蜘蛛網八角金盤組培快繁技術研究

朱志勇

摘要要：【目的】為探究蜘蛛網八角金盤組培快繁技術?！痉椒ā恳灾┲刖W八角金盤的帶芽莖段為外植體進行組培快繁研究?！窘Y果】在MS + 3.0 mg/L 6-BA + 0.1 mg/L NAA培養基中培養10 d后，誘導出幼芽；1/2 MS + 1.5 mg/L 6-BA + 0.2 mg/L NAA培養基對叢生芽的增殖效果最好，增殖系數達3.56；生根培養基以MS + 0.1 mg/L NAA + 3.0 mg/L IBA為最佳，生根率可達96.30%；移栽基質為40%椰糠+60%泥炭土的組合最佳，成活率達到96.42%?！窘Y論】蜘蛛網八角金盤組培快繁技術可快速獲得大量株型整齊、性狀優良的植株，應用于產業化生產。

關鍵詞：蜘蛛網八角金盤；組織培養；快速繁殖

中圖分類號：S682.36 ? ? ? ? ? ? ? ? ? 文獻標識碼：A ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?文章編號：2095-5774（2023）04-0276-05

Study on Tissue Culture and Rapid Propagation of Fatsia japonica ‘Spider's Web

Zhu Zhiyong

（Meizhou Island Municipal Landscape Management Office，Putian，Fujian 351154，China；

Quanzhou Quanmei Biotechnology Co.，Ltd，Quanzhou，Fujian 362012，China）

Abstract：【Objective】In order to study tissue culture and rapid propagation of Fatsia japonica ‘Spider's Web. 【Method】Stems with buds of Fatsia japonica ‘Spider's Web were used as explants to study tissue culture and rapid propagation. 【Result】 The young buds could be induced after 10 days cultured on the medium MS + 3.0 mg/L 6-BA + 0.1 mg/L NAA. The medium 1/2 MS + 1.5 mg/L 6-BA + 0.2 mg/L NAA was the best for multiplication culture of clumpy buds and the multiplication coefficient was 3.56. The medium MS + 0.1 mg/L NAA + 3.0 mg/L IBA was the best for inducing roots from shoots and the rootage ratio was above 96.30%. The seedlings were transplanted to substrate combination of 40% coconut bran and 60% peat soil， whose survival rates were highest， reaching 96.42%.【Conclusion】 Tissue culture and rapid propagation techniques of Fatsia japonica ‘Spider's Web could rapidly obtain a large number of plants with neat plant types and excellent traits and could be applied in industrial production.

Key words：Fatsia japonica‘Spider's Web；Tissue culture；Rapid propagation

八角金盤屬于龍五加科八角金盤屬的常綠灌木或小喬木，葉形優美，濃綠光亮，是深受歡迎的室內外觀葉植物［1］。蜘蛛網八角金盤耐陰性強，顏色亮麗，在園林景觀配置和室內盆栽觀賞等方面有較多應用，市場需求量大。八角金盤主要采用播種［2］、扦插［3］等方式繁殖，繁殖系數和成活率都很低，無法滿足市場需求。采用組培快速繁育的方法，可以在短時間內獲得大量株型整齊，性狀優良的植株。依巴代提·阿外都等［4］以八角金盤的頂芽及側芽作為外植體研究八角金盤組培快繁技術，結果顯示不定芽誘導率最高可達90%，增殖系數最高3.7，生根率最高89%，組培苗移栽成活率最高達85%。發明專利技術“一種組織培養快速繁育花葉八角金盤的方法”［5］報道顯示，花葉八角金盤組培生根率可達95%，移栽成活率也達95%。然而，利用組培方式繁殖蜘蛛網八角金盤鮮見報道，本試驗以蜘蛛網八角金盤為試驗材料，進行蜘蛛網八角金盤組培快繁技術研究。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

