血漿EPCR、Hcy水平對骨髓增殖性腫瘤患者血栓形成的預測價值分析

劉真真 殷 莉

骨髓增生性腫瘤(MPN)是血液惡性腫瘤的一種,臨床特征主要為一系或多系髓系細胞異常增殖,患者早期可無任何癥狀,隨著病情進展,有出血、骨髓纖維化、血栓形成、轉化為白血病的趨勢[1]。其中血栓形成是導致MPN患者病死的主要原因,占比為35%～70%,臨床現已將其當作影響此類患者預后的重要危險因素[2]。因此,及時準確診斷血栓形成對MPN患者來說意義重大。同型半胱氨酸(Hcy)是胱氨酸、蛋氨酸的代謝產物,一般情況下水平較低,研究證實其水平上升可誘發血栓形成、腦卒中、冠心病等[3]。重組人內皮細胞蛋白C受體(EPCR)是一種跨膜糖蛋白,具有抗凝、抗炎作用,有文獻稱低水平EPCR可增加動靜脈內瘺血栓、深靜脈血栓形成發生風險[4]。本研究選擇在我院就診的137例MPN患者,通過血栓、非血栓患者2組對照,分析血漿EPCR、Hcy水平對血栓形成的預測價值,為早期識別血栓形成高風險人群提供指導,做到早發現、早治療,以改善患者預后。

1 材料與方法

1.1 一般資料

回顧性選取2018年04月至2022年06月我院就診的137例MPN患者,按血栓形成與否分為血栓組(n=70)、非血栓組(n=67)。血栓組女性25例,男性45例;年齡18～76歲,平均(46.51±14.53)歲;身體質量指數18.22～29.45 kg/m2,平均(23.46±2.54)kg/m2;原發疾病:33例真性紅細胞增多癥,20例原發性血小板增多癥,17例原發性骨髓纖維化;基礎疾病:26例高血壓,18例高血脂,11例高血糖。非血栓組女性20例,男性47例;年齡20～78歲,平均(50.38±13.71)歲;身體質量指數18.46～30.02 kg/m2,平均(24.12±2.73)kg/m2;原發疾病:28例真性紅細胞增多癥,21例原發性血小板增多癥,18例原發性骨髓纖維化;基礎疾病:22例高血壓,16例高血脂,10例高血糖。2組原發疾病、年齡、身體質量指數、性別、基礎疾病等一般資料差異無統計學意義(P>0.05),具有可比性。

1.2 入組標準

納入標準:①符合《JSH Practical Guidelines for Hematological Malignancies,2018:I.Leukemia-4.Chronic myeloid leukemia(CML)/myeloproliferative neoplasms(MPN)》[5]中MPN診斷標準,經病理組織活檢證實;②成年人;③依從性良好;④臨床資料齊全。排除標準:①預計生存時間<3個月;②伴有重要臟器功能異常、傳染性疾病、嚴重感染、凝血障礙、精神疾病;③合并其他可引發血栓的疾病;④合并其他惡性腫瘤或血液惡性疾病;⑤近3個月使用過影響凝血功能藥物;⑥處于孕期/哺乳期。

1.3 方法

1.3.1 實驗室指標測定 患者入院d2,抽取其3 ml空腹肘正中靜脈血,加枸櫞酸鈉(濃度:0.108 mol/L)抗凝,抗凝劑、靜脈血比例為1∶9,混合均勻,使用離心機(生產廠家:湖南赫西儀器裝備有限公司,型號:TDZ6-WS)離心(3 000 r/min,10 min)取血漿,置于-80 ℃冰箱內保存待檢。應用全自動生化分析儀(生產廠家:日本日立公司,型號:7600-020)采用循環酶法測定血漿Hcy水平,采用酶聯免疫雙抗夾心法檢測血漿EPCR水平。血漿EPCR、Hcy檢測試劑盒均購于北京九強生物技術股份有限公司,由專人嚴格依照儀器與試劑盒說明書進行操作。

1.3.2 血栓形成檢查 由2名經驗豐富B超室醫師負責檢查,使用彩色超聲診斷儀(生產廠家:日本日立公司,型號:F37)掃描血管,若發現血管內無血流,且有異常回聲(低回聲或中回聲)填充,則可診斷為血栓形成[6]。

1.4 觀察指標

(1)比較血栓組、非血栓組血漿EPCR、Hcy水平。(2)分析血漿EPCR、Hcy水平間相關性。(3)構建Logistic多因素回歸模型分析MPN患者血栓形成獨立危險因素。(4)探討血漿EPCR、Hcy水平對MPN患者血栓形成的預測價值。

