型[8-9]。G/P雙基因組合的多樣性是免疫保護的重要決定因素，與疫苗研制高度相關[8，10]。因此，持續監測流行的RVA毒株對于了解區域流行病學信息和更新新型疫苗毒株非常重要。

小鼠EDIM毒株和猿猴SA-11毒株是能夠在細胞培養中繁殖的第一批RV毒株[11-12]。牛和人源RV分別于1971年和1980年在細胞培養中首次分離出來[13-14]。本研究旨在從臨床發病豬樣品中分離PoRV，對分離毒株的VP4和VP7基因進行序列和遺傳進化分析，為疫苗研制儲備生物學材料，并且制備該分離毒株的多克隆抗體，為PoRV致病機制研究提供可靠的工具。……