淺談官方獸醫(yī)如何做好羊布氏桿菌病的檢疫

楊佳明，溫宏葦

1.鹽池縣動(dòng)物疾病預(yù)防控制中心（動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所），寧夏吳忠 751500；2.鹽池縣農(nóng)業(yè)綜合執(zhí)法大隊(duì)，寧夏吳忠 751500

布氏桿菌病能夠引起繁殖障礙，同時(shí)還會(huì)影響到養(yǎng)殖人員和官方獸醫(yī)的健康，嚴(yán)重時(shí)會(huì)引發(fā)嚴(yán)重的公共衛(wèi)生問題。當(dāng)羊感染布氏桿菌病時(shí)會(huì)出現(xiàn)臨床癥狀，但是若要進(jìn)一步確診疾病，則還需要對提取樣本展開檢疫，作為官方獸醫(yī)人員必須掌握科學(xué)地檢疫檢測方式，提高對羊布氏桿菌病的認(rèn)識(shí)，并對基層養(yǎng)殖人員的布氏桿菌病防控措施進(jìn)行指導(dǎo)，以此防止布氏桿菌病對羊養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)的影響。

1 羊布氏桿菌病的流行病學(xué)

羊布氏桿菌病沒有明顯的季節(jié)性特征，春夏秋冬均存在感染可能，但是春季和夏季溫度較高，染病概率要明顯高于其他季節(jié)。羊布氏桿菌病的地域性特征非常明顯，由于布氏桿菌病有著較強(qiáng)的傳染性，所以養(yǎng)殖密度較大的牧區(qū)感染風(fēng)險(xiǎn)比較大，在一些地區(qū)內(nèi)受到防控因素的影響還非常容易形成布氏桿菌病疫情。羊布氏桿菌傳染源非常廣泛，由于布氏桿菌病具有人畜共患的特點(diǎn)，因此無論是人還是牛羊均可以成為布氏桿菌攜帶者，無論是攜帶病原體、染病羊，還是病羊的胎衣、胎兒均可以作為傳染源。除此之外，染病羊所排出的糞便是羊布氏桿病的主要傳染源，很多養(yǎng)殖人員會(huì)將糞便堆積在養(yǎng)殖區(qū)周邊，而糞便中的病原體會(huì)通過降水或者風(fēng)力等傳播至周邊區(qū)域，并污染飼料、飲用水以及草場等等。

羊布氏桿菌病具有傳染性強(qiáng)和傳播途徑廣泛的特征，一旦養(yǎng)殖場內(nèi)出現(xiàn)染病羊，那么病原體便能夠通過各類渠道感染健康羊和養(yǎng)殖人員。通常情況下布氏桿菌病的傳播途徑有三種，即呼吸道、皮膚接觸和消化系統(tǒng)。首先，病原體能夠通過污染塵埃或者形成氣溶膠等等，隨著健康羊的呼吸進(jìn)入到呼吸道當(dāng)中，而后侵入羊機(jī)體，最終導(dǎo)致羊感染；其次，布氏桿菌病原體還能夠通過皮膚進(jìn)入到羊機(jī)體內(nèi)，這是該病的主要傳播方式，如在養(yǎng)殖過程中，當(dāng)圈舍內(nèi)出現(xiàn)染病羊后其周邊的環(huán)境會(huì)被排泄物等迅速污染，當(dāng)健康羊接觸染病羊排出的糞便，或者接觸被糞便和分泌物污染的棚舍、土壤后便會(huì)染病；最后，消化系統(tǒng)也能夠傳播羊布氏桿菌病，當(dāng)健康羊攝入帶有病原體的飼料或者飲用被污染的水源后便會(huì)染病。

羊布氏桿菌病的發(fā)生機(jī)制較為復(fù)雜，近些年羊布氏桿菌病的發(fā)生次數(shù)明顯呈現(xiàn)上升趨勢，因此該病的發(fā)生機(jī)制也成為眾多研究人員的研究重點(diǎn)。從現(xiàn)有研究成果來看，該病的致病菌為布氏桿菌，這種病菌通常會(huì)寄生在牛羊的臟器和生殖系統(tǒng)當(dāng)中，布氏桿菌對外界環(huán)境的抵抗力較差，但是臟器和生殖系統(tǒng)溫度適宜，能夠?yàn)椴【姆敝程峁l件，當(dāng)羊感染布氏桿菌病后機(jī)體會(huì)出現(xiàn)應(yīng)激和感染，而隨著病情的加重，病羊還會(huì)出現(xiàn)食欲減退、體質(zhì)衰弱和炎癥等等，其中以生殖系統(tǒng)異常為代表的臨床表現(xiàn)最為典型。

