健心顆粒通過調(diào)控Apelin 通路對(duì)心力衰竭大鼠心室-動(dòng)脈偶聯(lián)的影響

歐陽秋芳，游 濤，許 榮，林 晴，嚴(yán)錦賢，陳永忠，李 濱，郭進(jìn)建

（福建中醫(yī)藥大學(xué)附屬第二人民醫(yī)院，福建 福州 350001）

目前我國心力衰竭患者約450 萬人，其中80%是老年人，約60%患者在確診5 年內(nèi)死亡。因此，心力衰竭已成為老年人死亡的主要原因。其臨床綜合征為左室功能紊亂后，左室泵功能和血管阻抗不匹配導(dǎo)致［1］。

心室-動(dòng)脈脫偶聯(lián)是心力衰竭發(fā)生發(fā)展的病理基礎(chǔ)。心臟結(jié)構(gòu)、功能狀態(tài)影響外周動(dòng)脈，而外周動(dòng)脈通過改變負(fù)荷影響心臟。心臟和動(dòng)脈樹組成閉合環(huán)路，結(jié)構(gòu)相互聯(lián)系，功能相互偶聯(lián)，這種心室與動(dòng)脈系統(tǒng)之間的相互作用稱為心室-動(dòng)脈偶聯(lián)（ventricular-arterial coupling，VAC）［2］。當(dāng)心室與動(dòng)脈的彈性匹配、功能偶聯(lián)時(shí)，能使心臟的搏出功趨于最佳，效率最高。合理的匹配是心室和動(dòng)脈間能量高效傳輸?shù)闹匾Ｕ稀Ｌ热粜氖?動(dòng)脈脫偶聯(lián)，則會(huì)導(dǎo)致心臟所做的功利用減少［3］。愛帕琳肽（Apelin） 是腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)的新成員，對(duì)維持心血管穩(wěn)態(tài)偶聯(lián)具有重要作用［4］。Apelin 通過活化下游血管緊張素1 型受體相關(guān)蛋白（angiotensin type 1 receptor related protein，APJ），激活一氧化氮信號(hào)通路，介導(dǎo)血管舒張。

健心顆粒是本院已獲得專利的院內(nèi)制劑，臨床與基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)均表明它治療心力衰竭療效顯著［5-6］，但其是否通過活化Apelin/APJ、改善心室-動(dòng)脈脫偶聯(lián)來治療心力衰竭目前尚無報(bào)道，故本實(shí)驗(yàn)對(duì)此進(jìn)行研究。

1 材料

1.1 動(dòng)物 18 月齡雄性大鼠60 只，購自上海西普爾-必凱實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司［實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)SCXK （滬）2018-0006］，飼養(yǎng)于福建中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究中心SPF 級(jí)動(dòng)物房［實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用許可證號(hào)SYXK （閩） 2019-0007］，常規(guī)飼料飼養(yǎng)，自由飲水，適應(yīng)性飼養(yǎng)2 周后開始實(shí)驗(yàn)。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)經(jīng)福建中醫(yī)藥大學(xué)附屬第二人民醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)（倫理號(hào)FJPSPH-IAEC2019061）。

1.2 試劑與藥物 健心顆粒組方藥材（黃芪10 g、紅參5 g、蒲黃3 g、丹參5 g、豬苓5 g、白術(shù)5 g、桂枝3 g、葶藶子5 g） 購自福建省藥材有限責(zé)任公司，嚴(yán)格按照相關(guān)制劑及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，由本院制劑室制成顆粒劑。Apelin 抗體（貨號(hào)ab133624） 購自英國Abcam 公司； APJ 抗體（貨號(hào)20341-1-AP） 購自美國Proteintech 公司； ［Pyr1］ -Apelin-13、F13A （貨號(hào)217082-60-5、568565-11-7） 均購自美國Sigma 公司； Masson 三色染色試劑盒（貨號(hào)G1340） 購自北京索萊寶科技有限公司。