供試品種為蜘蛛網八角金盤（圖1）。

1.2 試驗方法

1.2.1 無菌材料的獲得

采集生長健壯、無病蟲害蜘蛛網八角金盤上帶頂芽的幼嫩莖段，洗滌干凈后，在無菌條件下進行滅菌處理，并置于誘導培養基中培養，操作方法：帶芽莖段→0.1%HgC12滅菌20 min→無菌添加不同濃度水沖洗3次→切成2～3 cm長，接入6-BA、NAA的誘導培養基（表1）中，暗培養。每處理100個，重復3次。培養7 d后，轉入新的同種培養基中防止褐化，10 d后芽開始萌動生長，20 d后統計芽誘導情況。

1.2.2 叢生芽的增殖培養

將誘導培養基中誘導出的芽體進行分離，切割成帶芽的單芽，轉入增殖培養基（表1）。采用1/2MS為基礎培養基，加入不同濃度的NAA、6-BA。每處理50個，重復3次。定期觀察其生長狀況并記錄，30 d后統計增殖系數。

1.2.3 叢生芽的生根培養

將增殖培養基中長至3 cm以上的叢芽分離，切割成單芽后，轉入生根培養基（表1）。采用MS為基礎培養基，加入不同濃度的NAA和IBA。每處理100個，重復3次。10 d后觀察小芽的生根情況，30 d后統計長根情況。

1.2.4 瓶苗移栽

瓶苗根系長至2～3 cm時，選擇根系發達、生長健壯的生根苗，煉苗一周后，取出小苗洗凈根部瓊脂，移栽到育苗盤，使用椰糠和泥炭土混合的育苗基質見表1，每盤移栽100株，每個處理重復種植3盤（基質在移栽前提前用0.1%高錳酸鉀進行消毒）。移栽之后，大棚溫度保持15～30℃，濕度保持80%以上，小苗成活后澆水堅持“見干見濕”原則。移栽30 d后統計成活情況。

1.2.5 數據處理與分析

數據處理使用Excel 2003與DPS軟件進行統計分析。

2 結果與討論

2.1 不同培養基對愈傷組織和芽誘導的影響

隨著6-BA濃度的升高，蜘蛛網八角金盤外植體的出芽數和愈傷團塊形成數呈先升后降的趨勢（表2）。當6-BA濃度為3.0 mg/L時，出芽數和愈傷團塊數最高。當NAA濃度超過0.2 mg/L，蜘蛛網八角金盤外植體芽誘導和愈傷團塊的形成受到抑制。因此，MS + 3.0 mg/L 6-BA + 0.1 mg/L NAA是蜘蛛網八角金盤外植體芽誘導和愈傷團塊形成的最佳培養基配方，出芽率達到87.53%，愈傷團塊形成比率達到85.52%。

2.2 不同培養基對芽增殖的影響

4組培養基對芽增殖的效果如表3所示，在NAA濃度為0.1 mg/L時，適當提高6-BA的濃度有利于提高蜘蛛網八角金盤的增殖系數；在NAA濃度為0.2 mg/L時，隨著6-BA濃度的提高，蜘蛛網八角金盤增殖受到抑制；總體上，隨著6-BA濃度的升高，蜘蛛網八角金盤增殖系數呈先升后降的趨勢。本試驗中用于蜘蛛網八角金盤芽增殖的最佳培養基是1/2 MS + 1.5 mg/L 6-BA + 0.2 mg/L NAA，增殖系數為3.56，變異率為0，芽生長健壯，葉片正常。

2.3 不同培養基對叢生芽生根的影響

當繼代苗長到3 cm以上時，選擇生長正常、健壯的小芽，從叢生芽塊上單個切下轉至生根培養基上進行生根誘導。生根接種后，放在弱光下（光照48～95 μmol/m2·s）培養10 d左右時，小苗的基部形成白色突起，并逐漸伸長，形成明顯幼根，長成完整小植株，此時宜逐步增加散射光照強度使小苗更粗壯。

