不同乳酸菌發(fā)酵留蘭香純露的抗氧化活性比較

蔡春靜，李璇，王瑩，張元成，楚杰*

（1.齊魯工業(yè)大學(xué)（山東省科學(xué)院）生物研究所，山東濟南 250013；2.山東昌龍農(nóng)業(yè)科技有限公司，山東濟南 251600）

留蘭香，別名綠薄荷，屬唇形科，多年生草本植物[1]。留蘭香具有疏風(fēng)清熱、解表和中、理氣止痛的功效，可用于治療感冒頭痛、胃痛、咳嗽、腹脹、吐瀉、痛經(jīng)、肢麻、跌撲腫痛[2]等。研究表明，留蘭香中含有的香芹酮，不僅具有顯著的抗炎作用[3]，其抗炎機制可能與減少巨噬細胞的產(chǎn)生及炎性遷移、抑制促炎因子表達等炎癥反應(yīng)進程調(diào)控有關(guān)[4]；而且留蘭香油還具有明顯的抗氧化作用[5]。目前，留蘭香植株收割后加工提取留蘭香油，在留蘭香精油蒸餾過程中產(chǎn)生的副產(chǎn)物——留蘭香純露，主要包含微量的香精油和水溶性混合物。與精油相比，其中含有豐富的黃酮苷、木脂素苷、萜苷以及酚酸類化合物。由于市場上對純露的價值缺乏認知，加工企業(yè)在獲得揮發(fā)油后，純露多被作為工業(yè)廢水排放，不僅使環(huán)境受到污染，也是對留蘭香資源的極大浪費。研究表明，留蘭香純露有較好的自由基清除能力和總抗氧化能力。

近年來，化妝品產(chǎn)業(yè)呈現(xiàn)出蓬勃發(fā)展的態(tài)勢，皮膚問題愈發(fā)成為人們關(guān)注的熱點，紫外線輻射引起的皮膚氧化是導(dǎo)致皮膚損傷、老化的重要原因[6-7]。研究發(fā)現(xiàn)，長期使用添加化學(xué)抗氧化劑的化妝品對生物體有潛在的毒副作用[8]。因此，開發(fā)以天然成分為主的抗氧化產(chǎn)品是近年來的研究重點。本文選用不同乳酸菌發(fā)酵的留蘭香純露作為研究對象，研究其所具有的抗氧化能力，以期為后續(xù)其在食品、日用化學(xué)品、醫(yī)藥等領(lǐng)域的開發(fā)和利用提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

鼠李糖乳桿菌（Lactobacillusrhamnosus）LR-1、植物乳桿菌（Lactobacillusplantarum）LP-1、糞腸球菌（Enterococcusfaecalis）EF-1、嗜酸乳桿菌（Lactobacillusacidophilus）LA-1：山東省科學(xué)院生物研究所工業(yè)微生物實驗室保存；留蘭香純露：山東昌龍農(nóng)業(yè)科技有限公司。

2，2-聯(lián)氨-雙-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸[2，2'-azinobis（3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid），ABTS）]：北京索萊寶科技有限公司；1，1-二苯基-2-三硝基苯肼（1，1-diphenyl-2-picrylhydrazyl，DPPH）：梯希愛（上海）化成工業(yè)發(fā)展有限公司；K2S2O8、Na2HPO4：天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司；FeSO4、NaH2PO4：國藥集團化學(xué)試劑有限公司；鄰苯三酚、水楊酸：上海麥克林生化科技股份有限公司；MRS 培養(yǎng)基：青島高科園海博生物技術(shù)有限公司。所有試劑均為分析純。

1.2 儀器與設(shè)備

V-5600 分光光度計：上海元析儀器有限公司；HH-3A 數(shù)顯恒溫水浴鍋：常州國華電器有限公司；HWS-150 恒溫恒濕培養(yǎng)箱：上海精宏實驗設(shè)備有限公司；GZC-30013 智能光照培養(yǎng)箱：合肥右科儀器設(shè)備有限公司。

1.3 方法

1.3.1 菌種活化

從保存鼠李糖乳桿菌、植物乳桿菌、糞腸球菌、嗜酸乳桿菌的甘油管中取50 μL 接種到MRS 培養(yǎng)基中，37 ℃恒溫培養(yǎng)24 h。

1.3.2 不同乳酸菌發(fā)酵留蘭香純露

將活化的鼠李糖乳桿菌、植物乳桿菌、糞腸球菌、嗜酸乳桿菌以3%接種量分別接種到留蘭香純露體積分數(shù)分別為20%、40%、60%、80%、100% 的MRS 培養(yǎng)液中，37 ℃恒溫培養(yǎng)24 h，稀釋涂平板，記錄活菌數(shù)。