2 方法

2.1 造模、分組與給藥 除假手術(shù)組（12 只） 外，其余大鼠參考文獻(xiàn)［7］ 報(bào)道，采用結(jié)扎冠狀動(dòng)脈左前降支建立左室心肌缺血模型，術(shù)后第7 天，以射血分?jǐn)?shù)小于60%為心力衰竭模型成功建立的標(biāo)志［8］，采用超聲剔除未達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)者。將造模成功的大鼠隨機(jī)分為模型組、健心顆粒組（3.2 g/kg，折合生藥量4.38 g/kg，相當(dāng)于臨床等效劑量，灌胃）、Apelin 組（200 μg/kg ［Pyr1］ -Apelin-13，腹腔注射）、健心顆粒＋F13A 組 （3.2 g/kg 健心顆粒灌胃＋200 μg/kg F13A 腹腔注射）； 假手術(shù)組穿線但不結(jié)扎冠狀動(dòng)脈，灌胃給予純水。給藥期間，觀察大鼠活動(dòng)度、精神狀態(tài)、皮毛狀況、體質(zhì)量、心臟指數(shù)（心臟質(zhì)量/體質(zhì)量）等變化，干預(yù)12 周后檢測(cè)血流動(dòng)力學(xué)并取材。

2.2 心導(dǎo)管測(cè)量血流動(dòng)力學(xué) 給藥結(jié)束后，參考文獻(xiàn)［9］ 報(bào)道測(cè)量心率、收縮壓、舒張壓、左室舒張末壓（left ventricular end diastolic pressure，LVEDP）、左室壓力最大上升速率 （＋dP/dtmax）、左室壓力最大下降速率 （-dP/dtmax）。

2.3 超聲法測(cè)量脈搏波傳導(dǎo)速度 采用超聲儀無創(chuàng)測(cè)量脈搏波傳導(dǎo)速度（pulse wave velocity，PWV），大鼠鼻尖至尾根部直線距離即體長(zhǎng)L； 采用超聲儀進(jìn)行血流速度頻譜的采集，并結(jié)合心電圖進(jìn)行測(cè)量頸-股脈搏波傳播時(shí)間，為股動(dòng)脈與頸總動(dòng)脈脈搏波波起始點(diǎn)與心電圖R 波頂點(diǎn)的時(shí)間間隔差，即TR-股動(dòng)脈-TR-頸動(dòng)脈［10］，計(jì)算大鼠主動(dòng)脈PWV，公式為PWV＝ （0.461 4L＋1.833 5） /頸-股脈搏波傳播時(shí)間。

2.4 心室-動(dòng)脈偶聯(lián)指數(shù)計(jì)算 給藥結(jié)束后，參考文獻(xiàn)［11］ 報(bào)道記錄壓力-容積曲線，計(jì)算有效動(dòng)脈彈性Ea（Ea＝左室收縮末期壓力/收縮末期容積）、左室收縮末彈性Ees ［左室收縮末期壓力/（每搏輸出量-非張力心室容積）］ 和心室-動(dòng)脈偶聯(lián)指數(shù)（Ea/Ees）。

2.5 胸主動(dòng)脈環(huán)血管張力測(cè)定分析血管舒縮功能 參考文獻(xiàn)［12］ 報(bào)道，取大鼠胸主動(dòng)脈，用Power Lab 多通道生理信號(hào)采集處理系統(tǒng)描記張力變化，血管環(huán)舒張效應(yīng)以該血管舒張張力絕對(duì)值與1.0×10-5mmol/L 去甲腎上腺素所引起血管收縮張力絕對(duì)值的比值（百分比） 表示，并計(jì)算最大舒張百分比，最大舒張效應(yīng)用Emax表示。舒張反應(yīng)敏感性用pD2值表示，表示EC50以10 為底的負(fù)對(duì)數(shù)值［產(chǎn)生50%最大效應(yīng)（E＝1/2Emax） 的摩爾濃度的負(fù)對(duì)數(shù)］。

收縮功能檢測(cè)： 給予100 μL 氯化鉀（10～100 mmol/L）和去甲腎上腺素（1.0×10-10～1.0×10-4mol/L），記錄血管收縮時(shí)相應(yīng)的張力值。血管環(huán)收縮效應(yīng)用血管收縮張力絕對(duì)值與氯化鉀預(yù)收縮張力絕對(duì)值的比值表示，并計(jì)算最大收縮百分比。

