宮頸癌組織中LncRNA CCAT2表達及其意義

彭 燦 南華大學附屬第二醫院婦科,湖南省衡陽市 421001

宮頸癌作為臨床常見的一種惡性腫瘤,其發病率僅次于乳腺癌位居女性惡性腫瘤的第2位,對女性生命健康造成了嚴重威脅[1]。隨著現代醫學的發展和進步,宮頸癌的臨床治療方案已經從單一的手術治療逐漸發展成為綜合性的治療方式,主要以傳統治療與新型輔助治療相結合,但患者臨床預后狀況仍無明顯改善,患者病死率仍居高不下[2]。因此,尋求宮頸癌疾病發生發展的相關分子機制,尋找有效的治療靶點,對于改善患者臨床預后具有著重要價值。長鏈非編碼RNA(LncRNA)是一類長度在200nt以上的非編碼RNA,雖然LncRNA不具備編碼蛋白質的能力,但其可通過轉錄以及轉錄后、表觀遺傳等多種途徑調控基因表達,且越來越多的研究發現,LncRNA在腫瘤發生發展過程中發揮著重要的調控作用[3]。本文探討分析宮頸癌組織中LncRNA CCAT2表達及其意義,現報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2017年3月—2020年3月我院收治的宮頸癌患者86例作為觀察對象,患者年齡32～70歲,平均年齡(49.47±11.20)歲。取術中留存宮頸癌組織標本及距腫瘤組織邊緣5cm以上的癌旁正常組織。本研究經我院倫理委員會批準。

1.2 選擇標準 (1)納入標準:①經病理科檢查確診為原發性宮頸癌;②患者均經手術治療;③患者臨床資料完整,且組織標本保存完整;④患者術前均未接受放療、化療等其他抗腫瘤治療方案。(2)排除標準:①合并其他原發性腫瘤患者;②合并嚴重免疫系統疾病患者;③合并嚴重心、肝、腎等器官疾病患者;④妊娠期及哺乳期女性。

1.3 LncRNA CCAT2表達 術中獲取的宮頸癌組織及癌旁正常組織標本置于液氮中保存,根據Trizol試劑(美國Invitrogen)提取總RNA,使用分光光度儀對提取總RNA質量和濃度進行測定,測定結果合格后,將其置于-80℃冰箱內保存。按照逆轉錄試劑盒說明書將RNA逆轉錄為cDNA,然后將cDNA保存于-20℃保存。采用qRT-PCR反應檢測,反應體系20μl,根據目的基因設計上下游引物,引物序列:LncRNA CCAT2上游引物:5’-CCCTGGTCAAATTGCTAAAC CT-3’,下游引物:5’-TTATTCGTCCTGTTTTATGGAT-3’;GADPH上游引物:5’-TGATGACATCAAGAAGGTGGTGAAG-3’,下游引物:5’-TCCTTGGAGGCCCAGTGGGCCAT-3’。反應條件:95℃ 30s;95℃ 15s、60℃ 30s,共完成35個循環,以GADPH作為內參基因,采用2-ΔΔCt法計算目的基因相對表達量。

1.4 生存預后 以患者術后出院作為起始日期,利用門診資料、電話、微信、郵件等多種方式進行隨訪,隨訪截止日期為2023年1月31日,隨訪終點事件為患者死亡,記錄患者總體生存期。

1.5 統計學方法 采用統計學軟件SPSS25.0進行數據處理分析,計量資料比較采用t檢驗,計數資料比較采用χ2檢驗,生存分析繪制Kaplan-Meier生存曲線,生存情況比較采用Log-rank檢驗,以P<0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 宮頸癌組織及癌旁組織LncRNA CCAT2表達比較 宮頸癌組織中LncRNA CCAT2相對表達量為1.835±0.316,顯著高于癌旁組織的0.972±0.225(t=20.631,P=0.000<0.05)。

