膀胱癌細胞內在程序性死亡受體-1受體功能對腫瘤的影響〔1〕

蔣 軼,葉 韜,陳 周,高加勝,張文圣

(九江市第一人民醫院,江西 九江 332001)

膀胱癌是泌尿系統常見的一種惡性腫瘤性疾病,多數患者表現為無痛血尿、尿頻、尿急、尿痛、排尿困難,隨著膀胱癌腫瘤的侵襲、轉移,可引起累及系統的相關癥狀,嚴重的甚至出現腎功能不全,嚴重威脅患者的日常生活和生命安全[1-2]。臨床上治療膀胱癌主要以手術治療為主,并聯合其他治療方式。根據膀胱癌局部腫瘤浸潤程度將其分為非肌層浸潤性膀胱癌和肌層浸潤性膀胱癌,并依據分期、分級以及全身情況采用個體化治療方案。臨床確診病例中非肌肉浸潤性膀胱癌患者占70%～75%,肌層浸潤性膀胱癌患者占25%～30%,且診斷時往往有遠處轉移。經過根治性膀胱切除術聯合雙側盆腔淋巴結清掃治療后,膀胱癌患者仍面臨著術后復發、轉移、死亡的風險[3-4]。隨著醫學技術的發展,全身免疫治療逐漸被應用到膀胱癌的治療中,程序性死亡受體1(PD-1)在轉移性膀胱癌或者化療失敗的膀胱癌中展現出了良好的效果。本文旨在探討膀胱癌細胞內在PD-1受體功能對腫瘤的影響。報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019年1月—2023年1月膀胱癌患者80 例,其中男39 例,女41 例;年齡(53.55±4.56) 歲;體質量指數(21.22±1.02) kg/m2;臨床TNM分期:T1期13 例,T2期17 例,T3期20 例,T4期30 例;腫瘤分級:G1者18 例,G2者22 例,G3者40 例;非肌層浸潤性膀胱癌42 例,肌層浸潤性膀胱癌38 例。研究對象簽署知情同意書,且研究通過倫理委員會審核批準。

1.2 納入及排除標準

納入標準:臨床診斷均為膀胱癌,且符合《中國膀胱癌保膀胱治療多學科診治協作共識》[5]診斷標準;研究前均未接受過任何治療者;生命體征穩定均無生命危險者;個人臨床資料齊全者。

排除標準:合并心、肝、腎等器官功能異常或者惡性腫瘤者;精神異常無法正常溝通交流者;研究期間患者組織標本遺失或者損害者。

1.3 方法

采用免疫組織化學染色法檢測膀胱癌患者癌組織以及距離腫瘤邊緣3 cm的膀胱癌旁組織中PD-1的表達:將標本進行預處理,浸泡在多聚甲醛中48 h后用石蠟進行包埋、切片、烘烤、脫蠟水化、磷酸鹽緩沖液漂洗。在顯微鏡下進行二氨基聯苯胺法(DAB)顯色,自來水沖洗,蘇木精復染色,自來水沖洗,隨后脫水、封片、鏡檢。采用逆轉錄聚合酶鏈式反應技術檢測膀胱癌患者癌組織以及距離腫瘤邊緣3 cm的膀胱癌旁組織中PD-1 mRNA的表達:使用Trizol試劑提取膀胱癌組織總RNA,逆轉錄制備cDNA,并進行聚合酶鏈式反應和電泳。

1.4 統計學方法

2 結 果

2.1 PD-1 mRNA在膀胱癌中的表達

膀胱癌患者癌組織中PD-1陽性表達率63.75%(51/80),PD-1 mRNA陽性表達率68.75%(55/80),而距離腫瘤邊緣3 cm的膀胱癌旁組織均未見明顯的PD-1和PD-1 mRNA表達。