2 臨床表現(xiàn)

羊布氏桿菌病的臨床表現(xiàn)非常明顯，專業(yè)獸醫(yī)在布氏桿菌病檢疫檢測過程中除了借助實(shí)驗(yàn)室檢測技術(shù)以外，也可以通過臨床表現(xiàn)對染病羊展開初篩，因此在疫病診斷與防控過程中，專業(yè)獸醫(yī)只有掌握羊布氏桿菌病的臨床表現(xiàn)，才能夠科學(xué)、嚴(yán)謹(jǐn)開展后期實(shí)驗(yàn)室診斷工作。

從傳播途徑來看，羊布氏桿菌病能夠通過消化系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)和皮膚感染健康羊，當(dāng)病原體進(jìn)入機(jī)體后會(huì)引發(fā)一系列異常反應(yīng)，其中典型為生殖系統(tǒng)癥狀，如不孕不育、流產(chǎn)死胎以及睪丸炎等等。首先，公羊感染布氏桿菌病后顯著癥狀表現(xiàn)在陰囊和睪丸部位，染病羊的陰囊會(huì)出現(xiàn)硬化的情況，且受到疼痛感的影響，病羊還會(huì)出現(xiàn)行動(dòng)不便的現(xiàn)象。隨著病情的加重，病羊的睪丸出現(xiàn)異常，表現(xiàn)為萎縮和疼痛，此時(shí)病羊的進(jìn)食量會(huì)迅速下降，嚴(yán)重時(shí)病羊的生殖能力完全喪失。一些公羊感染布氏桿菌病后還會(huì)出現(xiàn)關(guān)節(jié)病，如腫脹和炎癥等等，染病比較嚴(yán)重的病羊還會(huì)出現(xiàn)跛行以及行走困難等癥狀。布氏桿菌病將會(huì)對母羊產(chǎn)生不可逆的損傷，同時(shí)也會(huì)引起生殖系統(tǒng)疾病。妊娠期母羊感染布病后會(huì)出現(xiàn)流產(chǎn)和死胎等情況，其中在妊娠后3～4個(gè)月時(shí)流產(chǎn)的風(fēng)險(xiǎn)更高。除了這些癥狀以外，染病母羊還會(huì)出現(xiàn)食欲減退、口干舌燥以及精神沉郁等現(xiàn)象，一些母羊的陰部會(huì)出現(xiàn)黃色分泌物，母羊的乳房會(huì)存在腫脹等情況，當(dāng)母羊流產(chǎn)后生殖系統(tǒng)很容易出現(xiàn)炎癥，此外也會(huì)出現(xiàn)關(guān)節(jié)疾病，染病母羊的食欲迅速衰退，會(huì)引發(fā)營養(yǎng)不良，且死亡率極高。

3 官方獸醫(yī)常見檢測方式

羊布氏桿菌病的檢測方式較多，現(xiàn)階段獸醫(yī)經(jīng)常使用的方式有試紙卡檢測、虎紅平板凝集試驗(yàn)檢測、萊特試驗(yàn)以及抗人球蛋白試驗(yàn)檢測等等，其中效果較好、效率較高以及應(yīng)用最為普遍的檢測方式為試紙卡檢測和虎紅平板凝集試驗(yàn)兩種。