2.2 宮頸癌組織LncRNA CCAT2表達與患者臨床病理參數的關系 FIGO分期Ⅲ～Ⅳ期患者宮頸癌組織LncRNA CCAT2相對表達量顯著高于FIGO分期Ⅰ～Ⅱ期(P<0.05),低分化患者宮頸癌組織LncRNA CCAT2相對表達量顯著高于中高分化患者(P<0.05),有淋巴結轉移患者宮頸癌組織LncRNA CCAT2相對表達量顯著高于無淋巴結轉移患者(P<0.05),而患者年齡、最大腫瘤直徑、病理類型與LncRNA CCAT2表達無關(P>0.05),見表1。

表1 宮頸癌組織LncRNA CCAT2表達與患者臨床病理參數的關系

2.3 宮頸癌組織LncRNA CCAT2表達與患者預后的關系 以患者宮頸癌組織中LncRNA CCAT2相對表達量平均值1.835作為臨界值,將LncRNA CCAT2相對表達量≥1.835患者作為高表達組(n=43)、LncRNA CCAT2相對表達量<1.835患者作為低表達組(n=43)。低表達組患者生存預后顯著優于高表達組(P<0.05),見圖1。

3 討論

由于宮頸癌患者早期臨床癥狀不明顯,容易被忽視,目前對于宮頸癌的早期篩查手段,主要包括細胞學檢查以及HPV檢測[4]。隨著基因芯片技術的不斷發展和進步,宮頸癌的發病機制成為了越來越多學者共同關注的焦點,近年來,多項研究顯示,宮頸癌組織中LncRNA表達水平與宮頸癌疾病發生、侵襲以及患者臨床預后均具有密切的聯系[5-6]。LncRNA作為一種無完整開放閱讀框的RNA,是非編碼RNA家族中的重要成員之一,并無蛋白質編碼功能。但隨著目前研究的不斷深入,越來越多的研究報道顯示,LncRNA在多種腫瘤進展過程中發揮著重要的調控作用,包括參與染色質的修飾、轉錄激活以及核內運輸等復雜生物學功能,此外,LncRNA在轉錄調控、表觀遺傳調控等生物學過程中可引起基因表達水平的改變,而這一系列生物學行為在生命體生長、發育以及增殖等方面具有重要作用[7-8]。

LncRNA CCAT2最初被發現在結直腸癌組織中高表達,位于染色體8q 24.21上,已被多項研究證實其表達升高與多種惡性腫瘤的風險增加有關[9]。LncRNA CCAT2作為一種潛在的新型惡性腫瘤標志物,其表達增加促進了蛋白質合成以及核糖體生物發生相關基因的表達,直接與增殖阻斷蛋白1(BOP1)核糖體生物發生因子之間相互作用,而BOP1可通過增加染色體分離的極光激酶B的活性促進染色體不穩定以及癌癥的發生,同時增加對奧沙利鉑以及5-氟尿嘧啶等化療藥物的耐藥性[10]。為了進一步明確LncRNA CCAT2與宮頸癌之間的關系,本文探討分析宮頸癌組織中LncRNA CCAT2表達及其意義。

本文結果顯示,宮頸癌組織中LncRNA CCAT2相對表達量顯著高于癌旁組織,同時其表達水平與患者臨床分期、組織分化程度以及淋巴結轉移有關。與相關研究報道結果相似[11],表明在宮頸癌中,存在LncRNA CCAT2的異常高表達,且LncRNA CCAT2參與了宮頸癌疾病進展過程,與腫瘤的惡性程度有關。此外,通過生存分析結果顯示,LncRNA CCAT2低表達組患者生存預后顯著優于高表達組,LncRNA CCAT2有望成為宮頸癌潛在的生物治療靶點及預后預測分子標志。但關于LncRNA CCAT2對宮頸癌的具體調控機制仍不清楚,提示后續還需要進一步深入的研究分析。

綜上所述,LncRNA CCAT2在宮頸癌組織中呈高表達,且其表達水平與腫瘤FIGO分期、腫瘤組織分化程度、淋巴結轉移以及患者臨床預后有關,LncRNA CCAT2有望成為宮頸癌早期診斷和治療、預后預測的潛在生物學標志物,值得進一步深入研究分析。