1.3.3 不同乳酸菌發(fā)酵的留蘭香純露的體外抗氧化力測定

1.3.3.1 樣品制備

不同濃度的留蘭香純露：用無菌水將留蘭香純露稀釋成體積分數(shù)為20%、40%、60%、80%、100% 的留蘭香純露稀釋液。

不同濃度乳酸菌發(fā)酵的留蘭香純露：將1.3.2 制備的不同體積分數(shù)發(fā)酵后的留蘭香純露用相同濃度純露分別稀釋成相同活菌數(shù)，避免活菌數(shù)對后期試驗結(jié)果造成影響。

1.3.3.2 不同乳酸菌發(fā)酵的留蘭香純露清除DPPH 自由基能力的測定

DPPH 自由基清除力測定參照Bae 等[9]的方法并略作改進。配制0.180 mmol/L DPPH 儲備液，各取2 mL DPPH 儲備液與樣品充分搖勻后37 ℃避光反應(yīng)30 min，517 nm 測吸光度。空白組以2 mL 無菌水代替DPPH 溶液，對照組以2 mL 無菌水代替樣品，相同方法處理。每組設(shè)置3 個平行試驗，結(jié)果取其平均值。DPPH 自由基清除率（X，%）計算如式（1）。

式中：A0、A1、A2分別為DPPH 自由基清除能力測定反應(yīng)中配制的對照組、樣品組、空白組反應(yīng)液在517 nm 波長處測得的吸光度。

1.3.3.3 不同乳酸菌發(fā)酵的留蘭香純露清除ABTS+自由基能力的測定

ABTS+自由基清除能力測定參考李新[10]的方法并略作改進。將ABTS 溶液（7.00 mmol/L）與硫酸二氫銨溶液（2.45 mmol/L）按體積比1∶1 混合，避光放置12～16 h，即為ABTS 儲備液，將其用無水乙醇稀釋40～50 倍，使稀釋液在波長734 nm 處吸光度為0.70±0.02（無水乙醇調(diào)零），即ABTS 工作液。加入6 mL ABTS工作液與3 mL 樣品，充分搖勻后25 ℃下避光反應(yīng)30 min，以無水乙醇調(diào)零，735 nm 測定吸光度?？瞻捉M以6 mL 無菌水代替ABTS 工作液，對照組以3 mL 無菌水代替樣品，相同方法處理。每組設(shè)置3 個平行，結(jié)果取其平均值。ABTS+自由基清除率（Y，%）計算如式（2）。

式中：A0、A1、A2分別為ABTS+自由基清除能力測定反應(yīng)中配制的對照組、樣品組、空白組反應(yīng)液在735 nm 波長處測得的吸光度。

1.3.3.4 不同乳酸菌發(fā)酵的留蘭香純露清除·OH 能力的測定

·OH 清除能力測定參考張新霞[11]的方法并略作改動。加入6 mmol/L 的FeSO4溶液、樣品及相同摩爾數(shù)的H2O2、水楊酸溶液各2 mL，充分搖勻后靜置反應(yīng)30 min，以去離子水調(diào)零，510 nm 測吸光度?？瞻捉M以2 mL 無菌水代替水楊酸，對照組以2 mL 無菌水代替樣品，相同方法處理。每組設(shè)置3 個平行，結(jié)果取其平均值。·OH 清除率（P，%）計算如式（3）。

式中：A0、A1、A2分別為·OH 清除能力測定反應(yīng)中配制的對照組、樣品組、空白組反應(yīng)液在510 nm 波長處測得的吸光度。

1.3.3.5 不同乳酸菌發(fā)酵的留蘭香純露清除O2-自由基能力的測定

O2-自由基清除能力測定參照周江菊等[12]的方法并有所修改。加入4.5 mL 50 mmol/L 的Tris-HCl 緩沖液（pH8.2）及1 mL 樣品，充分搖勻后，25 ℃水浴25 min。再加入2 mL 10 mmol/L 鄰苯三酚溶液，25 ℃水浴5 min，最后加入1 滴濃鹽酸終止反應(yīng)。以去離子水調(diào)零，299 nm 測定吸光度?？瞻捉M以2 mL 無菌水代替鄰苯三酚溶液，對照組以1 mL 無菌水代替樣品，相同方法處理。每組設(shè)置3 個平行試驗，結(jié)果取其平均值。·O2-清除率（Z，%）計算如式（4）。

