低聚果糖沙棘紅茶粉調(diào)節(jié)腸道菌群人體試驗(yàn)研究

李艷，李蕊，陸少敏，陳紅運(yùn)，李曉敏

1.完美（廣東）日用品有限公司（中山 528400）；2.廣東完美生命健康科技研究院有限公司（中山 528400）

腸道菌群目前被認(rèn)為是一個(gè)由500～1000個(gè)物種和1014種細(xì)菌組成的新型復(fù)雜器官，是人體細(xì)胞數(shù)量的10倍以上[1]。腸道菌群越來越被認(rèn)為是人類健康的關(guān)鍵因素，其與宿主和諧共存，參與營養(yǎng)物質(zhì)的消化和吸收，也有助于維持宿主免疫系統(tǒng)的完整性，從而防止病原體定植[2]。研究表明，人類的各種慢性疾病可能與腸道微生態(tài)紊亂有關(guān)，維持良好的人體與腸道微生物共生關(guān)系，對人類健康至關(guān)重要[1]。低聚果糖是目前證據(jù)等級較高，得到公認(rèn)的益生元，具有改善菌群平衡、調(diào)節(jié)腸道功能等健康益處[3]。大量試驗(yàn)研究證實(shí)低聚果糖可顯著促進(jìn)腸道雙歧桿菌和乳桿菌的增殖，并抑制有害菌，具有調(diào)節(jié)腸道菌群功能，有利于調(diào)節(jié)人體微生態(tài)平衡[4-12]。沙棘為胡頹子科植物沙棘的干燥成熟果實(shí)[13]，屬于“藥食同源”物質(zhì)。沙棘含有極為豐富的營養(yǎng)成分與生物活性物質(zhì)，包括維生素、礦物質(zhì)、蛋白質(zhì)及氨基酸、黃酮類、三萜及甾體類化合物等[14-15]。多項(xiàng)試驗(yàn)研究證明沙棘中的活性成分可促進(jìn)腸道乳酸桿菌增殖，增加有益菌和降低有害菌的相對豐度，調(diào)節(jié)腸道菌群組成[16-21]。茶葉對人體腸道疾病的預(yù)防和治療作用在古醫(yī)書中早有記載[22]，現(xiàn)代大量試驗(yàn)研究證實(shí)紅茶或其中的茶多酚成分可以促進(jìn)乳酸桿菌、雙歧桿菌、噬熱鏈球菌等有益菌的生長，抑制產(chǎn)氣莢膜梭菌、大腸桿菌、沙門氏菌、金黃色葡萄球菌、副溶血性弧菌等有害菌的生長，具有明顯的調(diào)節(jié)腸道菌群功能[23-34]。

低聚果糖沙棘紅茶粉由低聚果糖、沙棘粉和紅茶粉、檸檬酸、DL-蘋果酸等組成，對其進(jìn)行調(diào)節(jié)腸道菌群的人體試驗(yàn)研究，為該產(chǎn)品的應(yīng)用推廣提供重要依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 受試物

低聚果糖沙棘紅茶粉（完美公司生產(chǎn)），主要原料有低聚果糖、沙棘粉和紅茶粉、檸檬酸、DL-蘋果酸等，其中低聚果糖、沙棘粉和紅茶粉的比例約為4∶3.5∶1。

1.2 受試對象

1.2.1 受試人群納入標(biāo)準(zhǔn)

經(jīng)體檢合格符合下列條件的自愿受試者：

（1）一個(gè)月內(nèi)未患過胃腸疾病者；

（2）一個(gè)月內(nèi)未服用過抗生素者。

1.2.2 受試人群排除標(biāo)準(zhǔn)

（1）年齡在65歲以上者；（2）孕婦或哺乳期婦女，對受試樣品過敏者；

（3）合并有心、肝、腎和造血系統(tǒng)等嚴(yán)重全身性疾病者；

（4）短期內(nèi)服用與受試物功能有關(guān)的物品，影響結(jié)果判斷者；

（5）不符合納入標(biāo)準(zhǔn)，未按規(guī)定食用受試樣品，無法判定功效或資料不全影響功效或安全性判斷者。

1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

按照《保健食品檢驗(yàn)與評價(jià)技術(shù)規(guī)范》（2003年版）要求，采用自身對照及組間對照設(shè)計(jì)。按受試者的菌群狀況隨機(jī)分為試食組和對照組，盡可能考慮年齡、性別、飲食等因素，進(jìn)行組間均衡性檢驗(yàn)，以保證組間的可比性。每組受試者60例。

1.4 食用劑量及周期

試食組：低聚果糖沙棘紅茶粉，每日2次，每次1袋，沖飲，連續(xù)食用15 d；

對照組：采用空白對照組。

1.5 觀察指標(biāo)

各項(xiàng)觀察指標(biāo)于試食開始和結(jié)束時(shí)各做一次。

1.5.1 一般狀況包括精神狀況、睡眠、飲食、大小便等，并測量體重、血壓、心率。

1.5.2 安全性觀察

（1）血常規(guī)檢查：檢測血常規(guī)指標(biāo)，觀察紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板和血紅蛋白含量。

（2）尿、便常規(guī)檢查：檢查尿常規(guī)和便常規(guī)。

（3）肝、腎功能檢查：應(yīng)用全自動(dòng)生化分析儀測定血液主要生化指標(biāo)。

（4）胸透、心電圖、腹部B超：試食開始前進(jìn)行一次胸部透視、心電圖和腹部B超檢查。

（5）不良反應(yīng)觀察。

1.5.3 功效性觀察

1.5.3.1 功效性指標(biāo)于試食前后分別采集受試者糞便，進(jìn)行10倍系列稀釋，選合適稀釋度，分別接種在各培養(yǎng)基上，按下列要求進(jìn)行培養(yǎng)，然后對培養(yǎng)物進(jìn)行菌落計(jì)算。

