中藥復方制劑對雞腺胃炎的治療效果評價及機制研究

韓振興，任慶賢，孫書旺，牛紅日，鐵小東

（石家莊牧安生物科技有限公司，河北石家莊 050000）

1 前言

近年來，雞腺胃炎在我國多個地區流行，給養雞業造成嚴重損失。發生腺胃炎的雞只癥狀為采食量減少，生長發育緩慢，糞便中有未消化的飼料等，剖檢可見腺胃腫脹，嚴重時腺胃漿膜出現白色壞死，胃壁增厚，腺胃乳頭腫脹出血，腺胃黏膜呈現糜爛性潰瘍等。多種因素可以導致雞腺胃炎，主要包括非傳染性因素和傳染性因素，前者主要包括霉菌毒素致病、生物胺致病、硫酸銅致病和飼養環境應激導致的發病等因素；后者則包括傳染性支氣管炎病毒、禽網狀內皮增殖癥病毒、圓圈病毒III 型等，此外還包括與雞腺胃炎密切相關的沙門氏菌、大腸桿菌和梭狀芽孢桿菌等。

針對雞腺胃炎通常采用抗病毒藥物與阿莫西林、青霉素等抗微生物藥物聯合用藥的治療方案。然而，抗微生物藥物的使用容易導致細菌耐藥性的產生，給動物疾病治療以及公共衛生造成威脅。傳統中藥具有天然性、功能多樣性以及經濟環保等優勢，研究表明，某些中藥復方對可改善腺胃炎雞只的肌胃、腺胃的形態，提高了血清中的免疫球蛋白的含量，還能提高肉雞生產性能等；使用板清顆粒等藥物對腺胃炎具有一定的治療效果。以上研究提示，中藥可成為治療雞腺胃炎的潛在治療方案。

本研究采用脂多糖作為刺激物構建雞腺胃炎模型，評價中藥復方對雞腺胃炎的治療效果，篩選具有良好治療效果的中藥組方，為雞腺胃炎的防治提供理論依據。

2 試驗方法

2.1 中藥組方藥液的制備

中藥組方包括半夏、大黃、龍膽、木香、枳實等五味中藥。將上述中藥采用水提法工藝制備提取液，按照比例稱取定量的中藥，加入蒸餾水浸泡煎煮2 次。第一次加入8 倍量蒸餾水浸泡1小時后，煎煮1 小時，濾過保留濾渣；第二次向濾渣中加入6 倍量的蒸餾水，煎煮0.5 小時，過濾去除濾渣。合并兩次濾液后，使用旋轉蒸發儀將藥液濃縮至1 克/毫升。

2.2 雞腺胃炎模型的建立

本研究采用100 只1 日齡海蘭褐雛雞作為試驗對象，購買于北京梅里亞維通實驗動物技術有限公司，試驗過程中，SPF 雛雞的飼養管理嚴格按照實驗動物用途與福利指南進行。

100 只健康海蘭褐雞飼養至5 日齡，隨機分為5 個試驗組，每組20 只，分別為空白對照組、模型組（5 微克/只LPS）、低劑量組（5 微克/只LPS+1 毫升/千克中藥復方制劑）、中劑量組（5 微克/只LPS+4 毫升/千克中藥復方制劑）和高劑量組（5 微克/只LPS+8 毫升/千克中藥復方制劑）。連續給藥5 天采用灌胃給予中藥復方制劑，停藥觀察5 天，將雞進行安樂死并收集腺胃等組織并檢測相關指標。

2.3 雞采食量和體重的測定

觀察并記錄雞只的采食量和體重等指標，分別在1、5、10 和15 日齡每組隨機取5 只雞空腹12 小時后稱重，并記錄日供料量和剩余料量。

2.4 腺胃指數和肌胃指數的測定

試驗結束后取雞的肌胃和腺胃，計算臟器系數。計算公式：臟器系數（%）=臟器質量（克）/體重（克）。

2.5 腺胃中前列腺素E2（PGE2）的檢測

定量稱取腺胃組織，制備10%組織勻漿，離心取上清液，根據說明書采用PGE2 測試盒（南京建成生物工程研究所，南京） 測定腺胃中的PGE2，酶標儀測定OD450nm 值。

2.6 腺胃中總超氧化物歧化酶（SOD）檢測

定量稱取腺胃組織，制備10%組織勻漿，離心取上清液，根據說明書采用SOD 測試盒（南京建成生物工程研究所，南京） 測定腺胃中的SOD，酶標儀測定OD450nm 值。