式中：A0、A1、A2分別為·O2-清除能力測定反應(yīng)中配制的對照組、樣品組、空白組反應(yīng)液在299 nm 波長處測得的吸光度。

1.3.3.6 不同乳酸菌發(fā)酵的留蘭香純露總還原力的測定總還原力的測定參照Ahmadi 等[13]的方法并稍作修改。加入2.5 mL 0.2 mol/L 磷酸鹽緩沖液、2.5 mL 1% 鐵氰化鉀以及1 mL 樣品，充分搖勻后，50 ℃水浴20 min。再加入2.5 mL 10% 三氯乙酸，4 000 r/min 離心10 min，最后取5 mL 上清液、5 mL 無菌水以及1 mL 0.1% 三氯化鐵，靜置10 min。以去離子水調(diào)零，700 nm 測吸光度?？瞻捉M以1 mL 無菌水代替樣品，相同方法處理。每組設(shè)置3 個平行試驗，結(jié)果取其平均值?？傔€原力（B）計算如式（5）。

式中：A0、A1分別為總還原力測定反應(yīng)中配制的空白組、樣品組反應(yīng)液在700 nm 波長處測得的吸光度。

1.4 數(shù)據(jù)處理與分析

采用Excel 2019 軟件處理數(shù)據(jù)，數(shù)據(jù)以平均值±標準差表示，數(shù)據(jù)采用單因素方程分析——最小顯著性差異（least significant difference，LSD）檢驗進行差異顯著性分析（P＜0.05）。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同乳酸菌發(fā)酵留蘭香純露的活菌數(shù)

前期研究發(fā)現(xiàn)不同乳酸菌抗氧化能力存在差異，但不同乳酸菌的抗氧化機制尚未完全闡明。因此，選取4種不同的乳酸菌對不同體積分數(shù)的留蘭香純露進行發(fā)酵，通過比較其在不同體積分數(shù)的留蘭香純露中的發(fā)酵生長情況，分析比較體外抗氧化能力差異，不僅可以挖掘具有優(yōu)良抗氧化特性的乳酸菌，而且為下一步留蘭香純露的開發(fā)應(yīng)用提供參考。不同乳酸菌發(fā)酵的留蘭香純露的活菌數(shù)見表1。

表1 不同乳酸菌發(fā)酵的留蘭香純露的活菌數(shù)Table 1 Bacteria counts in the spearmint hydrolates fermented by different lactic acid bacteria CFU/mL

由表1 可知，經(jīng)4種不同乳酸菌發(fā)酵的不同體積分數(shù)的留蘭香純露活菌數(shù)各有差異，糞腸球菌及植物乳桿菌發(fā)酵的20%、40% 純露活菌數(shù)均高于0% 純露的乳酸菌發(fā)酵液，說明低濃度的留蘭香純露可以促進植物乳桿菌及糞腸球菌的生長。但經(jīng)鼠李糖乳桿菌、嗜酸乳桿菌發(fā)酵的20%、40%純露以及經(jīng)4 種菌發(fā)酵的60%純露中的活菌數(shù)與初始菌數(shù)相比，雖然有所提高，但均低于0%純露的乳酸菌發(fā)酵液，說明不同濃度的留蘭香純露對4 種乳酸菌的生長有一定的影響，這一結(jié)論在乳酸菌發(fā)酵的80%、100% 純露可以得到驗證，其植物乳桿菌、糞腸球菌及嗜酸乳桿菌發(fā)酵后其活菌數(shù)均低于接種量。

為了進一步探究以上4 種乳酸菌在留蘭香純露中的發(fā)酵生長情況，以0% 純露的4 種乳酸菌發(fā)酵液和未經(jīng)發(fā)酵的留蘭香純露為對照，對4 種乳酸菌發(fā)酵的不同體積分數(shù)的留蘭香純露（20%、40%、60%）進行體外抗氧化試驗評價。

2.2 不同乳酸菌發(fā)酵的不同體積分數(shù)的留蘭香純露的體外抗氧化能力比較

2.2.1 不同乳酸菌發(fā)酵的不同體積分數(shù)的留蘭香純露對DPPH 自由基的清除能力

DPPH 在有機溶劑中較為穩(wěn)定，在517 nm 波長處有強吸收，當(dāng)自由基清除劑存在時，單電子與抗氧化劑中的質(zhì)子配對而被還原，溶液變淺，吸光度降低，且這種顏色變淺的程度與配對電子數(shù)呈化學(xué)劑量關(guān)系，即吸光度越低，樣品清除自由基能力越強，從而用于評價樣品的抗氧化能力[14]。因此采用該方法測定不同乳酸菌發(fā)酵的不同體積分數(shù)的留蘭香純露對DPPH 自由基的清除率，結(jié)果見表2 及圖1。

