西安地區(qū)11～16歲健康青少年血清甲狀腺功能指標(biāo)參考范圍建立及驗證

徐曉麗，閆瑩玉，刁艷君，何 娟，陳 垚，呂卓越，劉家云（.空軍軍醫(yī)大學(xué)第一附屬醫(yī)院檢驗科，西安 700；.西安市婦幼保健院兒童保健科，西安 7000；.石泉縣醫(yī)院兒童保健科，陜西安康 7599；.西安體育學(xué)院運(yùn)動與健康科學(xué)學(xué)院，西安 70068）

甲狀腺是人體發(fā)育最早、最淺表的內(nèi)分泌腺[1]。甲狀腺素具有促進(jìn)組織分化、生長發(fā)育成熟的作用，也是維持機(jī)體軀干和神經(jīng)發(fā)育不可或缺的激素[2]。人體甲狀腺素分泌的差異性受種族、地域、生活方式等多方面影響，不同地區(qū)甲狀腺疾病發(fā)病率不同[3-4]。眾所周知，成人和青少年兒童的血清甲狀腺功能檢驗特征不同，在不同年齡之間，甲狀腺功能檢測的參考范圍不同[5]。有證據(jù)表明，青少年時期，因生長發(fā)育需求增多及垂體-性腺軸的快速發(fā)育，垂體-甲狀腺軸功能也發(fā)生變化，進(jìn)一步影響青少年甲狀腺功能[6]。成人甲狀腺功能的參考范圍不能完全正確評估青少年甲狀腺功能。本研究擬對西安市11～16 歲正常青少年血清甲狀腺功能進(jìn)行研究及探討，確立西安地區(qū)11～16 歲健康青少年血清甲狀腺功能參考范圍，并對相關(guān)結(jié)果進(jìn)行驗證。

1 材料和方法

1.1 研究對象 本研究系回顧性研究，選取2020年1月～2022年12月空軍軍醫(yī)大學(xué)第一附屬醫(yī)院（西京醫(yī)院）11～16 歲健康青少年為研究對象。對其甲狀腺功能進(jìn)行研究，確立西安地區(qū)11～16 歲健康青少年血清促甲狀腺激素（thyroid stimulating hormone，TSH）、游離甲狀腺素（free thyroxine，F(xiàn)T4）、游離三碘甲狀腺原氨酸(free triiodothyronine，F(xiàn)T3)、總甲狀腺素（total thyroxine，TT4）和總?cè)饧谞钕僭彼?total triiodothyronine，TT3)濃度的參考范圍。納入標(biāo)準(zhǔn)：①無特殊既往史；②體格及其他實驗室檢查未見明顯異常的11～16 歲健康青少年；排除標(biāo)準(zhǔn)：①存在頸部腫塊、甲狀腺腫大、生長發(fā)育遲緩、肥胖等內(nèi)分泌系統(tǒng)疾病；②嚴(yán)重心、肺功能異常及肝臟等重要臟器功能異常者；③甲狀腺功能紊亂個人和（或）家族史；④使用影響甲狀腺功能代謝的藥物；⑤甲狀腺各類抗體檢測異常。

臨床資料與分組：將符合納入標(biāo)準(zhǔn)的11～16歲健康青少年1 378 例，按不同年齡分為三組，組1：11～＜13 歲433 例；組2：13～＜15 歲425 例；組3：15～≤16 歲520 例。本研究已通過空軍軍醫(yī)大學(xué)第一附屬醫(yī)院（西京醫(yī)院）倫理委員會審核通過，所有研究對象均對本研究知情同意，已簽字確認(rèn)。

1.2 儀器與試劑 瑞士羅氏8000 全自動免疫發(fā)光流水線、配套試劑及校準(zhǔn)品；質(zhì)控品選用美國伯樂公司。

1.3 方法

1.3.1 標(biāo)本收集：采集研究對象清晨空腹靜脈血樣5ml，3 000r/min 離心15min，取血清。采用免疫發(fā)光法檢測TSH，F(xiàn)T4，F(xiàn)T3，TT4 和TT3，具體操作嚴(yán)格按儀器和試劑操作說明書進(jìn)行，所用試劑均在有效期內(nèi)，所用設(shè)備均經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)量控制。

1.3.2 驗證方法：另外收集2023年1～6月在空軍軍醫(yī)大學(xué)第一附屬醫(yī)院（西京醫(yī)院）門診11～16 歲健康青少年標(biāo)本，按照建立參考區(qū)間的納入標(biāo)準(zhǔn)。在每個年齡組各收集33 例標(biāo)本，三組共99 例標(biāo)本，檢測數(shù)據(jù)按照 WS/T402-2012《臨床實驗室檢驗項目參考區(qū)間的制定》[7]規(guī)定：驗證結(jié)果90%以上在建立的參考區(qū)間范圍內(nèi)， 表明建立參考范圍符合相關(guān)規(guī)定要求。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析 使用SPSS24.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析，正態(tài)分布的計量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）形式表示，非正態(tài)分布的計量數(shù)據(jù)以中位數(shù)（四分位區(qū)間）[M（P25，P75）]表示。正態(tài)分布計量資料的比較應(yīng)用t檢驗或單因素方差分析；非正態(tài)分布計量資料比較應(yīng)用兩因素 Wilcoxon 秩和檢驗或克魯斯卡爾-沃利斯檢驗(Kruskal-Wallis test)，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同性別青少年的甲狀腺功能指標(biāo)比較 見表1。對比分析不同性別青少年的甲狀腺功能，由于其甲狀腺功能指標(biāo)不符合正態(tài)分布，因此采用M（P25，P75）對其進(jìn)行描述，不同性別之間，TSH及TT4 比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（均P＞0.05），F(xiàn)T4，F(xiàn)T3，TT3 差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（均P＜0.05）。

