原子發射光譜法（ICP-OES）測定10 批血竭的無機元素含量

方奕孚 梁曉欣 王如意 李錦添 鄒鎮健

（1廣東藥科大學附屬第一醫院藥學部，廣東 廣州 510000；2廣東食品藥品職業學院實驗實訓中心，廣東 廣州 510000）

血竭又名麒麟血竭，由棕櫚科植物麒麟竭（Daemonorops dracoBl.）果實或樹干分泌出的紫紅色樹脂加工制成，主產自馬來西亞、印度尼西亞等地。血竭的主要化學成分是血竭素、血竭紅素和去甲血竭素等，具有活血止痛，化瘀止血，生肌斂瘡等功效，臨床上主要應用于跌打損傷、心腹瘀痛、外傷出血和瘡瘍不斂等的治療[1-3]。

中藥材藥效的發揮除了與其有機成分有關，還與其含有的無機元素密切相關[4-6]。中藥的活血化瘀功效大多與藥材中鐵（Fe）、銅（Cu）、鋅（Zn）、鎂（Mg）、鈣（Ca）、鍶（Sr）、鉀（K）、鉛（Pb）、鎘（Cd）和鉻（Cr）等無機元素的分布及相互作用有關，分析上述元素在血竭中的分布情況對血竭的藥用研究具有重要意義[7-9]。近幾年對血竭的研究主要集中在化學成分、有機物含量測定和藥理藥效等方面，對血竭中無機元素的分析報道較少。

因血竭（麒麟竭）多為進口中藥材，按照藥用植物進出口標準[10]和2020 版的《中國藥典》[11]的品質檢驗要求，其中的Pb、Hg、Cd、Cu 和As 為重金屬元素，在中藥材中的含量有限量指導值。

常用的微量元素檢測方法包括電感耦合等離子體質譜法（ICP-MS）、電感耦合等離子體發射光譜法（ICP-OES）、原子吸收光譜法（AA）和離子色譜法（IC）等[12-15]。本研究通過微波消解法消化血竭樣品，建立并驗證電感耦合等離子體發射光譜法（ICPOES），測定血竭中的20種無機元素含量，并通過該方法檢測和分析10個批次血竭中無機元素的含量，為血竭的藥效研究提供參考。

1 材料與方法

1.1 供試材料

1.1.1 主要儀器JUPITER 型微波消解儀（上海新儀微波化學科技有限公司）；Optima 7000DV 型電感耦合等離子發射光譜儀（Perkin-Elmer 公司）；UPHW-IV-90T 型超純水機（四川優普超純科技有限公司）；BSA224S-CW型電子天平（Sartorius公司）；HW-500ASB型遠紅外干燥箱（上海印溪儀器儀表有限公司）；DFY-200 型高速萬能粉碎機（上海新諾儀器設備有限公司）。

1.1.2 主要材料混合元素標準儲備液（100 μg/mL，20種元素，批號：19DB189，國家有色金屬及電子材料分析測試中心）；氬氣（99.999%，廣州市廣氣氣體有限公司）；超純水（實驗室自制，電導率≤0.055 μS/cm）；硝酸（GR，廣州試劑廠）；30%雙氧水（AR，廣州試劑廠）。10批血竭樣品由廣州君元藥業有限公司和佛山芊草堂貿易有限公司從印度尼西亞進口，經廣東省中藥研究所鑒定均為棕櫚科植物麒麟竭果實的分泌產物。

1.2 試驗方法

1.2.1 血竭樣品前處理樣品收集后，用高速粉碎機分別粉碎，過60目篩，置60 ℃烘箱中烘干至恒重，置于干燥器皿中保存，備用。

1.2.2 血竭樣品的消解取血竭樣品約0.25 g，精密稱定，置于聚四氟乙烯消解罐中，加入硝酸5 mL，輕搖勻，浸泡過夜，再加入30%過氧化氫2 mL，輕搖勻，放置1 h，裝入微波消解儀進行微波消解。設定先固定消解功率，逐步提高消解壓力，再降低消解功率，繼續升高消解功率的微波消解程序，具體過程見表1。

表1 血竭樣品消解程序

血竭樣品消化至消解罐中消解液澄清后，冷卻，取出。將樣品消解液分別轉移至25 mL 容量瓶中，用超純水稀釋、定容，用作樣品中低含量元素的檢測；從上述溶液中精密移取0.5 mL，置于25 mL容量瓶中，用5%硝酸溶液稀釋、定容，用作樣品中高含量元素（Ca、K、Mg、Mn、Al和Fe）的檢測。

1.2.3 混合標準系列溶液的制備精密移取20種元素混合標準溶液儲備液適量至適當的容量瓶內，加入5%硝酸溶液稀釋成20種元素的系列標準溶液，具體質量濃度為0.020 0、0.050 0、0.100 0、0.200 0、0.500 0、1.000 0、2.000 0和5.000 0 μg/mL。

1.2.4 儀器工作參數氣體種類，高純氬氣；霧化氣流量，0.8 L/min；霧化器壓力，315 KPa；輔助氣流量，0.2 L/min；載氣量15 L/min；發射頻率，1 300 W；觀測方式，軸向；進樣方式，連續進樣；蠕動泵流速，0.8 mL/min。20種無機元素測定選用的分析波長如表2所示。