圖1 乳酸菌發(fā)酵的不同體積分數(shù)留蘭香純露對DPPH 自由基的清除作用Fig.1 DPPH free radical scavenging effects of different volume fractions of spearmint hydrolates fermented by lactic acid bacteria

表2 不同乳酸菌發(fā)酵的留蘭香純露對DPPH 自由基的清除能力Table 2 DPPH free radical scavenging effects of spearmint hydrolates fermented by different lactic acid bacteria%

研究證明，植物乳桿菌NDC 75017、嗜酸乳桿菌NCFM、植物乳桿菌ATCC 14917、鼠李糖乳桿菌LGG發(fā)酵液對DPPH 自由基的清除率為22%～55%[15]。由表2 可知，本試驗所用菌株的發(fā)酵液對DPPH 自由基清除率明顯較高，這也說明不同菌株的抗氧化能力不同。留蘭香純露、乳酸菌發(fā)酵液及不同乳酸菌發(fā)酵的留蘭香純露均對DPPH 自由基有清除作用。這與已有研究的許多植物純露都具有一定的抗氧化活性結(jié)論相一致[16]，且本研究中留蘭香純露對DPPH 自由基的最高清除率高于文獻報道的玫瑰純露[17]、麩炒枳殼純露、吳茱萸純露、車前子純露和黃梔子純露等[16]。結(jié)果顯示，4 種乳酸菌發(fā)酵的留蘭香純露對DPPH 自由基清除率要高于留蘭香純露和乳酸菌發(fā)酵液的清除率。說明留蘭香純露經(jīng)乳酸菌發(fā)酵后其抗氧化活力有了極大提高，其中鼠李糖乳桿菌和植物乳桿菌發(fā)酵的留蘭香純露提升尤為顯著（P＜0.05）。

圖1 結(jié)果顯示，相同體積分數(shù)，乳酸菌發(fā)酵的留蘭香純露對DPPH 自由基的清除率均高于留蘭香純露，且乳酸菌發(fā)酵的留蘭香純露對DPPH 自由基清除率隨著體積分數(shù)的增加而增加，且呈現(xiàn)一定的濃度依賴性。4 種乳酸菌發(fā)酵的留蘭香純露DPPH·清除率均在體積分數(shù)為60%時達到最大值，其與相同體積分數(shù)留蘭香純露相比分別增加了1.17、1.17、1.15、1.15 倍。研究顯示，乳酸菌具有DPPH 自由基清除活性可能與菌體產(chǎn)生的胞外多糖有關(guān)，Xu 等[18]研究顯示DPPH 自由基清除活性與由雙歧桿菌分離出的胞外多糖的濃度呈正相關(guān)。乳酸菌發(fā)酵的留蘭香純露對DPPH 自由基清除活性可能也與此有關(guān)。

2.2.2 不同乳酸菌發(fā)酵的不同體積分數(shù)的留蘭香純露對ABTS+自由基的清除作用

ABTS+自由基在適當(dāng)?shù)难趸瘎┳饔孟卵趸删G色的自由基陽離子，當(dāng)有抗氧化物質(zhì)存在時，ABTS+·的產(chǎn)生會被抑制，使反應(yīng)體系褪色，吸光度變小，在734 nm 處測定吸光度即可計算出藥物的清除能力[19]。本試驗采用該方法測定不同乳酸菌發(fā)酵的不同體積分數(shù)的留蘭香純露對ABTS+自由基的清除作用，結(jié)果見表3 及圖2。

圖2 乳酸菌發(fā)酵的不同體積分數(shù)留蘭香純露對ABTS+自由基的清除作用Fig.2 ABTS+free radical scavenging effects of different volume fractions of spearmint hydrolates fermented by lactic acid bacteria

表3 不同乳酸菌發(fā)酵的留蘭香純露對ABTS+自由基的清除作用Table 3 ABTS+free radical scavenging effects of spearmint hydrolates fermented by different lactic acid bacteria%