3.1 試紙卡檢測

試紙卡是常見的布氏桿菌病檢測方式之一，該檢測方式以膠體金免疫層析技術(shù)為基礎(chǔ)，在檢測過程中當(dāng)檢測樣本內(nèi)存在布氏桿菌病抗體時(shí)，其就會(huì)與膠體金包被的抗原發(fā)生反應(yīng)并產(chǎn)生復(fù)合物，復(fù)合物會(huì)緩慢轉(zhuǎn)移至試紙NC膜的另一端。當(dāng)復(fù)合物進(jìn)入到T區(qū)時(shí)就會(huì)出現(xiàn)一道T線。通過試紙卡檢測布氏桿菌的結(jié)果分為三種，即陰性、陽性和無效。若表現(xiàn)為C線則表明免疫層析發(fā)生，表明試驗(yàn)試紙有效，當(dāng)出現(xiàn)T線時(shí)則表明樣本內(nèi)含有布氏桿菌抗體。為了確保檢測結(jié)果，官方獸醫(yī)需要嚴(yán)格按照流程和要求展開檢疫檢測工作，并注意以下幾個(gè)方面：第一，為了避免試紙卡失效，試紙必須保存在陰涼處且保存溫度最高不能超過30℃，試紙卡要避免陽光直射，同時(shí)也不能冷凍存儲(chǔ)；第二，注意保質(zhì)期，通常情況下試紙卡的有效期為18個(gè)月；第三，檢測樣本通常為1mL血液，1500轉(zhuǎn)/min離心處理，若處理后的樣品無法立刻進(jìn)行試驗(yàn)，24h內(nèi)應(yīng)當(dāng)冷藏處理，24h外應(yīng)當(dāng)冷凍保存。在檢測前無論是試紙卡還是檢測樣本均應(yīng)當(dāng)與室內(nèi)溫度一致；第四，在試驗(yàn)后5min左右就會(huì)出現(xiàn)結(jié)果，超過10min時(shí)的結(jié)果無效；第四，觀察試驗(yàn)結(jié)果，依照試紙卡呈現(xiàn)內(nèi)容可以判定試驗(yàn)結(jié)果為陰性、陽性和無效。樣本為陽性時(shí)，C線和T線均呈現(xiàn)紅色，紅色顏色的深淺并不影響判定結(jié)果。陰性時(shí)C線為紅色，而T線不為紅色，這種結(jié)果表明檢測樣本為陰性。無效時(shí)C線不為紅色，而T線無論為紅色還是不顯示均表明此次試驗(yàn)結(jié)果無效，需要重新試驗(yàn)；第五，試紙?jiān)陂_封后需要在1h內(nèi)使用，同時(shí)布氏桿菌病具有人畜共患特征，在試驗(yàn)過程中官方獸醫(yī)需要做好防護(hù)工作，此外檢測的樣品還具有潛在傳染性，因此試驗(yàn)后需要將這些材料作為微生物危險(xiǎn)品進(jìn)行科學(xué)處理。

3.2 虎紅平板凝集試驗(yàn)

虎紅平板凝集試驗(yàn)多應(yīng)用于羊布氏桿菌病的初篩當(dāng)中，其原理以通過樣本血清與抗原之間發(fā)生的反應(yīng)為依據(jù)判斷其是否感染疫病。虎紅平板凝集試驗(yàn)的優(yōu)點(diǎn)在于檢測成本較低，檢測流程簡單，但是這種檢測方式也存在缺陷，如會(huì)出現(xiàn)假陽性、官方獸醫(yī)需要具備超強(qiáng)的色彩識(shí)別能力等等，若獸醫(yī)人員為色弱則不能應(yīng)用此種檢測方式。通過虎紅平板凝集試驗(yàn)檢測出的陽性樣本會(huì)通過試管凝集試驗(yàn)進(jìn)行復(fù)檢，以此確保檢測質(zhì)量，若單獨(dú)使用試管凝集試驗(yàn)檢測布氏桿菌，其也會(huì)出現(xiàn)假陽性或者假陰性等，因此官方獸醫(yī)通常會(huì)將兩者結(jié)合使用。

3.3 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)

在血清學(xué)檢疫過程中最為常見的是酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)，這種試驗(yàn)檢測依據(jù)為抗原和抗體之間發(fā)生的反應(yīng)，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的優(yōu)勢為檢測效率高、靈敏度強(qiáng)以及檢測方便等等，缺點(diǎn)為檢測結(jié)果存在假陽性或者假陰性。從酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的工作原理來看，當(dāng)病原體侵入羊體內(nèi)后，病羊自身的免疫系統(tǒng)內(nèi)會(huì)產(chǎn)出抗體，在檢測前獸醫(yī)人員需要采集已感染羊體內(nèi)的血清并作為抗原使用，將抗原與檢測病羊的血清相互結(jié)合后，若檢測血清內(nèi)還有抗體，那么其就會(huì)與抗原發(fā)生反應(yīng)并形成沉淀物，即可以判定其為陽性，但是若沒有發(fā)生反應(yīng)且沒有沉淀物產(chǎn)生，那么就可以判定結(jié)果為陰性，陽性代表被檢測羊體內(nèi)存在布氏桿菌病原體，相反則并未染病。

酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)主要應(yīng)用離心機(jī)、抗原、專業(yè)滴定板以及采血注射器等，試驗(yàn)流程大致為采血、離心、滴液和觀察結(jié)果。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)結(jié)果分為兩種，即凝集和無凝集，當(dāng)試驗(yàn)結(jié)果為無凝集時(shí)則表明樣本內(nèi)不含有布氏桿菌，呈陰性。但是若出現(xiàn)少量凝集、50%凝集、大部分凝集以及全部凝集現(xiàn)象時(shí)則為陽性，代表被檢測羊?yàn)殛栃郧乙呀?jīng)感染布氏桿菌病。

4 羊布氏桿菌病綜合防控措施

4.1 提升科學(xué)防控水平，嚴(yán)謹(jǐn)對待羊布氏桿菌病

養(yǎng)殖人員是羊養(yǎng)殖過程中的主要管理者，而專業(yè)獸醫(yī)人員又是防控布氏桿菌病的中堅(jiān)力量，因此無論是養(yǎng)殖人員還是專業(yè)獸醫(yī)，均需要提升對羊布氏桿菌的認(rèn)識(shí)，掌握專業(yè)防控知識(shí)，積極運(yùn)用各項(xiàng)防控技術(shù)，以此提升布氏桿菌病防控效果，將疫病對養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)的影響降到最低。首先，基層獸醫(yī)人員應(yīng)當(dāng)定期開展布氏桿菌病防控技術(shù)培訓(xùn)工作，全面提升獸醫(yī)人員檢疫檢測和疫病防控能力，培訓(xùn)的內(nèi)容應(yīng)當(dāng)包括羊布氏桿菌病的發(fā)生機(jī)制、流行特點(diǎn)、臨床表現(xiàn)、疫病檢測以及個(gè)人防護(hù)等，以此使獸醫(yī)人員充分掌握布氏桿菌病的防控手段和檢測方式；其次，獸醫(yī)人員還應(yīng)當(dāng)向基層養(yǎng)殖人員做好教育培訓(xùn)工作，羊布氏桿菌病臨床表現(xiàn)比較顯著，因此可以將典型癥狀作為病羊初篩條件，此外通過組織教育培訓(xùn)工作還能夠向廣大養(yǎng)殖人員傳播疫病防控知識(shí)，幫助養(yǎng)殖人員提升布氏桿菌病的防控水平。

4.2 結(jié)合養(yǎng)殖實(shí)際，針對性制定防控方案

在產(chǎn)業(yè)發(fā)展過程中養(yǎng)殖人員需要結(jié)合養(yǎng)殖實(shí)際，以羊群健康情況針對性制定防控方案。首先，在養(yǎng)殖過程中若發(fā)生過布氏桿菌病，養(yǎng)殖人員需要結(jié)合防控經(jīng)驗(yàn)分析疫情發(fā)生原因，同時(shí)做好采樣工作，與專業(yè)獸醫(yī)人員相互配合做好病原菌檢測工作，并從傳播途徑、傳播源等方面入手完善防控措施；其次，對布氏桿菌感染風(fēng)險(xiǎn)展開有效評估，養(yǎng)殖人員需要做好羊群健康情況的監(jiān)測工作，而官方獸醫(yī)人員則需要掌握整個(gè)轄區(qū)內(nèi)布氏桿菌病發(fā)生動(dòng)態(tài)，對高風(fēng)險(xiǎn)養(yǎng)殖區(qū)展開防控干預(yù)工作；最后，無論是養(yǎng)殖人員還是官方獸醫(yī)人員都需要制定羊布氏桿菌檢測計(jì)劃，通過每月定期檢查、不定期抽查等方式關(guān)注羊群自身健康情況，對于免疫力較差、康復(fù)羊等特殊羊群更要做好檢測，通過掌握羊群健康狀態(tài)可以有效降低布氏桿菌病發(fā)生的可能性。

4.3 科學(xué)飼養(yǎng)，降低染病風(fēng)險(xiǎn)

