白 娜,王曉梅,張 婷,黃 萱,史 微
(云南省滇南中心醫(yī)院/紅河州第一人民醫(yī)院檢驗科,云南 蒙自 661100)
人類偏肺病毒(human metapneumo virus,hMPV)是一種與兒童呼吸道感染有關(guān)的病毒,由荷蘭學(xué)者 Van den Hoogen 等[1]于2001年首次在呼吸道感染住院兒童的鼻咽部分泌物標(biāo)本中發(fā)現(xiàn)。hMPV是一種反義單鏈RNA病毒,屬于新病毒科肺炎病毒亞科[2]。hMPV是一種常見的呼吸道致病病原體,在兒童、老年人和免疫抑制人群中發(fā)病率較高[2,3]。該病毒與上呼吸道和下呼吸道感染有關(guān),并可能引發(fā)哮喘。hMPV感染呈全球性分布,世界各地檢出率不盡相同,且感染的流行具有一定的季節(jié)性,澳大利亞的檢出高峰在6月份[4],巴西hMPV感染的檢出時間為3月~11月[5],北京hMPV檢測陽性率高峰分別為11月和2月[6],由于地區(qū)、季節(jié)、氣候的不同,hMVP的流行情況也不相同。本研究以多重逆轉(zhuǎn)錄PCR(reverse transcription PCR,RT-PCR)與毛細(xì)電泳聯(lián)用技術(shù)檢測2020-2022年因呼吸道感染到本院就診患者的hMPV病毒,以了解紅河州hMPV感染的流行特征及檢出率與氣候的關(guān)系,為紅河州地區(qū)防控hMPV感染提供理論依據(jù),現(xiàn)報道如下。
選取2020年4月-2022年12月31日紅河州第一人民醫(yī)院門診和住院患者因呼吸道感染而送檢的12924份咽拭子標(biāo)本進(jìn)行hMPV病毒檢測。其中男性7668 例(59%),女性5256 例(41%);男女比例為1.41:1。兒童(13歲以內(nèi))9673 例(75%),中青年 1156例(8.8%),50歲以上老年人2095 例(16.2%),本研究患者知情同意。
氣象資料包括月平均溫度(℃),查當(dāng)?shù)貧庀缶止倬W(wǎng)得知。
采用多重RT-PCR與毛細(xì)電泳聯(lián)用技術(shù),以常見的13種呼吸道病原體的高度保守序列為靶區(qū)域,設(shè)計了13組特異性引物,在一個擴(kuò)增管中進(jìn)行一步法PT-PCR擴(kuò)增;采用毛細(xì)電泳分離不同長度的擴(kuò)增產(chǎn)物、得到病原體的檢測結(jié)果;通過同時對樣品中的人RNA和人DNA進(jìn)行檢測,對樣品質(zhì)量進(jìn)行監(jiān)控。核酸提取試劑使用“核酸提取或純化試劑”(某公司),在全自動核酸提取儀Smart LabAssist/Smart LabAssist-32上進(jìn)行核酸自動提取;或者使用“核酸提取或純化試劑”(某公司)進(jìn)行手動提取。
12924病例中,病毒陽性檢出545例,陽性率為4.22%;其中男性291例(53.4%),女性254例(46.6%),男女比例1:1.15;陽性檢出中兒童占97.43%(531/545),2.02%(11/545)為50歲以上老年人,0.55%(3/545)為中青年,見表1。hMPV 2020年、2021年、2022年的檢出率分別為1.68%、4.23%、5.36%。2020年4月到2022年每月檢出情況,見圖1,每年從10月檢出率呈上升趨勢,2月出現(xiàn)下降趨勢。

圖1 2020-2022年不同月份hMPV陽性檢出情況

表1 不同年齡段hMPV陽性檢出率[n(%)]
春、夏、秋、冬的檢出率分別為1.06%、1.33%、 4.93%、8.51%。季檢出率總體比較卡方值為286.512,P<0.001,hMPV檢出率季節(jié)間差異有統(tǒng)計學(xué)意義,秋、冬兩季分別高于春、夏兩季,而春季與夏季檢出率比較無統(tǒng)計學(xué)意義,見表2。

表2 各季節(jié)hMPV檢出率的比較
紅河州屬于亞熱帶季風(fēng)氣候類型,2020年-2022年1月到12月平均溫度分別15℃、17℃、21℃、24℃、26℃、27℃、26℃、26℃、25℃、22℃、20℃,2020年-2022年各月平均hMPV的檢出率分別為10.99%、5.45%、2.24%、0.58%、0.54%、0.74%、1.91%、1.01%、1.64%、2.90%、7.68%、6.32%。Spearman統(tǒng)計分析發(fā)現(xiàn)月hMPV檢出率與月平均溫度(rs=-0.847,P=0.001)相關(guān),差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

hMPV感染的發(fā)病具有年齡特點,hMPV感染在兒童中發(fā)生頻率較高。hMPV主要感染5歲以下的兒童和老年人[7-9],且冬季為季節(jié)性高峰[10-12]。在本研究中,陽性檢出中兒童所占比率高達(dá)97.43%,而剩余0.5%的陽性檢出均為老年人(50歲以上)。兒童與老年人(50歲以上)比其他年齡段的人群更易感染hMPV。根據(jù)此次研究,發(fā)現(xiàn)紅河州hMPV感染高峰在秋冬兩季,其中11月、12月和1月感染率較高。與其他地區(qū)分析結(jié)果有差異[7,13-15]。本文還對氣象因素月平均溫度對hMPV感染率的影響進(jìn)行了分析。hMPV活動受溫度變化影響。以往在其他地區(qū)的研究表明,低溫是hMPV季節(jié)性的主要驅(qū)動因素[16-19]。根據(jù)本文的分析結(jié)果,得出溫度變化與hMPV流行相關(guān)。由于紅河州氣候具有季節(jié)溫差特征,秋季末及冬季溫度相對偏低(平均溫度15~22℃),hMPV在此時段易發(fā)生感染。然而,hMPV亞型在適應(yīng)氣象條件方面的這些差異的起源尚不清楚,應(yīng)進(jìn)一步研究hMPV亞型的傳播能力與氣候因素之間的聯(lián)系。分析還表明,hMPV感染的發(fā)生具有季節(jié)性節(jié)律,并與氣候因素溫度有關(guān),此外,每種hMPV基因型對某些氣象條件具有不同的親和力[20,21],應(yīng)該對hMPV的基因型進(jìn)行研究,以促進(jìn)hMPV傳播的氣候因素的研究。
本研究仍存在局限性。首先,本文的研究局限性在于所有數(shù)據(jù)都來自一家醫(yī)院,存在選擇偏倚。其次,由于兒童呼吸道發(fā)病率高于成人,此研究納入的陽性人群更偏向兒科患者。最后,由于無法獲得更多的氣候因素的準(zhǔn)確信息(例如月平均濕度、風(fēng)速、日照時間等)故沒有對其進(jìn)行更多的分析。因此,應(yīng)該進(jìn)行進(jìn)一步的長期前瞻性監(jiān)測,以解決目前的局限性,并提供有關(guān)hMPV感染的更多信息結(jié)果。
總之,該研究發(fā)現(xiàn)hMPV在紅河州地區(qū)流行特征為:兒童(13歲以內(nèi))發(fā)病率較高,hMPV發(fā)病率表現(xiàn)為10月開始呈上升趨勢,次年2月之后呈現(xiàn)下降趨勢,秋季、冬季檢出率較高,且與溫度相關(guān)。這將為紅河州地區(qū)對hMPV的防控提供參考。