舒張功能檢測(cè)： 給予100 μL 去甲腎上腺素溶液（1.0×10-3mol/L） 預(yù)收縮血管，待血管收縮至最大幅度時(shí)累積給予乙酰膽堿或硝普鈉溶液100 μL （1.0×10-10～1.0×10-4mol/L），用乙酰膽堿或硝普鈉誘發(fā)的舒張率來分別評(píng)價(jià)內(nèi)皮依賴性舒張或非依賴性舒張功能。

2.6 主動(dòng)脈組織形態(tài)學(xué)觀察 取大鼠降主動(dòng)脈5 mm，于4%多聚甲醛中固定24 h，脫水浸蠟，石蠟包埋，制成4 μm 切片，脫蠟，Masson 復(fù)合染色分析主動(dòng)脈膠原密度，Verhoeff 染色分析主動(dòng)脈彈力纖維情況。

2.7 Western blot 法檢測(cè)胸主動(dòng)脈Apelin、APJ 蛋白表達(dá)取大鼠胸主動(dòng)脈100 mg，剪碎，冰上裂解，離心取上清，蛋白定量后加熱變性（50 μg），將其電泳分離并轉(zhuǎn)移到PVDF 膜上，脫脂牛奶封閉，一抗4 ℃孵育過夜，沖洗，二抗孵育，免疫印跡顯色。用圖像分析系統(tǒng)對(duì)圖片進(jìn)行灰度掃描，以GAPDH 為內(nèi)參，進(jìn)行半定量分析，以比值表示其相對(duì)表達(dá)。

2.8 血清Apelin、BNP、NO 水平檢測(cè) 大鼠下腔靜脈取血2 mL，室溫靜置30 min，3 000 r/min 離心，收集血清，用酶聯(lián)免疫吸附 （enzyme linked immunosorbent assay，ELISA） 法檢測(cè)Apelin、腦鈉肽（brain natriuretic peptide，BNP） 水平，硝酸還原酶法檢測(cè)一氧化氮 （nitrogen monoxide，NO） 水平，均嚴(yán)格按照試劑盒說明書操作。

2.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 通過SPSS 軟件進(jìn)行處理，符合正態(tài)分布的計(jì)量資料以（±s） 表示，多組間比較采用單因素方差分析，組間均數(shù)比較采用LSD 法； 非正態(tài)分布資料采用Mann-WhitneyU檢驗(yàn)。P＜0.05 表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 結(jié)果

3.1 健心顆粒對(duì)心力衰竭大鼠一般情況的影響 假手術(shù)組死亡1 只； 模型組死亡5 只，死亡率為41.7%； 健心顆粒組和Apelin 組死亡3 只，死亡率為25%； 健心顆粒＋F13A組死亡4 只，死亡率為33.3%，存活8 只。假手術(shù)組大鼠飲食、活動(dòng)正常，皮毛整潔，體質(zhì)量增加，無心肌梗死情況； 與假手術(shù)組比較，模型組大鼠進(jìn)食、活動(dòng)明顯減少，皮毛干燥無光澤，體質(zhì)量降低（P＜0.05）； 與模型組比較，健心顆粒組體質(zhì)量增加（P＜0.05），其作用與［Pyr1］ -Apelin-13 類似，見表1。

表1 健心顆粒對(duì)心力衰竭大鼠一般情況的影響（±s）

表1 健心顆粒對(duì)心力衰竭大鼠一般情況的影響（±s）

注： 與假手術(shù)組比較，*P＜0.05； 與模型組比較，＃P＜0.05； 與健心顆粒組比較，＆P＜0.05。

組別動(dòng)物數(shù)/只體質(zhì)量/g死亡數(shù)（死亡率/%）假手術(shù)組11588.34±35.731（8.3）模型組7516.69±69.33*5（41.7）健心顆粒組9565.17±45.16＃3（25.0）Apelin 組9557.42±47.69＃3（25.0）健心顆粒＋F13A 組8537.25±39.46＃4（33.3）