2.7 試驗數據分析

使用GraphPad Prism 5.0 軟件進行數據處理和分析，P＜0.05 作為在統計學上具有顯著性差異的標準。

3 結果

3.1 采食量和體重測定結果

給予LPS 刺激物1 天后，空白對照組的雞只糞便排泄正常，呈現顆粒狀，模型組的雞只出現拉稀現象。

各試驗組的雞只生產性能表現出差異。試驗第5 天，各組的增重沒有明顯差異。試驗的第10 天空白對照組、模型組、低劑量組、中劑量組和高劑量組的平均日增重分別為6.6 克、2.05克、2.98 克、4.38 克和5.45 克，中藥低劑量組、中藥劑量組和中藥高劑量組的日增重顯著高于模型組 （P＜0.05）； 料肉比分別為2.3、5.04、3.79、2.95 和2.62，中藥低劑量組、中藥劑量組和中藥高劑量組的料肉比顯著低于模型組（P＜0.05）。試驗的第15 天呈現相似的結果。

3.2 腺胃指數和肌胃指數的測定結果

停藥5 天后，將雞只處死后摘取腺胃和肌胃，計算不同組別的腺胃指數和肌胃指數。模型組的腺胃指數較空白對照組顯著增大（0.81vs0.684，P＜0.01），同時，使用低劑量、中劑量和高劑量的中藥復方治療后腺胃指數分別為0.78、0.74 和0.72，與模型組相比較顯著降低（P＜0.05），并隨著劑量的增加腺胃指數減小。同時，肌胃指數也呈現相同的趨勢。

3.3 雞腺胃組織中的PGE2 水平測定結果

試驗雞只停藥5 天后，模型組的腺胃組織中的PGE2 水平較空白對照組顯著下降（P＜0.01），同時，使用低劑量中藥復方、中劑量中藥復方和高劑量中藥復方治療的各組雞只腺胃組織中的PGE2 不斷上升，分別為119.37±16.37 皮克/毫升、127.58±27.68 皮克/毫升和138.9±29.42 皮克/毫升。

3.4 雞腺胃組織中SOD 活性測定結果

停藥5 天后，模型組雞只的腺胃組織中SOD 活性（218.59±14.57 U/mgprot）較空白對照組（406.34±21.72 U/mgprot）顯著降低（P＜0.01），同時，給予低劑量中藥復方、中劑量中藥復方和高劑量中藥復方治療組的腺胃組織中SOD 活性分別為301.83±29.48 U/mgprot、321.55±24.16 U/mgprot 和358.16±26.41 U/mgprot，較模型組顯著增加，且腺胃組織中SOD 活性隨著中藥復方制劑給藥量的增加而增加。

4 討論

雞腺胃炎是一種常見的傳染性疾病，給家禽養殖業造成嚴重威脅。腺胃是雞體內重要的消化器官，能夠分泌胃酸和胃蛋白酶，對食物中的蛋白質類物質的分解具有重要意義。當發生腺胃炎時，胃酸和胃蛋白酶的分泌受到影響，影響飼料消化及營養物質吸收，造成雞群出現生長發育不良、飼料消化不良等疾病。

本試驗采用半夏、大黃、龍膽、木香、枳實等五味中藥進行組方，測定中藥組方對LPS 誘導的雞腺胃炎的治療效果。半夏具有調節胃腸、化淤消滯和溫胃利膽的作用，用于胃部疾病和痰熱導致的胃脘部脹痛以及胃潰瘍等。龍膽具有保肝、健胃和抗菌消炎的作用，主要用于治療炎癥、消化不良和胃部感染等。大黃能夠促進胃腸蠕動，增加胃腸部黏膜的血液循環利于胃炎及胃潰瘍的恢復。木香在抗炎、抗潰瘍和減輕胃腸道平滑肌痙攣等方面發揮重要的作用，研究表明，木香可以調節和改善胃蛋白酶的分泌和活性，達到保護胃黏膜的作用。枳實是一味性溫味辛的重要，具有消積導滯、化瘀散痞的功效，研究表明，枳實具有殺滅幽門螺旋桿菌的作用，進而改善胃腸道功能。

在本研究中，用LPS 處理雞只后，腺胃腫大，腺胃指數顯著增加，說明經LPS 刺激后雞的腺胃受到損傷，發生腺胃炎。此外，模型組的腺胃組織中PGE2 和SOD 水平顯著降低，說明腺胃炎的發生可能跟氧化應激相關。這與王酉馨的研究結果一致，因此，在治療雞腺胃炎時需要考慮消除氧化應激的因素，以便提高治療雞腺胃炎的效果。使用中藥復方制劑治療后，治療組的臨床癥狀和相關指標較模型組明顯緩解，表明中藥復方制劑對LPS 誘導的雞腺胃炎具有治療作用，并且隨著中藥復方制劑用量的增加而呈現出治療效果增強的現象。此外，中藥復方制劑組雞只腺胃組織中的PGE2 和SOD 的水平和活性升高，表明中藥復方制劑通過抗氧化活性進而發揮對胃損傷的保護作用。