豬流行性腹瀉病毒熒光免疫層析檢測(cè)試紙條的研制和應(yīng)用

陳芷珊，陳瀅鍇，陳中婷，蒙淑玲，江明生，陳海蘭，3，4*

(1. 廣西大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，廣西 南寧 530004；2. 廣西壯族自治區(qū)獸用生物制品工程研究中心，廣西 南寧 530004；3. 廣西畜禽繁育與疾病防控重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣西 南寧 530004；4. 廣西高校動(dòng)物疫病預(yù)防與控制重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣西 南寧 530004)

豬流行性腹瀉病毒(PEDV)屬于冠狀病毒科冠狀病毒屬的單股正鏈RNA病毒，可感染各日齡各品系的豬，引發(fā)豬流行性腹瀉(PED)。PED是一種以腹瀉、嘔吐、脫水為主要特征的高度接觸性腸道傳染病，對(duì)哺乳仔豬危害最大，死亡率可高達(dá)100%[1]。豬流行性腹瀉在1971年首次發(fā)現(xiàn)于英國(guó)，隨后在歐洲和亞洲的部分國(guó)家相繼流行，各地的哺乳仔豬大量被感染并發(fā)生死亡[2]。2007年在泰國(guó)暴發(fā)PED，給當(dāng)?shù)氐酿B(yǎng)豬業(yè)造成了巨大損失[3]。2004年杜堅(jiān)等[4]首次用血清學(xué)方法證實(shí)了廣西豬場(chǎng)存在PEDV感染，但未出現(xiàn)大規(guī)模疫情暴發(fā)。2010年，中國(guó)首先于南方地區(qū)出現(xiàn)PED暴發(fā)，隨后遍及全國(guó)各地，給中國(guó)的養(yǎng)豬企業(yè)造成了重大經(jīng)濟(jì)損失和影響[5]。近幾年的調(diào)查結(jié)果表明，PEDV在廣西的平均檢出率最高為58.26%，表明PED在廣西生豬養(yǎng)殖場(chǎng)中的危害不容忽視[6]。對(duì)PEDV感染的早期篩查是控制該病毒傳播和PED疫情蔓延的關(guān)鍵，因此，建立一種PEDV現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)方法對(duì)PED的防制有著重要意義。

常用的PEDV檢測(cè)方法主要包括病原學(xué)檢測(cè)方法和血清學(xué)檢測(cè)方法，其中病原學(xué)檢測(cè)方法包括常規(guī)反轉(zhuǎn)錄PCR(RT-PCR)、熒光定量PCR和環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)(RT-LAMP)，而血清學(xué)檢測(cè)方法主要有間接免疫熒光(IFA)、病毒中和檢測(cè)(VN)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)和免疫層析技術(shù)等[7]。……