含巴西人參中藥復方顆粒劑制備工藝優(yōu)化

劉志青，李 斌，顏冬梅，唐琍萍，王 飛，黃璐琦，徐玲霞

（江西中醫(yī)藥大學院士工作站，江西 南昌 330004）

巴西人參是莧科琺菲亞屬草本植物巴西人參Pfaffia glomerata（Spreng） Pedersen 的干燥根，廣泛用于治療慢性疲勞綜合癥、免疫失調(diào)、血液循環(huán)、炎癥、哮喘、高血糖、高血壓等多種疾病，具有很高的保健、藥用價值［1-3］，課題組前期以其為主藥，在辨證組方的基礎(chǔ)上結(jié)合具有抗疲勞、調(diào)節(jié)免疫作用的藥食兩用中藥枸杞、桑椹、白扁豆花、玳玳花，組成含巴西人參中藥復方，方中各藥均顯示抗疲勞、調(diào)節(jié)免疫力活性，可為相關(guān)臨床研究及開發(fā)應用提供理論依據(jù)［4-9］。

中藥復方常用劑型是顆粒劑，無需煎煮，可直接沖服，具有體積小、起效快、安全衛(wèi)生、易保存、易于調(diào)制、適合工業(yè)化生產(chǎn)的特點，更適合現(xiàn)代中醫(yī)藥發(fā)展［10-12］。因此，本實驗將巴西人參中藥復方開發(fā)成顆粒劑，并對其制備工藝進行優(yōu)化。

1 材料

巴西人參購自巴西藥材市場，經(jīng)安徽中醫(yī)藥大學彭華勝教授鑒定為正品； 枸杞、桑椹、白扁豆花、玳玳花均購自江西敦壽堂國藥有限公司，經(jīng)江西中醫(yī)藥大學付小梅教授鑒定為正品。LGJ-10 真空冷凍干燥機（北京松源華興科技發(fā)展有限公司）； D1524R 高速冷凍型微量臺式離心機（大龍興創(chuàng)儀器股份公司）； FA2004 電子天平（萬分之一，上海舜宇恒平科學儀器有限公司）； 水分測定儀［梅特勒-托利多儀器（上海） 有限公司］； 標準藥典篩全套（東莞超凡篩網(wǎng)有限公司）； GTB 粉體流動性測定儀（上海萬象儀器有限公司）； LDZM-80KCS 立式蒸汽滅菌器（上海申安醫(yī)療器械廠）。可溶性淀粉、乳糖均為食品級（河南萬邦化工科技有限公司）； 環(huán)糊精、乙醇均為食品級（華興生物化工有限責任公司）； 水為純凈水（杭州娃哈哈集團有限公司）。

2 方法與結(jié)果

2.1 顆粒劑制備2.1.1 凍干粉制備 稱取組方藥材適量，提取，提取液在真空冷凍干燥機中凍干，粉碎，即得。

2.1.2 濕法制粒 按配方用量精密稱取“2.1.1” 項下凍干粉適量，與賦形劑充分混合，加入潤濕劑制軟材（手握成團，輕按即散），12 目篩網(wǎng)制粒，干燥，冷卻整粒，分級，包裝。

2.2 評價指標確定

2.2.1 感官評分 按照2020 年版《中國藥典》［13］附錄項下顆粒劑內(nèi)容，由10 名食品專業(yè)人員進行感官評分，具體見表1。

表1 含巴西人參中藥復方顆粒劑感官評分

2.2.2 AHP 法確定權(quán)重系數(shù) 依據(jù)成型率、粒度、溶化率、休止角、吸濕率、感官評價等指標占比及AHP 法則［14］，建立各指標順序為吸濕率＝溶化率＞成型率＝休止角＝粒度＞感官評價，構(gòu)建成對比較優(yōu)先矩陣，見表2。由此可知，CR＝0.002 20＜0.1，表明矩陣具有一致性； CI ＝0.002 77，表明權(quán)重系數(shù)合理有效。

表2 各指標成對比較優(yōu)先矩陣

2.2.3 熵權(quán)法確定權(quán)重系數(shù) 將第i個實驗的j個評價指標采用離差標準化方法進行處理，建立矩陣Xij，計算信息熵Hi及客觀權(quán)重系數(shù)Wi［15］，公式為，其中Pij為第i個實驗的j個評價指標概率。結(jié)果，成型率、粒度、溶化率、休止角、吸濕率、感官評價Wi分別為0.163 0、0.188 4、0.149 7、0.163 6、0.172 3、0.163 1。

2.2.4 綜合權(quán)重確定 結(jié)合“2.2.2” “2.2.3” 項下結(jié)果，計算綜合權(quán)重系數(shù)Zi，公式為，再計算綜合評分［15-16］，公式為綜合評分＝［（溶化率/溶化率最大值）×0.234＋（吸濕率最小值/吸濕率） ×0.270＋（成型率/成型率最大值） ×0.134 ＋ （休止角最小值/休止角） ×0.134 ＋（粒度最小值/粒度） ×0.155＋（感官評價/感官評價最大值） ×0.074］ ×100。

2.3 制備工藝優(yōu)化

2.3.1 單因素試驗

2.3.1.1 賦形劑種類及用量 稱取“2.1.1” 項下凍干粉50 g，分別與不同賦形劑混勻，80%乙醇潤濕，制軟材，濕法制粒，干燥，計算綜合評分，結(jié)果見圖1。由此可知，可溶性淀粉與環(huán)糊精按一定比例混合作為賦形劑時綜合評分較高。