3.2 健心顆粒對(duì)心力衰竭大鼠心功能及血流動(dòng)力學(xué)的影響如表2 所示，與假手術(shù)組比較，模型組心臟指數(shù)、心肌梗死面積和LVEDP 值升高（P＜0.05），±dP/dtmax值降低（P＜0.05），表明心力衰竭失代償； 與模型組比較，健心顆粒組心臟指數(shù)、心肌梗死面積和LVEDP 值降低 （P＜0.05），±dP/dtmax值升高（P＜0.05），其作用與［Pyr1］ -Apelin-13 相當(dāng)，而F13A 能逆轉(zhuǎn)健心顆粒的作用 （P＜0.05）。

表2 健心顆粒對(duì)心力衰竭大鼠心功能及血流動(dòng)力學(xué)的影響（±s，1 mmHg＝0.133 kPa）

表2 健心顆粒對(duì)心力衰竭大鼠心功能及血流動(dòng)力學(xué)的影響（±s，1 mmHg＝0.133 kPa）

注： 與假手術(shù)組比較，*P＜0.05； 與模型組比較，＃P＜0.05； 與健心顆粒組比較，＆P＜0.05。

組別動(dòng)物數(shù)/只 心臟指數(shù)/（g·kg-1） 心肌梗死面積/%心率/（次·min-1）收縮壓/mmHg舒張壓/mmHg假手術(shù)組112.19±0.360.00±0.00403±31142.79±12.4795.03±18.73模型組73.67±0.46*43.51±3.16*429±58115.43±17.7071.44±20.59健心顆粒組92.58±0.20＃30.78±4.87＃416±65128.56±11.6281.23±9.16 Apelin 組92.93±0.17＃32.01±3.12＃415±33135.37±16.6575.46±6.70健心顆粒＋F13A 組83.16±0.27＆40.09±4.51＆426±52123.92±20.1589.81±20.24組別動(dòng)物數(shù)/只收縮壓/mmHg舒張壓/mmHgLVEDP/mmHg＋dP/dtmax/（mmHg·s-1）-dP/dtmax/（mmHg·s-1）假手術(shù)組11142.79±12.4795.03±18.735.41±0.348 902±573-7 218±580模型組7115.43±17.7071.44±20.5918.28±1.39*5 894±603*-5 347±495*健心顆粒組9128.56±11.6281.23±9.168.39±0.60＃6 719±726＃-6 785±597＃Apelin 組9135.37±16.6575.46±6.7010.96±1.83＃7 171±550＃-6 584±805*健心顆粒＋F13A 組8123.92±20.1589.81±20.2415.27±1.62＆6 235±693＆-5 962±621＆

3.3 健心顆粒對(duì)心力衰竭大鼠頸-股脈搏波傳導(dǎo)速度的影響 如表3 所示，與假手術(shù)組比較，模型組頸-股PWV 值升高（P＜0.05），表明在心力衰竭情況下，動(dòng)脈樹明顯僵硬； 與模型組比較，健心顆粒組和Apelin 組頸-股PWV 值降低（P＜0.05）； 與健心顆粒組比較，健心顆粒＋F13A 組頸-股PWV 值升高（P＜0.05）。

表3 健心顆粒對(duì)心力衰竭大鼠頸-股脈搏波傳導(dǎo)速度的影響（±s）

表3 健心顆粒對(duì)心力衰竭大鼠頸-股脈搏波傳導(dǎo)速度的影響（±s）

注： 與假手術(shù)組比較，*P＜0.05； 與模型組比較，＃P＜0.05； 與健心顆粒組比較，＆P＜0.05。

組別動(dòng)物數(shù)/只頸-股PWV/（m·s-1）假手術(shù)組115.27±0.36模型組76.75±0.71*健心顆粒組95.79±0.62＃Apelin 組96.03±0.47＃健心顆粒＋F13A 組86.58±0.54＆