由表3 可知，留蘭香純露、乳酸菌發(fā)酵液及不同乳酸菌發(fā)酵的留蘭香純露對ABTS+自由基的清除作用均超過50%，證明其均有良好的抗氧化能力。留蘭香純露略低于文獻報道的香榧純露對ABTS+自由基的清除率[20]，但留蘭香純露經(jīng)4 種乳酸菌發(fā)酵后對ABTS+自由基的清除率大大提高，且高于留蘭香純露和乳酸菌發(fā)酵液。

由圖2 看出，ABTS+自由基的清除率與留蘭香純露的體積分數(shù)呈正相關(guān)，隨著體積分數(shù)的增加，經(jīng)鼠李糖乳桿菌、糞腸球菌及嗜酸乳桿菌發(fā)酵的20%、40%、60%留蘭香純露對于ABTS+自由基的清除率也隨之增加。4 種乳酸菌發(fā)酵的留蘭香純露對ABTS+自由基清除能力與相同體積分數(shù)的留蘭香純露相比有較大提升，除植物乳桿菌發(fā)酵的留蘭香純露是在體積分數(shù)為40%時達到最大值外，其余均是在體積分數(shù)為60%時達到最大值。

2.2.3 不同乳酸菌發(fā)酵的不同體積分數(shù)的留蘭香純露對·OH 的清除作用

在體外實驗體系中，環(huán)境中的Fe3+和Fe2+催化過氧化氫和超氧陰離子反應(yīng)生成羥基自由基，羥基自由基是活性氧中反應(yīng)能力最強的一種，幾乎可以和細胞內(nèi)的一切有機物反應(yīng)，能夠殺死紅細胞，降解細胞膜、DNA 和多糖類化合物，引起組織細胞病變，導(dǎo)致疾病發(fā)生和加速機體衰老[21]。采用水楊酸法對·OH 清除能力進行測定的結(jié)果見表4 和圖3。

圖3 乳酸菌發(fā)酵的不同體積分數(shù)留蘭香純露對·OH 的清除作用Fig.3 ·OH scavenging effects of different volume fractions of spearmint hydrolates fermented by lactic acid bacteria

表4 不同乳酸菌發(fā)酵的留蘭香純露對·OH 的清除作用Table 4 ·OH scavenging effects of spearmint hydrolates fermented by different lactic acid bacteria%

研究顯示，菌體具有較強的羥自由基清除能力可歸結(jié)為在細胞內(nèi)存在著針對Cu2+和Fe2+的天然螯合物質(zhì)，Cu2+和Fe2+能夠參與機體多種氧化過程，因此乳酸菌對Cu2+和Fe2+的螯合作用，能夠從根本上減少羥自由基的產(chǎn)生[22]。這可能是乳酸菌發(fā)酵液對·OH 具有較高清除率的原因。由表4 可知，留蘭香純露對·OH的清除率在12% 左右，明顯高于報道中高良姜純露對·OH 的清除率[23]。4 種乳酸菌發(fā)酵的留蘭香純露對·OH 的清除作用遠高于留蘭香純露及乳酸菌發(fā)酵液的清除作用，且相互之間差異顯著（P＜0.05）。其中嗜酸乳桿菌發(fā)酵的留蘭香純露的·OH 清除率最高，達到95.48%，與留蘭香純露及乳酸菌發(fā)酵液相比分別增加了6.36 倍、23.06%。

如圖3所示，留蘭香純露對·OH 的清除作用相對較低，但經(jīng)乳酸菌發(fā)酵的留蘭香純露對·OH 的清除作用大幅升高，以體積分數(shù)60% 尤為顯著，與相同體積分數(shù)的留蘭香純露相比，·OH 清除率增加7.18、6.54、6.91、7.67 倍。

2.2.4 不同乳酸菌發(fā)酵的不同體積分數(shù)的留蘭香純露對O2-自由基的清除作用

·O2-是機體在代謝過程中產(chǎn)生的一種具有很強氧化能力的自由基，抗氧化物質(zhì)清除·O2-是衡量抗氧化能力的一個重要指標[24]。本試驗釆用鄰苯三酚自氧化方法，在堿性條件下，鄰苯三酚可發(fā)生自氧化，產(chǎn)生·O2-等中間產(chǎn)物，·O2-又可加快鄰苯三酚的自氧化速率，所以可通過檢測抗氧化劑對鄰苯三酚自氧化速率的影響，反映抗氧化劑對·O2-的清除能力，結(jié)果見表5和圖4。