2.2 PD-1在膀胱癌中的表達強度與患者臨床病理參數的關系

PD-1和PD-1 mRNA的表達強度與膀胱癌患者的年齡、性別、腫瘤分級之間無明顯的相關性(P>0.05),而PD-1和PD-1 mRNA的表達強度與TNM分期具有明顯的相關性(P<0.05),即隨著膀胱癌患者腫瘤分期的增加,PD-1和PD-1 mRNA表達逐漸增加(P<0.05)(見表1和表2)。

表1 膀胱癌患者PD-1表達與臨床病理學參數之間的關系 單位:例

表2 膀胱癌患者PD-1 mRNA表達與臨床病理學參數之間的關系

3 討 論

膀胱癌是女性常見的惡性腫瘤,也是男性第四大常見惡性腫瘤。據統計,全世界有50萬例新發膀胱癌病例和20萬死亡病例,僅在美國,每年就有8萬多例新發病例和1.7萬死亡病例[6-7]。膀胱癌的病因目前尚不明確,主要受內在遺傳因素和外在環境因素的影響,且其發生發展受多因素影響。研究[8-9]表明,膀胱癌與其他癌癥一樣,是由于多種致癌因素長期作用于正常細胞,導致原癌基因被激活,在復制及轉錄過程中沒能及時修復受損的DNA,使癌細胞無限制地復制增殖直至發生癌變。

PD-1是一種重要的免疫抑制分子,細胞程序性死亡受體1-配體(PD-L1)蛋白正是PD-1的配體。T細胞介導的免疫由檢查/平衡系統控制,PD-1/PD-L1抑制通路也叫做免疫檢查點,負責調節T細胞的活化和效應功能,維持自身的耐受性[10-11]。PD-1位于T細胞,能夠與基質細胞中的PD-L1結合,二者結合后可使T細胞失去攻擊癌細胞的能力。PD-L1與PD-1的結合作為介導T細胞活化的共抑制信號,可抑制T細胞的殺傷功能,對人體免疫應答起到負調節作用[12-13]。在正常細胞中,PD-1的激活使T細胞失去攻擊能力,減輕由于慢性感染引起的組織損傷,這種機制是為了保護機體在炎癥狀態時免受不必要的組織損傷[14-15]。然而腫瘤卻將這種機體免疫保護機制用于自身的生存。因為腫瘤細胞能夠上調PD-1配體的表達,PD-L1是癌癥細胞使用的主要的PD-1配體,PD-L1與PD-1的結合導致腫瘤浸潤淋巴細胞失去殺傷能力,使得腫瘤生長不受抑制[3,16-17]。本研究發現,膀胱癌患者癌組織PD-1陽性表達率為63.75%(51/80),PD-1 mRNA陽性表達率為68.75%(55/80),而距離腫瘤邊緣3 cm的膀胱癌旁組織均未見明顯的PD-1表達。通過臨床相關性分析發現,PD-1的表達與膀胱癌腫瘤臨床TNM分期密切相關(P<0.05),但與膀胱癌患者的年齡、性別、腫瘤分級等無明顯的相關性(P<0.05),說明在膀胱癌患者腫瘤細胞中PD-1高表達,且其表達強度與腫瘤TNM分期密切相關。隨著膀胱癌患者腫瘤TNM分期的增加,機體內腫瘤浸潤淋巴細胞失去殺傷能力,使免疫系統處于失衡狀態,導致膀胱癌細胞不斷地生長增殖、擴散、轉移,致使病情加重,進而導致腫瘤細胞中PD-1表達增加,威脅生命安全。腫瘤細胞中PD-1的高表達能夠促進膀胱癌細胞的快速生長,因此臨床上可通過注射PD-1抗體進行治療,以控制疾病進展,提高生存率。明確PD-1受體功能對膀胱癌的影響具有非常重要的價值和意義,可為膀胱癌患者提供最優治療方案,改善生活質量。

綜上所述,膀胱癌患者癌組織中PD-1高度表達,其在膀胱癌腫瘤發生發展的過程中具有一定的作用,可用來評估膀胱癌進展程度。