miR-124-3p調(diào)控激素性股骨頭壞死患者骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化作用的研究*

楊增強(qiáng) 郝飛虎 原天祎 周治衡 崔泳

激素性股骨頭壞死（steroid-induced necrosis of femoral head, SINFH）是因為長期使用糖皮質(zhì)激素及其衍生藥物導(dǎo)致的嚴(yán)重骨科疾病。SINFH的主要病理學(xué)特點是骨細(xì)胞和骨髓的慢性持續(xù)性壞死，最終導(dǎo)致股骨頭的破壞坍塌[1-3]。雖然藥物治療及核心減壓對SINFH 有一定的效果[4]，但早期的干預(yù)也只能減輕激素的副作用[5]。因此，尋找SINFH的發(fā)病機(jī)制和早期治療的有效方法在骨科領(lǐng)域至關(guān)重要。

既往研究表明，SINFH 與骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs）的成骨能力和成脂能力失衡有關(guān)[6]。骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分化方向受骨形態(tài)發(fā)生蛋白（bone morphogenetic proteins, BMPs）、Wnt 和Notch 等信號通路，Runx2、C/EBP 和PPARγ 等轉(zhuǎn)錄因子，非編碼RNA，激素及線粒體等眾多因素的調(diào)控，任何環(huán)節(jié)的異常都可能導(dǎo)致病理狀態(tài)的發(fā)生[7]。

非編碼RNA（noncoding RNA, ncRNAs）是一類調(diào)節(jié)基因表達(dá)的小分子RNA，可以調(diào)控基因的表達(dá)和轉(zhuǎn)錄[8-9]，在SINFH 中發(fā)揮著重要作用[10-11]。CTNNB1 基因可以編碼蛋白質(zhì)β-連環(huán)蛋白（β-Catenin），參與調(diào)控細(xì)胞的增殖和凋亡，以及調(diào)節(jié)骨形成和骨吸收之間的平衡[12]。有研究發(fā)現(xiàn)，miR-322-5p、miR-124-3p、miR-125a-3p和CTNNB1的表達(dá)失衡與SINFH 有關(guān)[13]。同時，miR-124 對人類BMSC的生物學(xué)功能有一定的影響[14]。然而，miR-124-3p、CTNNB1在SINFH中的作用和分子機(jī)制仍不清楚。本研究主要探討SINFH 中miR-124-3p 對BMSCs 的調(diào)控作用及其與CTNNB1 的相關(guān)性，明確miR-124-3p 對BMSCs 的調(diào)控作用，為SINFH的診治提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 主要儀器與試劑

細(xì)胞培養(yǎng)箱（美國Thermo Fisher 公司）；超凈工作臺（蘇州安泰科技有限公司）；低溫冷凍離心機(jī)（德國Sigma公司）；Real-time檢測儀（美國Thermo Fisher公司）；研究級倒置顯微鏡（中國廣州市明美科技有限公司）；人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（中國武漢普諾賽生命科技有限公司）；……