3.4 健心顆粒對(duì)心力衰竭大鼠心室-動(dòng)脈偶聯(lián)的影響 如圖1 所示，與假手術(shù)組比較，模型組VAC 值升高 （P＜0.05）； 與模型組比較，健心顆粒組和Apelin 組VAC 值降低（P＜0.05）； 與健心顆粒組比較，健心顆粒＋F13A 組VAC 值升高（P＜0.05）。

圖1 健心顆粒對(duì)心力衰竭大鼠心室-動(dòng)脈偶聯(lián)的影響（±s，n＝7～11）

3.5 健心顆粒對(duì)心力衰竭大鼠胸主動(dòng)脈舒縮功能的影響如圖2 所示，假手術(shù)組大鼠胸主動(dòng)脈對(duì)去甲腎上腺素的Emax值為（31.98±3.61）%、pD2值為-6.15±0.60； 與假手術(shù)組比較，模型組大鼠胸主動(dòng)脈對(duì)去甲腎上腺素的Emax值升高（P＜0.05），為（75.69±4.10）%，pD2值降低（P＜0.05），為-6.74±0.48，去甲腎上腺素劑量反應(yīng)曲線非平行性向右下移位； 與模型組比較，健心顆粒組和Apelin 組血管環(huán)收縮效應(yīng)降低（P＜0.05）； 與健心顆粒組比較，健心顆粒＋F13A 組血管環(huán)收縮效應(yīng)增強(qiáng)（P＜0.05）。

圖2 各組大鼠胸主動(dòng)脈對(duì)去甲腎上腺素的濃度依賴性收縮曲線（±s，n＝7～11）

如圖3 所示，假手術(shù)組胸主動(dòng)脈對(duì)硝普那的Emax值為（96.31±6.90）%，pD2值為-7.72±0.10； 與假手術(shù)組比較，模型組胸主動(dòng)脈對(duì)硝普那的Emax值降低（P＜0.05），為（63.9±5.6）%，pD2值升高（P＜0.05），為-7.12±0.80；與模型組比較，健心顆粒組和Apelin 組胸主動(dòng)脈對(duì)硝普那的Emax值升高 （P＜0.05），分別為 （89.29 ± 8.4）%、（72.05±6.07）%，pD2值降低（P＜0.05），分別為-7.59±0.62、-7.63±0.82； 與健心顆粒組比較，健心顆粒＋F13A組胸主動(dòng)脈對(duì)硝普那的Emax值降低（P＜0.05），為（68.34±9.50）%，pD2值升高（P＜0.05），為-7.20±0.46。

圖3 各組大鼠胸主動(dòng)脈對(duì)硝普那的濃度依賴性舒張曲線（±s，n＝7～11）

如圖4 所示，假手術(shù)組胸主動(dòng)脈對(duì)乙酰膽堿的Emax值為（93.69±7.10）%，pD2值為-7.75±0.51； 與假手術(shù)組比較，模型組胸主動(dòng)脈對(duì)乙酰膽堿的Emax值降低（P＜0.05），為（21.98±3.1）%，pD2值升高（P＜0.05），為-6.43±0.45； 與模型組比較，健心顆粒組和Apelin 組胸主動(dòng)脈對(duì)乙酰膽堿的Emax值升高 （P＜0.05），分別為 （55.59±4.5）%、（65.97±5.21）%，pD2值降低（P＜0.05），分別為-7.12±0.60、-7.46±0.58； 與健心顆粒組比較，健心顆粒＋F13A 組胸主動(dòng)脈對(duì)乙酰膽堿的Emax值降低（P＜0.05），但pD2值無明顯變化（P＞0.05）。

圖4 各組大鼠胸主動(dòng)脈對(duì)乙酰膽堿的濃度依賴性舒張曲線（±s，n＝7～11）

3.6 健心顆粒對(duì)心力衰竭大鼠主動(dòng)脈形態(tài)學(xué)的影響 各組胸動(dòng)脈橫截面積、管腔直徑、壁腔比均無明顯差異。如圖5所示，與假手術(shù)組比較，模型組膠原沉積增多（P＜0.05）；與模型組比較，健心顆粒組和Apelin 組胸主動(dòng)脈膠原沉積減少（P＜0.05）； 與健心顆粒組比較，健心顆粒＋F13A 組膠原沉積增多（P＜0.05）。