表2 分析波長及線性關系

1.3 測定項目及分析方法

1.3.1 線性關系及相關系數取20種元素混合標準系列溶液，按要求進樣，測定發射強度，根據樣品中各元素實際含量的高低選擇合適濃度x，與發射強度y作線性回歸分析，得各元素的標準曲線、線性相關系數和線性范圍（表2）。在相應的線性范圍內，20種無機元素的相關系數R2均不低于0.999 3，表明各元素質量濃度和發射強度之間的線性關系良好。

1.3.2 檢測限取空白溶液，按要求連續進樣，重復測定11 次，計算11 次測得質量濃度的標準偏差，取其3倍作為各元素的儀器檢測限，各元素檢測限具體結果見表3所示，可見各元素的檢測限均較低。

表3 檢測限

1.3.3 精密度取濃度為0.100 0 μg/mL 的混合標準溶液連續進樣，平行測定6 次，測得各元素的發射強度，計算得出各元素發射強度的相對標準偏差（RSD）為0.8%～4.5%，平均值為2.2%（表4）。結果表明，上述儀器條件下測定，儀器的精密度良好。

表4 精密度

1.3.4 重復性取同一批次的血竭樣品粉末6份，每份0.25 g，精密稱定，重復消解及發射強度的測定過程，并用表2 中的線性關系計算樣品中各元素的含量和各元素含量的RSD 為1.2%～5.8%，平均值為3.0%（表5）。結果表明，本方法測定血竭樣品中20種元素含量的重復性良好。

表5 重復性（n=6）

1.3.5 加標回收取同一批次的樣品粉末，對該樣品中20 種元素分別做加標回收實驗，加標6 份。重復消解及發射強度的測定過程，計算各元素的加標回收率，具體結果如表6所示，各元素的加標回收率為92.0%～110.0%，平均回收率為100.5%，表明該分析方法準確、可靠。

表6 加標回收率（n=6）

2 結果與分析

對收集到的10批血竭樣品進行測定，帶入對應的線性關系公式中，計算樣品中各元素的含量，每批次樣品做3個平行樣，取其平均值為最終的含量，結果如表7所示。

表7 10批血竭中無機元素的含量（n=3） 單位：（mg/kg）

由表7可見，10批次血竭樣品中，檢測出重金屬元素Pb 的樣品有1 批，含量為0.038 mg/kg；檢出Cd的樣品有4 批，含量為0.001～0.003 mg/kg；所有樣品均未檢出As；所有樣品均檢出銅Cu，其含量范圍為0.008～0.069 mg/kg。

與血竭活血化瘀藥效相關的無機元素中，Fe的含量范圍為0.523～31.872 mg/kg；Cu 的含量范圍為0.008～0.069 mg/kg；Zn 的含量范圍為0.073～0.356 mg/kg；Mg 的含量范圍為0.911～5.476 mg/kg；Ca 的含量范圍為7.146～22.418 mg/kg；Sr 的含量范圍為0.022～0.116 mg/kg；K 的含量范圍為3.979～23.315 mg/kg；Pb 的含量范圍為0～0.038 mg/kg；Cd的含量范圍為0～0.003 mg/kg；Cr 的含量范圍為0.001～0.021 mg/kg。上述元素中，不同批次樣品中Fe的含量差距懸殊，這可能與個別樣品被摻雜鐵銹以增加樣品的色澤度有關，具體情況有待進一步研究確認。其他元素的批次間含量差異不大，表明各批次血竭樣品中與活血化瘀藥效相關的元素含量比較均勻。

其他元素中（表7），Al 的含量范圍為0.536～1.970 mg/kg；Ba 的含量范圍為0.013～0.035 mg/kg；Co的含量范圍為0.001～0.002 mg/kg；Li的含量范圍為0～0.001 mg/kg；Mn的含量范圍為0.476～3.271 mg/kg；Na的含量范圍為0.402～2.175 mg/kg；Ni的含量范圍為0.001～0.014 mg/kg；Se的含量范圍為0～0.003 mg/kg；均未檢出Bi。這些元素的批次間含量差異不大，表明各批次血竭樣品中其他元素的含量比較均勻。

3 結論與討論

對于樣品中含量較高的元素（Ca、K、Mg、Mn、Al和Fe），上機測定時應選用靈敏度較低的分析波長，以避免出現測試分析發射強度時出現檢測器飽和的現象，對于其他微量元素則優先選用靈敏度高的分析波長。

根據現行藥用植物及制劑進出口綠色行業標準以及2020版《中國藥典》[10-11]的限量規定，重金屬元素鉛（Pb）含量≤5 mg/kg、鎘（Cd）含量≤1 mg/kg、砷（As）含量≤2 mg/kg、銅（Cu）含量≤20 mg/kg。本研究結果發現，10批血竭樣品中相關各元素含量均低于國家標準和行業標準，符合中藥材中重金屬的限量規定。與血竭活血化瘀藥效有相關性的無機元素方面，各批次間含量差異不大。

本研究從微量元素分析角度，建立了同時檢測血竭中20種無機元素的方法，探討了10批次血竭樣品中重金屬元素、活血化瘀藥效相關的無機元素的分布規律，為血竭的藥效研究和臨床使用提供了一定的參考，但血竭各元素與藥效的相互關系，有待進一步研究。