表1 不同性別青少年的甲狀腺功能比較[M（P25，P75）]

2.2 不同年齡段青少年的甲狀腺功能比較 見表2。對比分析不同年齡段青少年的甲狀腺功能各項指標(biāo)間差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義（Z=10.649～261.003,均P＜0.05）。

表2 不同年齡段青少年的甲狀腺功能比較[M（P25，P75）]

2.3 建立不同性別、年齡段青少年甲狀腺功能參考范圍 見表3。根據(jù)不同性別及年齡段間甲狀腺功能指標(biāo)差異分析結(jié)果，建立西安地區(qū)11～16 歲青少年血清甲狀腺功能各項指標(biāo)參考范圍。

表3 不同年齡段青少年的甲狀腺功能參考范圍[M（P2.5，P97.5）]

2.4 參考范圍對比 見表4。將11～16 歲不同性別甲狀腺功能各項指標(biāo)與廠家提供數(shù)據(jù)及成人參考范圍對比可知，11～16 歲青少年TSH 及FT4 參考范圍上限值較廠家及成人數(shù)據(jù)更高，反之TT4 上限值參考范圍更低。

表4 試劑廠家提供數(shù)據(jù)與本研究西安地區(qū)參考范圍對比（P2.5，P97.5）

2.5 參考區(qū)間的驗證 將符合要求的99 例驗證標(biāo)本血清甲狀腺功能指標(biāo)與參考區(qū)間進(jìn)行比較，驗證標(biāo)本血清甲狀腺功能指標(biāo)均在所建立的參考區(qū)間范圍內(nèi)。

3 討論

青春期垂體、下丘腦分泌的多種激素都會對青少年甲狀腺產(chǎn)生特異性影響[8]，此外，人種、地域、生活習(xí)慣等多種因素也會影響甲狀腺功能的參考區(qū)間[9]。多年來我國甲狀腺檢驗項目參考區(qū)間的使用，主要引用檢驗試劑廠家提供的參考范圍。此類數(shù)據(jù)來源于歐洲地區(qū)人群，并不適用西安地區(qū)。

CAMPBELL 等[10]關(guān)于青少年甲狀腺功能的縱向研究結(jié)果表明，成人甲狀腺各項激素與青少年存在明顯差異。本次研究中的11～16 歲青少年TSH參考范圍與廠家及成人數(shù)據(jù)差距較大。TSH 與TT4之間存在復(fù)雜的非線性反比關(guān)系，TT4 水平的微小變化會導(dǎo)致TSH 分泌的巨大波動，使TSH 成為甲狀腺功能異常最敏感的標(biāo)志物[11-12]。若將參考廠家或成人參考范圍應(yīng)用于青少年的甲狀腺疾病診療，可能會增加甲狀腺功能障礙的誤診機(jī)率，出現(xiàn)不必要的終身替代治療。此外，本研究中青少年TT4 的參考范圍上限及下限均與廠家及成人數(shù)據(jù)存在差異，且該項指標(biāo)是作為甲狀腺疾病診療及藥物調(diào)整的重要依據(jù)。若繼續(xù)使用試劑廠家或成人的參考范圍進(jìn)行該年齡段甲狀腺疾病的診療，可能引起不良治療結(jié)局。

陳志輝等[13]在研究8～10 歲兒童甲狀腺功能參考范圍建立時認(rèn)為可以不按照性別分層確定參考范圍指標(biāo)。本次研究中11～16 歲男女青少年血清TSH，TT4 無統(tǒng)計學(xué)差異，但FT4，F(xiàn)T3，TT3 的分析結(jié)果提示男女上述指標(biāo)之間差異均有統(tǒng)計學(xué)意義，且男孩各項指標(biāo)的中位數(shù)均大于女孩。考慮本次研究納入的年齡段，男女均正在或者已經(jīng)進(jìn)入青春期，受不同激素波動影響，需進(jìn)一步分層確立參考范圍，為臨床治療提供數(shù)據(jù)支持。

本研究中不同年齡段甲狀腺功能各項指標(biāo)比較發(fā)現(xiàn)，三組年齡段各項指標(biāo)之間均存在差異性，且TSH 的參考范圍區(qū)間隨著年齡的增加而變窄。年齡13～＜15 歲的受試者中TT4 的參考范圍均較其他年齡段窄，考慮該年齡階段，為適應(yīng)身體和性功能發(fā)育，性激素、生長激素和其他相關(guān)激素的分泌均增加[14]，進(jìn)而影響甲狀腺功能。

總之，甲狀腺在人類全生命周期中均起到至關(guān)重要的作用[15-16]，對神經(jīng)認(rèn)知發(fā)育、生長、代謝的影響深遠(yuǎn)[17]，甚至與患者精神類疾病的發(fā)生有關(guān)[18]。不恰當(dāng)參考范圍的使用，導(dǎo)致甲狀腺功能長時間保持異常狀態(tài)，影響患者治療效果，造成不可逆的神經(jīng)、精神損害。因此建立不同地區(qū)不同年齡段甲狀腺功能的參考范圍，優(yōu)化青少年甲狀腺發(fā)育結(jié)果尤為重要。本研究中參考范圍的確立可作為解釋西安地區(qū)11～16 歲青少年血清甲狀腺功能相關(guān)激素的工具，為醫(yī)生臨床工作的診療提供支持。

本次研究存在一定局限性，了解青少年甲狀腺功能特征可適當(dāng)擴(kuò)大樣本年齡區(qū)間，收集更多健康人群；可進(jìn)行縱向研究，將同一健康個體不同年齡階段的甲狀腺功能數(shù)據(jù)收集，并進(jìn)行相關(guān)性分析。