圖5 健心顆粒對(duì)心力衰竭大鼠主動(dòng)脈膠原沉積的影響（Masson，×200，±s，n＝7～11）

如圖6 所示，各組間的彈力纖維層數(shù)無明顯變化（P＞0.05），但模型組彈力纖維排列明顯紊亂，甚至有斷裂現(xiàn)象。與模型組比較，健心顆粒組和Apelin 組彈力纖維板排列緊密、有序，彈力板結(jié)構(gòu)完整。

圖6 健心顆粒對(duì)心力衰竭大鼠主動(dòng)脈彈力纖維的影響（Verhoeff，×200，±s，n＝7～11）

3.7 健心顆粒對(duì)心力衰竭大鼠主動(dòng)脈Apelin、APJ 蛋白表達(dá)的影響 如圖7～8 所示，與假手術(shù)組比較，模型組大鼠主動(dòng)脈Apelin、APJ 蛋白表達(dá)降低（P＜0.05）； 與模型組比較，健心顆粒組和Apelin 組大鼠主動(dòng)脈Apelin、APJ 蛋白表達(dá)升高（P＜0.05）； 與健心顆粒組比較，健心顆粒＋F13A組大鼠主動(dòng)脈Apelin、APJ 蛋白表達(dá)降低（P＜0.05）。

圖7 各組大鼠胸主動(dòng)脈Apelin 蛋白免疫組化染色（×200）

圖8 健心顆粒對(duì)心力衰竭大鼠主動(dòng)脈Apelin、APJ 蛋白表達(dá)的影響（±s，n＝7～11）

3.8 健心顆粒對(duì)心力衰竭大鼠血清Apelin、BNP、NO 水平的影響 如表4 所示，與假手術(shù)組比較，模型組大鼠血清BNP 水平升高 （P＜0.05），Apelin、NO 水平降低 （P＜0.05）； 與模型組比較，健心顆粒組和Apelin 組大鼠血清BNP 水平降低 （P＜0.05），Apelin、NO 水平升高 （P＜0.05）； 與健心顆粒組比較，健心顆粒＋F13A 組大鼠血清BNP、Apelin、NO 水平降低（P＜0.05）。

表4 健心顆粒對(duì)心力衰竭大鼠血清Apelin、BNP、NO 水平的影響（±s）

表4 健心顆粒對(duì)心力衰竭大鼠血清Apelin、BNP、NO 水平的影響（±s）

注： 與假手術(shù)組比較，*P＜0.05； 與模型組比較，＃P＜0.05； 與健心顆粒組比較，＆P＜0.05。

組別動(dòng)物數(shù)/只Apelin/（ng·mL-1）BNP/（pg·mL-1）（NO2-/NO3-）/（μmol·L-1）假手術(shù)組116.69±0.8351.78±4.7225.68±3.05模型組72.17±0.35*593.35±65.68*12.58±4.20*健心顆粒組93.67±0.46＃362.57±40.27＃19.31±2.40＃Apelin 組94.25±0.51＃240.63±31.58＃17.58±1.69＃健心顆粒＋F13A 組83.03±0.26＆156.42±32.80＆14.05±2.47＆