不同培養基的生根效果如表4所示，MS + 0.1 mg/L NAA + 1.5 mg/L IBA和MS + 0.2 mg/L NAA + 6.0 mg/L IBA培養基中的生根率較低，生根時間長，生根數少，30 d后只有1～2條0.5 cm長的根，所以不適宜作為生根培養基。生根最適培養基為MS + 0.1 mg/L NAA + 3.0 mg/L IBA，生根率達到96.30%，30 d后有3～4條0.5 cm長的根。

2.4 不同育苗基質對組培苗移栽成活的影響

將已培養30 d以上、根系好、生長健壯的小苗移栽到溫室大棚內進行瓶外培養，移栽1個月后，對各種基質的移栽成活情況進行抽查統計，結果表明，不同的育苗基質對蜘蛛網八角金盤組培苗的移栽成活差異明顯。當基質為40%椰糠+60%泥炭土的組合時，種苗移栽成活率最高，成活率達到96.42%，小苗生長健壯（表5）。

3 討論與結論

大多數植物應在其生長開始的季節采樣較好，若在生長末期采樣，外植體在培養基中反應遲鈍或不能培養成功［6］。外植體初代誘導除了受到外植體本身取材影響外，與培養過程中使用的生長調節劑也是息息相關［7］。本試驗結果顯示，在蜘蛛網八角金盤組培快繁中，利用健康植株的帶芽莖段為外植體誘導不定叢芽，適當提高6-BA濃度更有利于誘導出正常的叢芽，但當6-BA濃度≥

7.0 mg/L不利于芽的誘導。

鵝掌楸與八角金盤同為五加科植物，楊玉賢［8］研究鵝掌楸組培技術發現，當6-BA濃度在0.1～0.5 mg/L之間，提高濃度有利于組培苗增殖，當濃度為0.5～1.0 mg/L，結果則相反。依巴代提·阿外都等［4］研究結果顯示，6-BA濃度在0.5～1.5 mg/L和NAA濃度在0.1～0.5 mg/L范圍內，適當提高6-BA和NAA濃度有利于八角金盤增殖。本試驗結果顯示，在低濃度NAA情況下，適當提高6-BA濃度有利于促進蜘蛛網八角金盤的增殖；當NAA濃度提高之后，6-BA濃度提高不利于增殖；1/2 MS + 1.5 mg/L 6-BA + 0.2 mg/L NAA為最佳增殖培養基，增殖率為3.56，變異率為0。本試驗結果與依巴代提·阿外都等人試驗結果相似。

在植物的組培生產中，組培苗生根培養及后期煉苗移栽是極其重要的環節［9，10］。組培苗生根的質量不僅影響后期的長勢，而且還影響到組培苗產業化生產的成本［11］。在生根培養過程中，培養基的種類、不同生長調節劑類型及配比均對根的生長有重要影響。研究不同生長調節劑對八角金盤屬海南冬青組培苗生根影響時發現，同時使用IBA和NAA對海南冬青生根的促進作用具有疊加效果，且在一定濃度范圍內隨著2種生長調節劑濃度升高，生根率提高［12］。龔范武［13］等人研究激素和基質對八角金盤扦插生根的結果顯示，八角金盤生根率隨著IBA和NAA濃度升高而升高，透氣性、保濕性好的種植基質有利于提高八角金盤扦插種植成活率。本試驗結果顯示，IBA和NAA濃度過高或者過低都不利于蜘蛛網八角金盤組培苗生根，MS + 0.1 mg/L NAA + 3.0 mg/L IBA為最佳組合，生根率達到96.42%。不同基質組合對蜘蛛網八角金盤組培苗移栽成活率的影響差異大，其中40%椰糠+60%泥炭土基質組合的移栽成活率最高，且有利于蜘蛛網八角金盤移栽后的生長。

參考文獻：

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（責任編輯：許玲）