羊布氏桿菌病與飼養(yǎng)方式也存在明顯聯(lián)系，科學(xué)地飼養(yǎng)模式是降低布氏桿菌病的有效途徑，該疫病的治療難度較大，因此在日常防控工作中應(yīng)當(dāng)樹立“以防為主，以治為輔”的理念，做好日常管理工作，從消毒、飼料營養(yǎng)和衛(wèi)生等幾個(gè)方面入手提升羊群自身免疫力。首先，做好免疫檢查工作，通過提前免疫使羊群產(chǎn)生抗體，并通過生物學(xué)檢查等手段檢驗(yàn)羊群體內(nèi)的抗體水平。此外還需要定期對羊群展開疫病檢測，由于布氏桿菌病無法治療，因此一旦出現(xiàn)染病羊，則應(yīng)當(dāng)按照國家相關(guān)要求對病羊展開無害化處理；其次，做好日常管理工作，羊群自身免疫水平與生長環(huán)境存在密切聯(lián)系，基于此，養(yǎng)殖人員應(yīng)當(dāng)不斷提升羊群的生活質(zhì)量，建立健全羊群衛(wèi)生管理機(jī)制、消毒機(jī)制以及飼養(yǎng)機(jī)制，每天清理羊圈內(nèi)的污水糞便，同時(shí)要專門設(shè)置糞便處理區(qū)域，避免隨意堆積對羊群的生活造成影響。在飼料管理過程中，一方面要考慮飼料的適口性，另一方面則需要注意飼料營養(yǎng)的全面性和均衡性，確保羊群能夠食用高營養(yǎng)飼料；最后，在幼羊采購過程中應(yīng)當(dāng)完善檢疫檢測制度，避免外來疫病風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)入到養(yǎng)殖場內(nèi)，養(yǎng)殖人員應(yīng)當(dāng)自覺做到不在疫區(qū)購買幼羊，在采購?fù)瓿珊髴?yīng)當(dāng)使用石灰乳、來蘇爾等消毒劑消毒，此外在春夏季疫病高發(fā)期也應(yīng)當(dāng)提升消毒頻率，通過科學(xué)飼養(yǎng)能夠有效降低羊布氏桿菌病的發(fā)病概率。

4.4 科學(xué)處置染病羊，降低疫病對羊群的威脅

按照國家相關(guān)要求，感染布氏桿菌病的病羊需要做無害化處理，由于布氏桿菌病具有人畜共患的特點(diǎn)，因此養(yǎng)殖人員需要嚴(yán)格按照相關(guān)流程進(jìn)行處理。首先，做好無害化處理前的準(zhǔn)備工作，一旦發(fā)現(xiàn)場內(nèi)存在染病羊，則應(yīng)當(dāng)立即對同圈內(nèi)的其它健康羊進(jìn)行隔離，并做好隔離區(qū)與非隔離區(qū)內(nèi)的消毒。此時(shí)養(yǎng)殖人員需要做好心理準(zhǔn)備，明確布氏桿菌病對養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)的危害，確定染病羊的數(shù)量，并做好全部無害化處理的準(zhǔn)備；其次，設(shè)置無害化處理點(diǎn)，處理點(diǎn)應(yīng)當(dāng)遠(yuǎn)離村莊、水源和養(yǎng)殖場，可以選擇交通便利的地區(qū)進(jìn)行處理。在病羊無害化處理過程中要保護(hù)好自身，穿戴專業(yè)防護(hù)服，佩戴口罩和無菌手套；最后，科學(xué)選擇無害化處理技術(shù)，若當(dāng)?shù)孬F醫(yī)部門設(shè)置無害化處理點(diǎn)，則可以與防疫單位取得聯(lián)系，若不具備無害化處理?xiàng)l件，則應(yīng)當(dāng)自主選擇處理方式，病羊常見處理方式為挖坑掩埋，通常情況下掩埋坑的深度需要超過2m，并在掩埋前后做好消毒處理，防止其對地下水和土壤造成污染。

5 結(jié)語

綜上所述，布氏桿菌病將會(huì)對羊的正常生長造成嚴(yán)重影響，該病不僅會(huì)引起羊群繁殖障礙，而且還會(huì)對養(yǎng)殖人員的健康造成影響。作為養(yǎng)殖人員需要掌握羊布氏桿菌病的流行規(guī)律、臨床表現(xiàn)和防控措施等等，而作為官方獸醫(yī)則需要掌握布氏桿菌病的檢疫檢測方式，做好養(yǎng)殖人員的教育培訓(xùn)工作，通過科學(xué)地飼養(yǎng)管理手段，健全地檢疫檢測制度、優(yōu)良的羊群養(yǎng)殖環(huán)境以及無害化地處理手段等降低布氏桿菌病對養(yǎng)殖業(yè)的影響，進(jìn)而達(dá)到增收的效果。