圖4 乳酸菌發(fā)酵的不同體積分數(shù)留蘭香純露對·O2-的清除作用Fig.4 ·O2-scavenging effects of different volume fractions of spearmint hydrolates fermented by lactic acid bacteria

表5 留蘭香純露及乳酸菌發(fā)酵的留蘭香純露對·O2-的清除作用Table 5 ·O2-scavenging effects of spearmint hydrolates fermented and not fermented by different lactic acid bacteria%

由表5 看出，糞腸球菌、嗜酸乳桿菌乳發(fā)酵的留蘭香純露對·O2-的清除率要明顯高于留蘭香純露和乳酸菌發(fā)酵液，且差異均顯著（P＜0.05）。說明純露與乳酸菌發(fā)酵液之間在·O2-的清除作用方面同樣存在疊加效應(yīng)，可以相互促進其對·O2-的清除。

由圖4 可知，乳酸菌發(fā)酵的留蘭香純露對·O2-清除能力相較于其他自由基稍差，為20%～50%，可能是因為菌體內(nèi)抗氧化酶含量較少。與其他自由基的清除效果相同，4 種乳酸菌發(fā)酵的留蘭香純露對·O2-的清除力有了大幅升高。除植物乳桿菌發(fā)酵的純露以外，其余3 種菌發(fā)酵的留蘭香純露均在60% 時清除效果最佳，與留蘭香純露相比分別增加了4.03、5.84、5.73 倍。

2.2.5 不同乳酸菌發(fā)酵的不同體積分數(shù)的留蘭香純露總還原力比較

研究表明，一般情況下某些物質(zhì)的抗氧化性與還原性之間存在正相關(guān)性，還原力越強，其抗氧化性越強，因此可通過測定物質(zhì)的還原力來評估其抗氧化能力，若吸光度越大，則還原性越高，抗氧化活性也就越高[25]。因此本試驗通過測定其總還原力，側(cè)面反映其抗氧化性，結(jié)果見表6 和圖5。

圖5 乳酸菌發(fā)酵的不同體積分數(shù)留蘭香純露的總還原力Fig.5 Total reducing power of different volume fractions of spearmint hydrolates fermented by lactic acid bacteria

表6 留蘭香純露及乳酸菌發(fā)酵的留蘭香純露的總還原力（A700 nm）Table 6 Total reducing power of spearmint hydrolates fermented and not fermented by different lactic acid bacteria

表6 結(jié)果顯示，4 種乳酸菌發(fā)酵的留蘭香純露總還原力與留蘭香純露及乳酸菌發(fā)酵液具有顯著差異（P＜0.05）。其中以鼠李糖乳桿菌增長幅度最大，分別增長了38.04、3.10 倍；其次為糞球桿菌發(fā)酵純露、植物乳桿菌發(fā)酵純露、嗜酸乳桿菌發(fā)酵純露。

由圖5 可知，4 種乳酸菌發(fā)酵的留蘭香純露的總還原力均遠高于留蘭香純露。與上述結(jié)論類似，大部分乳酸菌留蘭香純露在體積分數(shù)60% 時的總還原力最強。乳酸菌發(fā)酵留蘭香純露體積分數(shù)在60%時，鼠李糖乳桿菌、植物乳桿菌、糞腸球菌、嗜酸乳桿菌發(fā)酵的留蘭香純露的還原力在A700nm處可達到1.2～1.6。

3 結(jié)論

本試驗結(jié)果表明，留蘭香純露具有一定的體外抗氧化活性，且在一定范圍內(nèi)，體積分數(shù)越高，抗氧化性越好。與留蘭香純露相比，不同乳酸菌發(fā)酵的留蘭香純露在抗氧化方面更具有優(yōu)勢。留蘭香純露與乳酸菌發(fā)酵液有疊加效應(yīng)，導(dǎo)致乳酸菌發(fā)酵留蘭香純露對DPPH 自由基、ABTS+自由基、·OH、·O2-的清除能力及總還原力均有大幅提升，尤其在·OH 清除能力和總還原力方面尤為突出。通過對比不同乳酸菌發(fā)酵的不同體積分數(shù)留蘭香純露的抗氧化力，多數(shù)乳酸菌在留蘭香純露體積分數(shù)為60% 時，DPPH 自由基、ABTS+自由基、·OH、·O2-的清除能力以及其總還原力最高。本試驗僅是對不同乳酸菌發(fā)酵的留蘭香純露的抗氧化能力做了初步探討，留蘭香純露是否可以作為以天然植物成分為主的抗氧化產(chǎn)品還需要進一步深入研究。