1.5.3.2 功效判定標(biāo)準(zhǔn)

符合以下任一項(xiàng)，且試驗(yàn)組試食前后自身比較及試食后試食組與對照組比較，差異均有顯著性，可以判定該受試樣品具有調(diào)節(jié)腸道菌群功能的作用。

（1）糞便中雙歧桿菌和/或乳桿菌明顯增加，產(chǎn)氣莢膜梭菌減少或不增加，腸桿菌、腸球菌、擬桿菌無明顯變化。

（2）糞便中雙歧桿菌和/或乳桿菌明顯增加，產(chǎn)氣莢膜梭菌減少或不增加，腸桿菌和/或腸球菌、擬桿菌明顯增加，但增加的幅度低于雙歧桿菌/乳桿菌增加的幅度。

1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

數(shù)據(jù)結(jié)果用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，自身對照資料采用配對t檢驗(yàn)，兩組均數(shù)比較采用成組t檢驗(yàn)，后者需進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)，對非正態(tài)分布或方差不齊的數(shù)據(jù)進(jìn)行適當(dāng)?shù)淖兞哭D(zhuǎn)換，待滿足正態(tài)方差齊后，用轉(zhuǎn)換的數(shù)據(jù)進(jìn)行t檢驗(yàn)；若轉(zhuǎn)換數(shù)據(jù)仍不能滿足正態(tài)方差齊要求，改用t’檢驗(yàn)或秩和檢驗(yàn)；方差齊但變異系數(shù)太大（如C.V.＞50%）的資料應(yīng)用秩和檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 一般資料

共篩選合格試驗(yàn)人群120例，試食組、對照組各60例，試驗(yàn)結(jié)束后兩組各有3例脫落，最近進(jìn)入統(tǒng)計(jì)結(jié)果的總例數(shù)為114例，其中：試食組57例，男性21例，女性36例，平均年齡35.53歲；對照組57例，男性22例，女性35例，平均年齡33.72歲。試驗(yàn)結(jié)果如表1所示。

表1 試驗(yàn)前一般資料的分析

2.2 安全性觀察

2.2.1 血壓、心率、尿常規(guī)、便常規(guī)、血常規(guī)指標(biāo)

食用受試物15 d后，試食組和對照組體重、血壓、心率、尿常規(guī)、便常規(guī)、血常規(guī)指標(biāo)均未見明顯異常改變，提示樣品對機(jī)體健康無明顯損害。結(jié)果見表2。

表2 試食前后兩組人群血壓、心率、尿、便、血常規(guī)變化情況（X±S）

2.2.2 血液生化指標(biāo)

試食前后試食組與對照組人群的血生化指標(biāo)均在正常范圍內(nèi)。結(jié)果見表3。

表3 試食前后兩組人群血生化指標(biāo)（X±S）

2.2.3 不良反應(yīng)

試食期間未見明顯不良反應(yīng)。

2.3 功效指標(biāo)

試食前后腸道菌群數(shù)量變化見表4。試食前兩組腸道菌群數(shù)量無顯著性差異（P＞0.05）。試食后試食組乳桿菌、雙歧桿菌數(shù)量與試食前比較明顯增加，產(chǎn)氣莢膜菌明顯減少（P＜0.05）；試食后試食組乳桿菌、雙歧桿菌數(shù)量與對照組比較，均明顯高于對照組（P＜0.05）；而試食前后腸桿菌、腸球菌、擬桿菌數(shù)量均無明顯變化（P＞0.05）。

表4 試食前后兩組人群腸道菌群數(shù)量變化單位：CFU/g 糞便（log±S）

表4 試食前后兩組人群腸道菌群數(shù)量變化單位：CFU/g 糞便（log±S）

3 結(jié)論與討論

將受試者按菌群狀況分為試食組和對照組，試食組食用低聚果糖沙棘紅茶粉，對照組采用空白對照。15 d后結(jié)果表明：試食后試食組乳桿菌和雙歧桿菌數(shù)量與試食前比較均有增加，差異有顯著性（P＜0.05）；試食后試食組乳桿菌和雙歧桿菌數(shù)量顯著高于對照組（P＜0.05）；試食后產(chǎn)氣莢膜菌減少（P＜0.05），腸桿菌、腸球菌、擬桿菌數(shù)量均無明顯變化。兩組受試者試食后血壓、心率、血、便、尿常規(guī)和血生化指標(biāo)等均無明顯異常改變，試食期間未觀察到明顯不良反應(yīng)。根據(jù)《保健食品檢驗(yàn)與評價(jià)技術(shù)規(guī)范》（2003年版）可以判定，低聚果糖沙棘紅茶粉具有調(diào)節(jié)人體腸道菌群的保健功能。

低聚果糖作為目前證據(jù)等級較高，得到公認(rèn)的益生元，其改善菌群平衡、調(diào)節(jié)腸道功能已被專家共識[3]。沙棘粉和紅茶粉亦有大量試驗(yàn)研究證實(shí)具有增殖有益菌、抑制有害菌生長的功效。但三者配伍調(diào)節(jié)腸道菌群功能是否顯著強(qiáng)于單方低聚果糖還有待進(jìn)一步研究。