圖1 賦形劑種類及用量對綜合評分的影響（±s，n＝6）

2.3.1.2 潤濕劑種類及用量 稱取“2.1.1” 項下凍干粉50 g，加入50 g 賦形劑［可溶性淀粉＋環(huán)糊精（1 ∶3） ］混合均勻，加入不同體積分數(shù)、用量乙醇制軟材，濕法制粒，干燥，計算綜合評分，結(jié)果見圖2。由此可知，80% ～90%乙醇作為潤濕劑、用量為10～20 mL 時綜合評分較高。

圖2 潤濕劑種類、用量對綜合評分的影響（±s，n＝6）

2.3.2 Box-Behnken 響應面法 在單因素試驗基礎(chǔ)上，確定凍干粉用量為50 g，賦形劑為可溶性淀粉＋環(huán)糊精（1 ∶3），以賦形劑用量（A）、乙醇體積分數(shù)（B）、乙醇用量（C） 為影響因素，綜合評分（Y） 為評價指標，結(jié)果見表3。

采用Design-Expert 8.0.6 軟件對表3 數(shù)據(jù)進行分析，得二元多項式回歸方程為Y＝98.04＋2.56A＋9.74B＋8.34C-0.71AB＋1.34AC-0.036BC-23.34A2-17.76B2-16.99C2，方差分析見表4。由此可知，模型P＜0.01，具有高度顯著性；因素B、C、A2、B2、C2具有顯著性影響（P＜0.01）。

表4 方差分析結(jié)果

響應面分析見圖3。最終確定，最優(yōu)工藝為賦形劑用量51.43 g，89.11% 乙醇用量16.24 mL，綜合評分為99.93分，考慮到實際操作，將其調(diào)整為賦形劑用量50 g，89%乙醇用量16 mL。另外，凍干粉、可溶性淀粉、環(huán)糊精用量比例為50 ∶12.5 ∶37.5。

圖3 各因素響應面圖

2.3.3 顆粒劑干燥方式優(yōu)化 按“2.3.2” 項下優(yōu)化工藝平行制備12 批樣品，置于電熱鼓風干燥箱中干燥，分別考察干燥溫度40、60、80、100 ℃及干燥時間0.5、1、2 h 對成型率、含水量的影響，結(jié)果見圖4。由此可知，濕顆粒于60 ℃電熱鼓風干燥箱中干燥1 h 時成型率較高，含水量也符合2020 年版《中國藥典》 規(guī)定。

圖4 不同干燥方式對成型率（A）、含水量（B） 的影響（±s，n＝6）

2.3.4 驗證試驗 按“2.3.2” 項下優(yōu)化工藝平行制備6批樣品，進行驗證試驗，結(jié)果見表5，可知模型預測性良好，穩(wěn)定可行。再觀察其顆粒大小、色澤均一度，進行粒度、含水量、溶化性檢查，結(jié)果見表5 ～6，可知均符合2020 年版《中國藥典》 一部顆粒劑項下要求。

表5 驗證試驗結(jié)果（n＝6）

表6 常規(guī)檢查結(jié)果

3 討論

多指標綜合評價是優(yōu)化中藥復方顆粒劑制備工藝的重要方式，其中AHP 法適用于多層次指標權(quán)重分析，但判斷較主觀，而熵權(quán)法是一種客觀賦權(quán)計算模型，故將兩者進行綜合加權(quán)時既能體現(xiàn)各指標之間的實際影響，又可使權(quán)重系數(shù)更科學合理［17-18］。本實驗采用AHP-熵權(quán)混合加權(quán)法優(yōu)化含巴西人參中藥復方顆粒劑制備工藝，避免了單一方法的局限性，主客觀并重，使所得最優(yōu)工藝更具合理性、科學性、全面性及穩(wěn)定性。

含巴西人參中藥復方中多糖類成分多，黏性大，吸濕性強，對顆粒劑成型工藝有一定影響［10-11，14］。顆粒劑常用賦形劑為可溶性淀粉、環(huán)糊精及乳糖，其中乳糖溶化性好，但不易成型，成本高昂； 環(huán)糊精成型率高，但溶化慢； 可溶性淀粉溶化性好，但吸濕性大［11］，本實驗發(fā)現(xiàn)，可溶性淀粉與環(huán)糊精按一定比例混合時制備的顆粒成型率高，溶化性好，吸濕性小。另外，顆粒劑常用潤濕劑為乙醇，但其體積分數(shù)過高時不易成型，而過低時制粒易粘連［11］，本實驗發(fā)現(xiàn)，89% 乙醇制備的顆粒大小適中，成型率高，粒度小。

驗證試驗結(jié)果顯示，含巴西人參中藥復方顆粒外觀均勻，呈棕褐色，綜合評分較高，顆粒指標符合2020 年版《中國藥典》 標準，體驗感較好，具有很高的商業(yè)推廣價值，為后續(xù)開發(fā)相關(guān)產(chǎn)品奠定了基礎(chǔ)，也為該外來藥材資源的中藥化和研發(fā)提供參考。但本實驗尚未測定含巴西人參中藥復方顆粒中有效成分含量，今后仍需進一步補充和完善。