1.5 統計學方法

2 結果

2.1 2組血漿EPCR、Hcy水平比較

血栓組血漿EPCR水平明顯較非血栓組低,血漿Hcy水平明顯較非血栓組高(P<0.05),見表1。

表1 2組血漿EPCR、Hcy水平比較

2.2 血漿EPCR、Hcy水平間相關性

Spearman相關分析結果表明,MPN患者血漿EPCR、Hcy水平呈負相關(γ=-0.712,P<0.001)。

2.3 影響MPN患者血栓形成的獨立危險因素

以是否有血栓形成為因變量(有賦值為1,無賦值為0),將血漿EPCR、Hcy水平作為自變量,對自變量進行賦值(以137例的平均值為界:≤平均值=1,>平均值=2)。Logistic回歸分析顯示,血漿EPCR(≤平均值)、血漿Hcy水平(>平均值)為MPN患者血栓形成的獨立危險因素(P<0.05),見表2。

表2 影響MPN患者血栓形成的獨立危險因素

2.4 血漿EPCR、Hcy水平對MPN患者血栓形成的預測價值

以非血栓患者為對照繪制ROC曲線,結果顯示,血漿EPCR、Hcy水平預測MPN患者血栓形成的AUC分別為0.759、0.688,敏感度為73.13%、79.10%,特異度為68.57%、57.14%,兩者聯合預測MPN患者血栓形成的AUC為0.889,敏感度為82.09%,特異度為82.86%,均高于各指標單一預測,見圖1、表3。

圖1 血漿EPCR、Hcy單一及聯合預測MPN患者血栓形成的ROC曲線

表3 血漿EPCR、Hcy水平對MPN患者血栓形成的預測價值

3 討論

MPN患者可合并多種類型血栓癥,這在于在臥床、化療、手術等因素作用下,凝血平衡紊亂,血細胞迅速增殖,血液黏度提高,血液軸向流動狀態被打破,從而促使血栓形成[7-8]。相關文獻報道,MPN患者血栓形成發生率為40%～50%,是MPN患者主要致殘、致死原因,因此,預防、治療血栓形成具有必要性[9]。

靜脈血管造影是診斷血栓的“金標準”,但由于靜脈血管造影屬特異性檢查,會損傷血管,加之費用高昂,導致其臨床應用受限[10-11]。隨著研究深入,血漿Hcy在血栓形成檢測中的應用逐漸增加。朱衡亞等[12]學者指出,急性缺血性腦卒中并發下肢深靜脈血栓患者血漿Hcy水平較非下肢深靜脈血栓患者高。本研究發現,并發血栓形成MPN患者血漿Hcy水平表達異常,且血漿Hcy水平>平均值為MPN患者血栓形成的獨立危險因素,與上述研究結果相似,提示Hcy可作為早期預測血栓形成的指標。分析原因可能在于Hcy水平上升可加速血小板聚集,提升凝血因子活性,激活凝血系統,增加促纖維蛋白原沉積量,造成血管內皮受損,從而誘導靜脈血栓形成,同時Hcy可刺激相關致癌基因表達,加速靜止細胞分裂,增加泡沫細胞、血管平滑肌細胞生成量,形成動脈粥樣硬化[13-16]。宋巍等[17]研究指出,Hcy可能通過改變血液成分、損傷血管內皮,促進血栓形成。此外,本研究發現,血漿Hcy預測MPN患者血栓形成的AUC為0.688,敏感度為79.10%,特異度為57.14%,證實血漿Hcy對MPN患者血栓形成有一定預測價值。

EPCR是蛋白C抗凝血系統重要組成部分,在大血管內皮細胞中大量存在,與活化蛋白C、蛋白C親和力強[18-19]。EPCR通過與蛋白C結合,并將蛋白C呈遞給凝血酶-血栓調節蛋白,可提升活化蛋白C活性,活化蛋白C可與蛋白S組合,降低凝血因子水平,引發抗凝反應[20]。EPCR活性下降,可減少活化蛋白C生成量,導致凝血因子滅活減少、凝血酶生成量增加,提升血栓形成風險[21]。本研究結果表明,血漿EPCR在并發血栓形成MPN患者中呈低表達,進一步行回歸分析,結果顯示,血漿EPCR水平≤平均值是MPN患者血栓形成的獨立危險因素,提示EPCR參與血栓形成。趙慧茹等[22]研究發現,關節置換術后血漿EPCR水平呈進行性下降趨勢,這可能是術后血栓形成重要原因?？梢?了解血漿EPCR水平變化能為臨床診斷血栓形成提供數據參考。本研究還發現,血漿EPCR預測MPN患者血栓形成的AUC為0.759,敏感度為73.13%,特異度為68.57%,說明血漿EPCR對MPN患者血栓形成有一定預測價值。

另外,本研究中血漿EPCR、Hcy水平聯合預測MPN患者血栓形成的AUC、敏感度、特異度均大于各指標單一診斷,說明二者聯合預測血栓形成的效能更高,提示在使用單一指標無法確診時,可采用聯合應用方法,以提升診斷準確性。

綜上所述,血漿EPCR、Hcy水平為MPN患者血栓形成的獨立危險因素,二者聯合對MPN患者血栓形成有較高預測價值,值得于臨床推廣應用。