4 討論

全身動(dòng)脈彈性及左心室功能的協(xié)調(diào)是冠狀動(dòng)脈血流和左心室功能的重要決定因素。正常情況下，左室與動(dòng)脈系統(tǒng)互相匹配形成穩(wěn)定、有效的VAC 關(guān)系，使心室泵血功能優(yōu)化達(dá)到最大傳遞效能［13］。心力衰竭時(shí)心室-動(dòng)脈偶聯(lián)關(guān)系異常，機(jī)械性能下降。本研究發(fā)現(xiàn)健心顆粒能改善心力衰竭大鼠左室功能，降低動(dòng)脈PWV，減少胸主動(dòng)脈膠原含量，改善心力衰竭中的心室-動(dòng)脈脫偶聯(lián)，且上述效應(yīng)隨著Apelin 通路活化或抑制而發(fā)生相應(yīng)變化。Ceiler 等［14］研究表明，冠狀動(dòng)脈結(jié)扎18 周后，胸主動(dòng)脈順應(yīng)性降低，僵硬度增加。有研究表明，心肌梗死后心力衰竭大鼠出現(xiàn)胸主動(dòng)脈膠原纖維增加，收縮血管反應(yīng)性增強(qiáng)，舒張反應(yīng)減弱［15-16］。本研究結(jié)果與報(bào)道一致，大鼠冠狀動(dòng)脈結(jié)扎13 周后，模型組大鼠LVEDP、心臟指數(shù)、PWV 值和胸主動(dòng)脈膠原含量增加，彈力纖維排列紊亂。但也有研究認(rèn)為大鼠心肌梗死后3 ～4 周主動(dòng)脈彈性沒有任何變化，這可能與心肌梗死后，血管結(jié)構(gòu)變化發(fā)生較晚有關(guān)［17］。目前尚無治療心力衰竭的中成藥改善動(dòng)脈彈性的文獻(xiàn)報(bào)道。本研究發(fā)現(xiàn)，健心顆粒能降低心力衰竭大鼠PWV 值，改善胸主動(dòng)脈膠原纖維、彈力纖維重構(gòu)和動(dòng)脈舒縮功能。

近年來，以優(yōu)化心室-動(dòng)脈偶聯(lián)為導(dǎo)向的治療方案已成為研究的新亮點(diǎn)，在臨床治療中獲益頗豐［18］。Ea/Ees 比值是經(jīng)典評(píng)估VAC 的方法［19］，通常在1.0±0.36 左右［20］。心力衰竭時(shí)，收縮性下降，僵硬度增加，導(dǎo)致Ees 下降，全身組織灌注不足，腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)和交感神經(jīng)系統(tǒng)過度激活，增加血容量和動(dòng)脈負(fù)荷，代償受損的全身灌注，使得Ea 增加，Ea/Ees 值增高，發(fā)生脫偶聯(lián)，最終導(dǎo)致終末器官灌注不足［21］。通過擴(kuò)血管藥物和（或） 正性肌力藥物可以改善收縮期心力衰竭患者的偶聯(lián)和功能。研究表明擴(kuò)血管藥物能降低Ea，而正性肌力藥物能增加Ees，兩者都可改善Ea/Ees 值［22］。另有研究發(fā)現(xiàn)，大鼠前降支結(jié)扎8 周后，出現(xiàn)Ea/Ees 值增高； 而美托洛爾能降低Ea/Ees 值［23］。本研究結(jié)果顯示，心力衰竭大鼠出現(xiàn)心室-動(dòng)脈偶聯(lián)指數(shù)增高，而健心顆粒能降低VAC，說明其可能通過抑制心室重構(gòu)與神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)激活，糾正心力衰竭中的脫偶聯(lián)關(guān)系，最終改善終末器官灌注。

Apelin/APJ 受體系統(tǒng)是調(diào)控心血管生理功能的重要內(nèi)分泌系統(tǒng)，其活性異常參與高血壓、動(dòng)脈粥樣硬化及心力衰竭等心血管疾病的發(fā)生、發(fā)展。Apelin 通過促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞釋放NO，從而擴(kuò)張血管、增加心肌收縮力［24］。本研究結(jié)果表明，健心顆粒可增加心力衰竭大鼠Apelin、APJ 蛋白表達(dá)和血清NO 水平，其作用與Apelin 相似； 用F13A 拮抗Apelin 后，健心顆粒上調(diào)Apelin、APJ、NO 的作用被抑制。

綜上所述，健心顆粒可能通過Apelin-APJ-NO 通路改善心力衰竭大鼠心室-動(dòng)脈脫偶聯(lián)與動(dòng)脈彈性，為健心顆粒治療心力衰竭提供新的依據(jù)，但本實(shí)驗(yàn)結(jié)果有待系統(tǒng)臨床研究進(jìn)行進(jìn)一步驗(yàn)證。